Введение к работе
1. Актуальность темы. Сохранность молодняка сельскохозяйственных животных является одним из основных факторов обеспечения рентабельности животноводства. Однако эффективность развития его сдерживается из-за широкого распространения инфекционных заболеваний молодняка крупного рогатого скота различной этиологии. Особое место занимают инфекционные болезни респираторных органов, которые представляют группу разнородных патологий, отличающихся чрезвычайным множеством причин, включающих широкий спектр различных факторов. Основной причиной данных болезней молодняка являются инфекционные агенты, в том числе вирусы, бактерии, хламидии и другие, вирулентность которых повышается на фоне неблагоприятных условий содержания и кормления животных (Мищенко В.А и соавт., 2000; 2003).
Многие исследователи считают, что основная роль в развитии респираторных заболеваний принадлежит вирусам и, прежде всего, вирусам парагрип-па-3, инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, которые регистрируются во многих регионах нашей страны (Сюрин В.Н., Фомина Н.В., 1979; Гаф- . фаров Х.З., 1986; Закутский Н.И., 1998; Шипицын А.Г., 1998; Высокопоясный А.И.,2000).
В подавляющем большинстве случаев респираторные заболевания у телят протекают как смешанные инфекции. В связи с этим диагностика, а также проведение специфических и организационно-хозяйственных мероприятий должна быть комплексной.
Для специфической профилактики вирусных инфекций применяются живые и инактивированные вакцины. В последние годы в связи с тем, что живые вакцины из аттенуированных штаммов вызывают персистенцию и являются потенциально опасными в плане возможной реверсии вирусов в организме привитых животных, усилия зарубежных и отечественных ученых направлены на разработку безопасных и эффективных инактивированных препаратов для специфической
защиты от этих инфекций (За ъЧИ. и гпявт, 'Р07; Рчтитдп ; Гаффаров
І КС НАЦИОНАЛЬНА! I
Х.З.,ГумеровВ.Г.,2000). | БИБЛИОТЕКА |
Несмотря на достижения в развитии клеточной биотехнологии (Катингер X., Шейрер У., 1989; Курносов А.Н. и соавт., 1990) производство вирусного сырья на перевиваемых клетках для изготовления противовирусных препаратов до настоящего времени испытывает определенные трудности. Широко распространенный способ пристеночного выращивания клеток в матрасах ввиду малой производительности и большой трудоемкости мало пригоден для промышленного использования (Сергеев ВА, 1976). В этом отношения наиболее универсальным является роллерный способ получения клеток в круговом монослое, однако он требует тщательной отработки режимов культивирования для конкретных клеточных линий, чтобы обеспечить максимальную реализацию их ростового потенциала (Тарасов В.Н., 1990; Закутский Н.И., 1998).
1.2. Цель и задачи исследований. Цель работы: разработать технологию крупномасштабного выращивания вирусов ПГ-3, ИРТ и хламидий для изготовления ассоциированной инактивированной вакцины. Основные задачи:
1.Провести клинико-эпизоотологические исследования и серологический мониторинг респираторных инфекций крупного рогатого скота;
2.Изучить культурально-морфологические и биологические свойства производственных и эпизоотических штаммов вирусов ПГ-3, ИРТ и хламидий крупного рогатого скота;
3.Изучить факторы, влияющие на уровень накопления вирусов ПГ-3 и ИРТ в перевиваемых линиях культур клеток и хламидий в куриных эмбрионах, а также изыскать оптимальные параметры их выращивания;
4.Изготовить экспериментальные образцы инактивированной ассоциированной вакцины против ПГ-3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота и изучить их антигенность на лабораторных животных;
5. Изучить иммуногенность ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ-3, ИРТ и хламидиоза в остром опыте на телятах.
1.3. Научная новизна. Проведены клинико-эпизоотологические исследования и серологический'мониторинг респираторных инфекций крупного ро-
5 гатого скота в 96 - и хозяйствах Поволжья и Урала. На основании полученных данных впервые доказана доминирующая роль вирусов ПГ-3, ИРТ и хламидий в респираторной патологии телят вышеуказанных регионов.
