Введение к работе
Актуальность проблемы. Туберкулез является одной из наиболее распространенных и вместе с тем наиболее опасных для человека хронических инфекций. Больной туберкулезом выделяет во внешнюю среду большое количество микобактерии туберкулеза (МБТ), часть которых, оседая на поверхностях различных предметов, может накапливаться и сохранять жизнеспособность в течение длительного времени и стать источником заражения (В.М. Ваксов, 1972; М. Reznicov, 1974; М. Iamamoto, 1985).
При определении загрязненности различных поверхностей мико-бактериями наиболее распространенным является метод смыва с помощью ватного тампона (Н.В. Щербакова, 1976; Н.И. Любкина, 1989). Исследования, проведенные в 1990 году сотрудниками бактериологической лаборатории Свердловского НИИ туберкулеза показали, что применение существующих методов сбора и обработки материала приводит к потере микобактерии из-за их фиксации на вате и к, большому числу проростов при посевах (до 18-20%), что значительно снижает результативность исследований (Л.И. Самусевич с соавторами, 1990). Кроме того, микобактерии во внешней среде претерпевают воздействие различных неблагоприятных факторов, поэтому большое значение приобретают методы их культивирования. Особое внимание при этом уделяется созданию новых сред обогащения, различных по составу и обладающих элективностью в отношении микобактерии туберкулеза (F. Рог-taels, 1983; В.А. Аникин., 1987; Г.Г. Мордовской, 1987 и др.).
Современный интерьер помещений представлен предметами и конструкциями, изготовленными из материалов с различной
структурой (пластмасса, кожзаменитель, полистирол, плексигла и др.) и покрытыми разными синтетическими лаками и краскам* Вид материала может оказывать влияние на особенности выявле ния микобактерий, однако этот вопрос требует дополнительног изучения (Б.Ф. Аленький, 1977).
Особый интерес представляет изучение загрязненності микобактериями различных материалов в учреждениях противо туберкулезной службы, где возможно выделение возбудителя ту беркулеза во внешнюю среду в силу скопления большого числ. больных - бактериовыделителей, а также проведения исследова ний заразного материала. Медицинский персонал может подвер гаться заражению туберкулезом как при прямом контакте с боль ными, так и опосредованно - через загрязненные поверхности : помещениях противотуберкулезных учреждений (А.А. Приймав Л.М. Плотникова, 1992).
Исходя из изложенного, целью исследований было совер шенствование методов выделения микобактерий на объекта: внешней среды и их культивирования, применение которых по зволит более достоверно оценить загрязненность микобактериямі поверхностей различных предметов.
Цель исследования. Повысить эффективность бактериоло гических методов выделения микобактерий с поверхностей пред метов, изготовленных из различных материалов.
Задачи исследования В соответствии с поставленної целью были сформулированы следующие задачи:
1. Разработать новую конструкцию тампона для взятия смывов і
модифицировать способ его обработки перед посевом.
2. Разработать высокопитательную среду для культивировани:
микобактерий.
-
Определить влияние вида материала на выявляемость мико-бактерий.
-
Выявить и оценить степень загрязненности микобактериями различных поверхностей в помещениях противотуберкулезных учреждений.
-
Изучить вирулентность и другие свойства (морфологические, культуральные, биохимические, чувствительность к противотуберкулезным препаратам) микобактерий, выделенных в помещениях противотуберкулезных учреждений.
Научная новизна В результате исследования разработан более эффективный по сравнению с существующим, метод выделения микобактерий с поверхностей различных материалов, включающий сбор материала тампоном новой конструкции с минимально-оптимальных площадей и модифицированный способ обработки исследуемого материала. Изобретена новая полужидкая питательная среда обогащения для посева исследуемого материала, применение которой позволяет ускорить рост микобактерий и повысить их выявляемость. Впервые установлена зависимость массивности выделения микобактерий от вида материала. На базе этого впервые определены минимально-оптимальные площади для оценки степени загрязненности микобактериями различных материалов.
Практическое значение Разработана инструкция по методу выделения микобактерий с поверхностей различных материалов, которая утверждена Департаментом здравоохранения Свердловской области и внедрена в практическую работу лабораторий противотуберкулезных учреждений Уральского и Волго-Вятского регионов. Кроме того, на основании изучения ростовых свойств микобактерий разработана и внедрена в практику бактериологи-
ческих лабораторий противотуберкулезных диспансеров облает полужидкая питательная среда для выделения микобактерий т\ беркулеза.
Основные положения, выносимые на зашиту:
1. Использование для взятия смыва новой конструкции тамш
на с применением поролоновой губки; смачивание тампона вмест
обычно употребляемого изотонического раствора 5% рас-творо
фосфорнокислого натрия трехзамещенного, одновременно являк
щегося также деконтаминантом, и применение разработанно
нами полужидкой питательной среды в комплексе с плотным
питательными средами позволяют повысить выделение микобаг
терий в 1,7 - 2,0 раза и сократить сроки их роста в 1,7-1,9 раза.
2. В помещениях противотуберкулезных учреждений загряг
ненность микобактериями поверхностей оборудования и предм*
тов зависит от вида материала, из которого они изготовлены.
Реализация работы Предложенный метод выделения м* кобактерий с поверхностей различных материалов внедрен применяется в бактериологических лабораториях Свердловскої областного научно - практического объединения "Фтизиопульмс нология", противотуберкулезных диспансеров городов Екатерин бурга, Первоуральска, Ирбита, Серова и др.
Апробация диссертации Материалы диссертации доложен: и обсуждены на научно-практической конференции молодых уч« ных и специалистов 23. 11. 88 (Свердловск), семинаре-совещани лабораторных служб противотуберкулезных учреждений Уралі ского и Волго-Вятского регионов 19.12.95, заседаниях Ученого ее вета Свердловского НИИ "Фтизиопульмонологии" 28.01. 92 и 6. 1 95.
Публикации По теме диссертации опубликованы 3 работы, разработано 1 изобретение.
Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 153 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований в 3 главах, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Библиографический указатель включает 151 отечественный и 122 иностранных источника. Работа иллюстрирована 26 таблицами и 2 рисунками.
Материал и методики исследования В основу работы положена разработка более эффективного метода выявления микобак-терий и его сравнение с существующим методом. Выполнено 6580 исследований в эксперименте с использованием лабораторного штамма HJ7Rv и проведено 351 исследование (выполнено 4175 смывов) на загрязненность микобактериями поверхностей различных предметов и конструкций в помещениях противотуберкулезных учреждений городов Алапаевска, Асбеста, Березовского, Вол-чанска, Екатеринбурга, Каменска-Уральского, Камышлова, Кировограда, Краснотурьинска, Первоуральска, Серова, Сысерти, Та-лицы и Туринска.
При изучении свойств микобактерий (58 культур), выделенных из внешней среды исследованы их морфологические свойства, скорость размножения и образования видимых колоний, ферментативная активность, чувствительность к противотуберкулезным препаратам, вирулентность (3580 исследования). Для типирования и определения вирулентности выделенных микобактерий использовано 120 морских свинок и 8 кроликов.