Введение к работе
Актуальность проблемы.
В области прикладной и экспериментальной иммунологии за последнее десятилетие открыты важнейшие закономерности функционирования иммунной системы, новые возможности и перспективы, намечены ' пути поиска решений в области регуляции функций Т- и В-систем лимфоцитов, их субпопуляций, факторов естественной резистентности организма и других звеньев иммунной системы, более полно раскрывающие роль иммунной системы в норме и патологии. Разработан и получил дальнейшее развитие комплексный подход к изучению функционирования иммунной системы,' как наи-.более адекватный и всеобъемлющий для оценки естественных и приобретенных механизмов иммунологической реактивности, уровней интеграции и регуляции системы ( Петров Р. В. с соав., 1984; Кузник Б. И. с соав. , 1989; Лебедев А. И. , 1990; Титов Л. П. , 1991 ).
Актуальность настоящего исследования обусловлена рядом факторов. Во-первых, это довольно высокая ( от 10 до 30%) частота выявления состояния анергии у лиц больных туберкулезом и инфицированных микобактериями (Верещагин В. К., 1983; Титов Л. П. , 1991; Vandevenne et al. , 1987). Во-вторых, помимо мико-бактериозов, имеется широкий спектр заболеваний бактериальной, вирусной и протозойной природы, онкозаболевания и другие, при которых отмечается формирование состояния анергии, и при которых анергия является важным звеном патогенеза ( Адамбеков Д. А. с соав. , 1989; Титов Л. II , 1989, Вахидова Г. А. с соав. , 1991; Avrion N. , 1989). Кроме того, рост уровня заболеваемости туберкулезом, отмечающийся в последнее время, также указывает на ее актуальность (согласно сведениям ВОЗ ежегодно регистрируется свыше 400 тысяч новых случаев туберкулеза и 40 тысяч случаев смерти). По словам Генерального директора ВОЗ'X. Накадзи-ма, туберкулез и в XX веке остается социально-экономической болезнью. Увеличение заболеваемости туберкулезом в странах Западной Европы в период с 1988 по 1990 годы варьирует от 3 до 33 % ( Press release WHO, 1992). Серьезной проблемой является сочетание туберкулеза и СПИДа. Формирование анергии у детей, вакцинированных ЩЖ, представляет чрезвычайно существенную
- 4 - ' проблему на пути достижения успеха в иммунопрофилактике туберкулеза во всем мире.
. Раскрытие механизмов, определяющих анергию, выявление взаимосвязей между различными звеньями системы иммунитета, участвующими в ее формировании, позволят получить важные результаты не только теоретического, но и практического . плана, разработать методы коррекции и отмены анергии, ее поддержания.
Цель и задачи исследования.
Целью настоящей работы явилось выяснение особенностей функционирования и взаимосвязи количественных и функциональных параметров основных звеньев иммунной системы в процессе формирования анергии, вызванной введением вакцины БЦЖ, а также поиск путей коррекции этого состояния. Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:
-
Отработать модель формирования анергии и развития иммунного ответа на БЦЖ у мышей, генетически различающихся по чувствительности к микобактериальным антигенам.
-
Изучить в динамике развитие клеточного и гуморального иммунного ответа в процессе развития анергии и нормального иммунного ответа на вакцину БЦЖ.
-
Исследовать характер взаимосвязей между показателями различных звеньев иммунной системы при изучаемых состояниях.
* 4. Исследовать влияние теофиллина, как универсального модулятора функции иммунокомпетентных клеток и межклеточных взаимодействий, на формирование ГЗТ и анергии.
Научная новизна результатов проведенного исследования состоит в установлении межлинейных различий в уровнях функциональной активности компонентов комплемента у мышей линий СВА и гибридов F1. Установлены различия функциональной активности компонентов комплемента при развитии состояния анергии и нормального иммунного ответа у линий животных, различающихся по чувствительности к М. bovis. Выявлено изменение уровня внутрисистемных связей белков комплемента при развитии анергии и нормального иммунного ответа.