Впервые по результатам изучения биологических свойств отобраны производственные и эпизоотические штаммы вирусов ПГ-3, ИРТ и хламидий для конструирования ассоциированной инактивированной вакцины. На основании изучения параметров культивирования этих возбудителей разработаны оптимальные условия крупномасштабной технологии их выращивания.
Проведена оценка антигенной и иммуногенной активности ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ-3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота на кроликах и телятах.
1.4. Практическая значимость. Практическая значимость работы заключается в следующем:
- на основании анализа литературы, клинико-эпизоотологических исследований и результатов серологического мониторинга установлено, что основными этиологическими агентами респираторных заболеваний телят в хозяйствах Поволжья и Урала являются вирусы парагриппа-3, инфекционного ри-нотрахеита и хламидий;
- на основании изучения культуральных и биологических свойств вирусов ПГ-3, ИРТ отобраны высокоактивные штаммы («ТМ-50» и «ТК-А»), а также чувствительные к ним перевиваемые линии культуры клеток (МДВК и TR);
-теоретически и экспериментально обоснованы технологические параметры выращивания вирусов ПГ-3 и ИРТ на культурах клеток МДВК и TR, а также хламидий на КЭ, обеспечивающие необходимый уровень накопления антигенов для изготовления ассоциированной инактивированной вакцины;
-разработана технология крупномасштабного выращивания вирусов ПГ-3, ИРТ и хламидий для изготовления ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против вышеуказанных возбудителей;
-в опытах на кроликах доказана более высокая антигенная активность эмульсионного варианта ассоциированной инактивированной вакцины против ПГ-3,
ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота по сравнению с ГОА- вариантом биопрепарата;
-доказана высокая протективность ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против ПГ-3, ИРТ и хламидиоза крупного рогатого скота в остром опыте на телятах.
-
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: отчетных научных конференциях Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института (Казань, 1999-2003 г.г.); Республиканской научно-производственной конференции «Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии» (Казань, 1999 г.); международной конференции «Инфекционные и инвазионные болезни» (Казань, 2000г.); Всероссийской научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов, посвященной 30- летию института (Щелково, 2000г.); Втором съезде ветеринарных врачей республики Татарстан (Казань, 2001г.); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Ульяновск, 2003г.)
-
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в которых изложены основные положения выполненной работы.
-
Основные положения диссертации, выдвигаемые для защиты.
результаты исследований позволили составить нормативно технические документы: « Технические условия » на ассоциированную инактивированную вакцину против ПГ-3, ИРТ и хламидиоза КРС, утвержденные директором ВНИВИ 18.12.2001г.; «Временное наставление по применению вакцины», утвержденное начальником ГУВ КМ РТ 20.01.03 г.;
изучение клинико-эпизоотологических особенностей респираторных заболеваний телят и проведение серологического мониторинга в неблагополучных хозяйствах Поволжья и Урала;
-результаты изучения кулыурально-морфологических и биологических свойств производственных и эпизоотических штаммов вирусов ПГ-3, ИРТ и
7 хламидий крупного рогатого скота;
- выявление факторов, влияющих на уровень накопления вирусов ПГ-3 и ИРТ на перевиваемых линиях культур клеток, хламидий - на куриных эмбрионах;
- данные по разработке технологии крупномасштабного выращивания ви
русов ПГ-3, ИРТ и хламидий для изготовления ассоциированной инак-
тивированной вакцины;
- изготовление экспериментальных образцов ассоциированной инак-
тивированной вакцины против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и
хламидиоза крупного рогатого скота и изучение их антигенной и иммуногенной
активностей на кроликах и телятах.
1.8. Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 132 страницах машинописного текста и включают титульный лист, введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Список литературы включает 153 работы отечественных и 59- иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами, 6 рисунками. В приложении представлены документы, подтверждающие результаты отдельных этапов работы, их научную и практическую ценность.
