Введение к работе
Актуальность проблемы. В последние годы среди основных возбудителей ишсыса все заметь ноіпнг-іяст тяо.чогячестгпя рпя. грг."стр"ца тельных микроорганизмов. И несмотря на широкое внедрение в клиническую практику новых антибиотиков проблема лечения сепсиса, вызванного этими возбудителями, продолжает оставаться актуальной ( Е.Н. Левина.1985, WHO Drug Inf.,1990, Martin е.а.,1992). Это побуждает к поиску новых, более эффективных методов лечения этого заболевания. Патогенетически оправданным при сепсисе является включение в комплекс лечебных мероприятий эфферентных методов детоксикапии, одним из которых является гемосорбщш. Рациональность применения этого метода при данной патологии на вызывает сомнений и констатируется многими авторами ( П.Г.Яншек с соавт.,1987, И.И.Неймарк, А.П.Калинин,1990 и др.), однако, клиническая эффективность сорбционных методов детоксикапии при сепсисе до настоящего времени не получила должного теоретического обоснования. В частности, недостаточно изучен микробиологический аспект этой проблемы. Хотя "этиоспецифическое" действие является одной из важнейших составляющих лечебного эффекта гемосорбщш при генерализованной инфекции, до сих пор нет исчерпывающих данных о сравнительной эффективности сорбции возбудителей и их токсических продухтон различными сорбентами; нуждаются в уточнении механизмы взаимодействия микробных клеток с активированными углями; практически нет данных о характере воздействия сорбентов на вирулентность возбудителей. Немногочисленные сообщения о результатах экспериментальных исследований поглотительной способности
различных сорбирующих материалов в отношении микробных агентов (П.Г.Мадонов, Я.Н.Романова, 1987, М.Е.Шор-Чудновский с соавт.,1988, Н.Н.Прутовых с соавт.,1988, А.В.Григорьев с соавт., 1988,1991) касаются, как правило, ограниченного круга сорбентов, а различие применяемых методик делает результаты несопоставимыми. Это затрудняет рациональный выбор адекватного по физико-химическим параметрам сорбента в каждом конкретном случае в зависимости от вида возбудителя и характера течения заболевания. Все это предопределило целесообразноссть настоящего исследования.
Цель работы. Оценка эффективности элиминации бактерий и их токсинов из крови различными гемосорбентами и определение характера их воздействия на вирулентные свойства грамотрицательных возбудителей сепсиса в эксперименте.
Задачи исследования.
-
Изучить сорбционную эффективность различных гемосорбентов относительно возбудителей грамотрицательного сепсиса ( Esherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa), а также липо-полисахарида (ЛПС) и экзополнсахарида слизи P.acruginosa.
-
Оценить эффективность экспериментальных образцов гемосорбента ВНИИТУ с различной степенью окисленности при сорбции цельных микробных клеток, а также ЛПС и экзополнсахарида слизи P.aeruginosa.
-
Определить характер влияния сорбирующих материалов на биологические свойства возбудителей, обусловливающие их вирулентность (гидрофобные, адгезивные свойства; чувтвитсльность к бактерицидному действию нормальной сыворотки и цельной крови; чувствительность к антибиотикам.
-
На основании Полученных результатов разработать рекомендации по рациональному выбору и использованию сорбентов при грамотрица-тельной инфекции.
Научная новизна и теоретическая значимость работы. Впервые дана
комплексная оценка широкому кругу применяемых в настоящее время в клинической практике сорбентов по эффективности элиминации из крови наиболее распространенных грамотрицательных возбудителей сепсиса и их токсических продуктов; проанализированы механизмы адгезии микроорганизмов на углеродных сорбентах, исследован характер изменений поверхностных характеристик и связанных с ними вирулентных свойств возбудителей в результате взаимодействия с сорбирующими материалами; получены модифицированные образцы гемосорбента ВНИИТУ с различной степенью окисленности и доказана экспериментально их большая эффективность по сравнению с исходной неокисленной формой по отношению к возбудителям и их токсическим продуктам; даны рекомендации по оптимизации применения сорбентов в зависимости от этиологии сепсиса.
Практическая ценность работы и внедрение результатов исследования в практику.
Практическое значение имеют как данные о сорбциошюй эффективности широкого круга применяемых в настоящее время гемо-сорбентов в отношении наиболее распространенных грамотрицательных возбудителей сепсиса и их токсических продуктов, так и результаты изучения изменчивости возбудителей под влиянием углеродных сорбирующих материалов, свидетельствующие о снижении их вирулентности и изменении антибиотикочувствителыюсти. По результатам работы составлено Информационное письмо , предназначенное для врачей хирургических и реанимационных отделений, отделений сорбционных методов терапии, в котором содержатся рекомендации по рациональному выбору сорбента в зависимости от вида этиологического агента и характера течения заболевания; оптимизации антибиотикотерапии с учетом характера влияния сорбентов на чувствительность возбудителей к отдельным антибиотикам.
Апробация работы. Результаты работы были доложены на Международном симпозиуме 'Эндогенные интоксикации" (Санкт-Петербург, 14-16 июня, 1994), на семинаре в Институте катализа Сибирского отделения РАМН (1994)
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из оглавления, введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы. Работа изложена на 178 страницах, содержит 40 таблиц и 29 рисунков. Объем цитируемой литературы включает 265 наименований, в том числе 169 отечественных и 96 иностранных авторов.