Впервые установлена разнонаправленность, в зависимости от уровня исходной иммунореактивности, действия теофиллина при использовании его для модуляции внутрикожных реакций ГЗТ при
- 5 -сочетанием введении с туберкулином.
Впервые установлено модулирующее действие теофиллина при развитии анергии к вакцине БЦЖ. Теофиллин, назначаемый животным системно в разные периоды формирования иммунного ответа, предупреждал развитие анергии или отменял ее, оказывал модулирующее действие на пролиферативную активность клеток селезенки и тимуса, систему комплемента
Установлено наличие корреляционных связей между величиной реакции ГЗТ на туберкулин и функциональной активностью белков системы комплемента, у животных, иммунизированных вакциной БЦЖ. Показано, что большинство компонентов классического и альтернативного путей активации ( уровень их функциональной активности) имеют отрицательные связи с величиной реакции ГЗТ.
На защиту выносятся следующие положения диссертации:
животные, различающиеся генетически детерминированной чувствительностью к антигенам М. bovis, отличаются уровнями иммунологической реактивности как исходно, так и в процессе развития иммунного ответа на разные дозы вакцины БЦЖ;
формирование анергии «а вакцину БЦЖ сопровождается значительными изменениями состояния клеточного звена иммунитета ( снижение отвечаемости in vivo и in vitro на туберкулин), функ-циональной активности системы комплемента (повышением общей активности и снижением активности отдельных белков системы комплемента) и отсутствием существенных различий в функционировании гуморального звена иммунитета;
локальное и системное применение теофиллина вызывает как предупреждение, так и отмену состояния анергии, а также указывает на иммуномодулирующий эффект препарата при развитии нормального иммунного ответа на введение БЦЖ.
Практическая значимость работы.
Полученные данные позволяют рекомендовать теофиллин в качестве препарата для отмены состояния анергии на микобактери-альнпе антигены при постановке проб с туберкулином с целью вы-яіиі"нин скрытой механизмами анергии сенсибилизации организма и, соответственно, улучшении иммунодиагностики туберкулеза. їі'іпі>.чї.: =їїї--ціп* разработанного подхода мо;'.>:т найти широкое при-
менение в животноводстве для выявления животных (крупного и мелкого рогатого скота), инфицированных микобактериями, с лож-ноотрицательными реакциями на туберкулин. Теофиллин также может быть рекомендован для комплексной терапии больных разными формами туберкулеза с целью снижения интенсивности гиперэрги-ческих эффекторных иммунологических механизмов и, соответственно, иммунологического повреждения тканей.
Данные об участии системы комплемента в процессах формирования анергии, о взаимосвязях ее с функционированием Т-звена иммунитета, о возможносш проведения иммунокоррекции используются в учебном процессе на кафедре микробиологии с иммунологией и вирусологией МГШ и могут быть рекомендованы в качестве учебно-методического материала для студентов медицинских и биологических ВУЗов республики.
Подходы и методики определения интенсивности реакции гиперчувствительности замедленного типа, определения функциональной активности белков системы комплемента используются при проведении научно-исследовательской работы по проблемам изучения механизмов ГЗТ лабораторией иммунологии детского возраста ЦНИЛ, кафедрой микробиологии, кафедрой гигиены труда, кафедрой нормальной физиологии, кафедрой радиационной медицины и экологии МГМИ.
Апробация работы.
Результаты работы доложены на III международном конгрессе по ветеринарной иммунологии ( Будапешт, 1992 г.); заседании кафедры микробиологии МГМИ (1993 г.); международной конференции " Актуальные вопросы микробиологии, эпидемиологии и иммунологии инфекционных болезней ( Харьков, 1993).
По результатам работы имеется 6 публикаций, из них две в зарубежной печати.
Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 134 страницах, включая 18 таблиц и 46 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 3-х глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов. Библиографический указатель включает 98
- 7 -отечественных и 92 источника зарубежных авторов.