Введение к работе
Актуальность темы. В современных условиях проблема госпитальных (внутрибольничных) инфекций полностью сохраняет свою актуальность. В лечебных учреждениях возникают заболевания, которые вызываются не только патогенными, но и условно-патогенными микроорганизмами. Эти микроорганизмы представляют опасность при поражении ослабленных людей, при попадании в обычно стерильные органы и ткани, при большой инфицирующей дозе возбудителя (Р.Х.Яфаев и Л.П.Зуева,1989).Множество сообщений о большом значении внутрибольничной инфекции опубликовано в Англии, Франции, США и др. странах, где эти заболевания, нередко с летальных исходом, возникают у 5-12% госпитализированных лиц (Lewis и KIein,1979;Dasclmer,1981).
Бактерии родов Klebsiella и Enlerobacter относятся к условно-патогенным и являются частыми возбудителями внутрибольничной инфекции /В.Д.Беляков и соавт.,1976; В.И.Покровский.1985/.
Клинические проявления вызываемых клебенеллами патологических процессов многообразны. Клебсиеллы, как и другие условно-патогенные микробы, поражают, как правило, люден со сниженной естественной резистентностью организма. Чаще всего это онкологические и постравматические больные, новорожденные и дети первого года жизни, беременные женщины, алкоголики. У таких больных клеб-сиеллезная инфекция принимает крайне тяжелое течение и часто заканчивается сепсисом с летальностью до 34-60%, особенно у детей первого года жизни и у новорожденных (В.Д.Беляковя соавт.,1976; Л.Д.Доновитц,1990; Л.А.Березина и соавт.,1993).
Бактерии рода Enterobacter рода выделяются из мочи.кала,крови, мокроты, спннно-мозговой жидкости, плевральной жидкости, с поверхности кожи, из желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы. Почти все представители энтеробактеров способны вызывать тяжелые заболевания у человека (В.И.Бршшс и соавт.,1986; В.М.Бондаренко н соавт.,1987; Gaston и Pitt. 1984). Описаны случаи вспышек внутрибольничной инфекции, связанных с энтеробактерами.
Несмотря на значительный период изучения клебсиелл и энтеробактеров, их идентификация, внутриродовое и внутривидовое разграничение представляют известные трудности.
Используемые в настоящее время методы., эпидемиологического маркирования бактерий сводятся к традиционным (классическим), включающим определение биоваров, бактериошшотипнрование, фаго-тигшрование, резистенстипнрование, серотнпирование, и нетрадицион-ным,основанным на молекулярных характеристиках бактерий. Последние требуют специального оборудования, реактивов, обученных специалистов, что ведет к значительным материальным затратам. Кроме
того, ии методы не всегда достоверно воспроизводимы.Исходя из этого, рациональным является совершенствование классических методов нитрования путем разработки новых типирующих систем с удовлетворяющей современным потребностям стандартностью и доступностью для практических лабораторий.Среди этих методов особое место принадлежит фаготипированию.оправдавшему себя при изучении многих бактерий. Схемы фаготипироваиия бактерий требуют постоянного совершенствования в связи с происходящими изменениями в циркуляции бактерий. Это в полной мере относится к клебсиеллаи и энтеро-бакзерам.
Цель и задачи работы. Исходя из сказанного выше, целью нашей работы являлось изучение эффективности маркирования бактерий родов Klebsiella и Enterobacter с помощью различных методов.
Для осуществления поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Исследовать возможности разграничения клебсиелл и энтербак-теров по биологическим свойствам: биохимическая активность, антибиоз нкочувствителыюсть, плазмндный профиль ДНК.
-
Изучить возможность разграничения этих бактерий по факторам иатогенности.
-
Усовершенствовать схемы фаготипироваиия клебсиелл и энте-робактеров.
Работа проводилась в соответствии с основными направлениями НИР Кабардино-Балкарского государственного университета. Тема: "Разработка способов выявления и эпидемиологического маркирования условно-патогенных представителен энтеробактерий", зарегистрирована во ВНТИЦентре, № гос.регистации 01.91.0044705.
Научная новизна. Показано, что в качестве эпидемиологических маркеров клебсиелл и энтеробактеров может быть использовано определение факторов патогешюсти бактерий, плазмидного профиля ДНК и множественной устойчивости к антибиотикам! Клебсиеллы и энтеро-бактеры могут типироваться с помощью фагов Klebsiella и Enterobacter.
Практическая ценность. Показана возможность типнрования клебсиелл и энтеробакгеров на основании смочетания у них факторов патогешюсти (патотипирование). Разработаны рабочие схемы фаготипироваиия клинических штаммов клебсиелл и энтеробактеров с помощью фагов этих бактерий.
Апробация работы. Материалы диссертации опубликованы в 7 работах, из них 1 в центральной печати.
Полученные данные доложены:
1. На выездной сессии Президиума Академии естественных наук (Махачкала, 1993).
-
На научной конференции, посвященной 25-летию ветеринарного факультета КБАМИ (Нальчик, 1994).
-
На 2-ой Всероссийской научной конференции по программе "Университеты России" раздел "Медицина" (Нальчик, 1994).
-
На научной конференции молодых ученых "Достижения медицинской науки - практическому здравоохранению" (Нальчик, 1995).
Положения, выносимые иа защиту.
-
Клинические штаммы клебсиелл и энтеробактеров могут разграничиваться на основании продуцируемых ими факторов патоген-ности, по плазмидному профилю ДНК, по множественной устойчивости к антибиотикам.
-
Типнропание клебсиелл и энтеробактеров может производиться как с помощью фагов Klebsiella, так и с фагами Enterobacter.
-
Результаты фаготипирования клебсиелл и энтеробактеров показывают тесную связь этих бактерий.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 170 страницах машинописного текста, иллюстрирована 44 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 4 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, указателя литературы, состоящего из 231 источника, из которых 75 отечественных и 156 зарубежных.