Введение к работе
1.1. Актуальность проблемы. Рост в Российской Федерации острых килечных инфекций и дисбактериозов среди населения как следствие эпидемио-югического и экологического неблагополучия обуславливает необходимость эазработки и внедрения в медицинскую практику новых высокоэффективных ;редств и методов комплексной профилактики и лечения. Одним из подобных трепаратов, отвечающих современным требованиям, является пробиотик -шоспорин.
Биоспорин - новый комплексный пробиотик на основе двух видов иэробных спорообразующих бактерий. Предназначен для профилактики и ле-іения острых кишечных инфекций, вызываемых патогенными и условно-іатогенньїми микроорганизмами (сальмонеллами, шигеллами, энтеропатоген-шми штаммами кишечной палочки, протеем и Кандидами), в том числе и ан-"ибиотикоустойчивыми; для лиц перенесших ОКИ, при продолжении выделе-іия возбудителя или наличии дисфункции кишечника, для коррекции микрофлоры кишечника при дисбактериозах, возникших в результате антибиотико-^ерапии и других причин, а также для профилактики и лечения диареи у сель-жохозяйственных животных.
До 1996 года данный препарат выпускался лишь на Украине Днепро-іетровским химфармзаводом в ограниченных количествах из-за несовершенства используемой технологии (поверхностный способ выращивания культур 3. subtilis ЪяВ. licheniformis 31). В России биоспорин не производился.
Учитывая перспективность биоспорина и острую необходимость его інедрения в практику здравоохранения РФ, сотрудниками Центра военно-ехнических проблем НИИ микробиологии МО РФ (ЦВТП) были выполнены юисковые исследования по разработке принципиально новой отечественной ехнологии его выпуска.
В отличие от технологии разработчиков препарата, в которой преду-:мотрено выращивание бацилл на плотных питательных средах, сотрудниками JBTI1 освоен прогрессивный и высокопроизводительный глубинный способ ультивирования микроорганизмов B.subtilis 3 и В. licheniformis 31 — компонен-ов препарата биоспорин. Увеличение выхода биомассы, а также особенности дубинных культур, по сравнению с выращенными на плотных питательных редах, создали предпосылки для внедрения и аппаратурного оформления стада концентрирования, а также усовершенствования процессов приготовления табилизированной микробной суспензии и ее высушивания. Таким образом, еоретическое и экспериментальное обоснование технологии концентрирова-іия, приготовления стабилизированной микробной суспензии и высушивания лубинных культур В. subtilis ЗиЛ. licheniformis 31 для получения лечебно-рофилактического препарата биоспорин представлялось актуальным.
-
Цель работы. Целью настоящей работы явилось создание технологии производства препарата биоспорина, отвечающего требованиям ФС, с использованием процессов концентрирования и сублимационного высушивания глубинных культур В. subtilis 3 и В .licheniformis 3\.
-
Задачи исследования:
изучить лечебно-профилактическую эффективность биоспорина при кишечных инфекциях и дисбактериозах у людей и сельскохозяйственных животных;
обосновать и выбрать технологическое оборудование и режимы его работы для концентрирования нативных культур и высушивания препарата биоспорина;
определить композиционный состав защитной среды и стабилизированной микробной суспензии, порядок их приготовления и хранения.
1.4. Научная новизна. Впервые проведена комплексная оценка возмож
ности использования сепарирования нативных культур В. subtilis 3 н В.
licheniformis 31 с последующим внедрением в технологию производства пре
парата биоспорина.
Новыми являются данные о включении в композиционный состав препарата биоспорина сухого обезжиренного молока, а также режимов замораживания и высушивания стабилизированных микробных суспензий на основе глубинных культур В. subtilis 3 и В. licheniformis 31.
Показано, что биоспорин, приготовленный по разработанной технологии, обладает высокой лечебно-профилактической эффективностью при острых кишечных инфекциях и дисбактериозах у людей и при диарее у сельскохозяйственных животных.
1.5. Практическая значимость работы.
Разработана технология приготовления препарата биоспорин в ампулах и флаконах из глубинных культур В. subtilis 3 и В. licheniformis 31, включающая в себя стадии концентрирования, приготовления стабилизированной микробной суспензии и сублимационного высушивания. Технология реализована на участке получения биоспорина на базе ЦВТП.
По результатам исследований разработаны:
-технологические инструкции получения концентрированной микробной суспензии, жидкой рецептурной массы и готовой лекарственной формы при получении препарата биоспорина;
-регламент производства биоспорина №580-96;
-фармакопейная статья ФС 42-3476-98;
-ТУ на биоспорин ветеринарный.
1.6. Основные положения, выносимые на защиту.
На защиту выносится научное положение о том, что разработанная технология получения биоспорина, предусматривающая стадии концентрирования и высушивания глубинных культур В. subtilis 3 и Я licheniformis 31, по-іволяєт получить препарат, обладающий высокой лечебно-профилактической эффективностью при острых кишечных инфекциях и дисбактериозах у людей я при диарее у сельскохозяйственных животных.
1.7. Апробация и реализация результатов работы. Материалы работы
положены на межучрежденческой научно-практической конференции "Пер
спективы использования пробиотика "Биоспорин" в практике здравоохранения
и военно-медицинской службы" (Екатеринбург, 1997); на юбилейной конфе-
эенции посвященной 70-летию НИИ микробиологии МО РФ "Диагностика и
течение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология.
Ветеринария" (Киров, 1998); на расширенном заседании лаборатории бактери
альных инфекций ВНИВИ (г. Казань, 2000)
По результатам проведенных исследований создана аппаратурно-гехнологическая линия производства биоспорина, аттестована в контрольном институте, получен сертификат соответствия и лицензия на право производст-?а, хранения и реализации препарата биоспорина.
1.8. Публикации результатов исследований. По теме диссертации опуб-
іиковано 6 печатных работ.
1.9. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 151
лранице машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, соб
ственные исследования с обсуждением результатов исследований, выводами и
фактическими рекомендациями. Работа иллюстрирована 32 таблицами и 17
эисунками. Литературный указатель содержит 131 источник, включая работы
отечественных и зарубежных авторов.