Введение к работе
Актуальность проблемы, В последние десятилетия наблвда- ется постоянный рост заболеваемости раком толстой кишки в большинстве экономически развитых стран. Несмотря на внедрение в практику новых методов диагностики и разработку комбинированных способов лечения, сохраняе-тся низкий уровень выживаемости больных. Основной причиной этого являются рецидивы и метастази заболевания. Очевидно, что дальнейший прогресс в области клинической онкологии, и онкопроктологии в том числе, невозможен без глубоких фундаментальных исследований' процессов опухолевого роста, на основе которых могут быть разработаны новые подходы в ранней диагностике опухолей, а также более эффективные,-менее токсичные и дающие стойкие результаты методы лечения.
Для решения этих вопросов необходимо иметь соответствующие экспериментальные модели, которые бы воспроизводили.опухолевый рост на организменном уровне. Существующие в настоящее время модели рака толстой кишки на животных основаны на применении различных экзогенных химических канцерогенов или трансплантации опухолевых клеток. Однако даже системы, которые насколько возможно имитируют условия толстой кишки человека,имеют несколько серьезных.недостатков: морфологические различия, экспериментально индуцированной опухоли и рака толстой кишки человека, м'ульїицентричность возникновения опухолей, другой характер метасзазирозания и так далее.
Принимая во внимание вышесказанное, а также учитывая многочисленные сообщения о трансформирующей активности человеческих опухолевых ДНК в экспериментах in vitro , мы сочли целесообразным рассмотреть возможность моделирования in vivo рака толстой кишки человека путем введения человеческой ДНК -из опухоли толстой кишки экспериментальным животным.
Экспериментальная модель рака толстой кишки человека,полученная с использованием опухолевой человеческой ДНК, дает возможность исследовать влияние лечебных препаратов на течение; процессов трансформации, в результате чего дать определенные рекомендация по выработке оптимальной лечебной тактики больных опухолями толстой кишки, направленной на предупреждение' рецидивирования и ыетастазирования процесса.
- 2 -'
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследова
ния явилось изучение in vivo трансформирующей активности ДНК
из опухоли толстой кишки человека и на основании исследовании
изучение возможности создания экспериментальной модели рака
толстой кишки человека.
При выполнении работы были поставлены следующие задачи:
получить высокоочищенный препарат ДНК из опухоли толс--той кишки человека;
изучить физико-химические свойства опухолевой ДНК;
изучить трансформирующую способность человеческой опухолевой ДНК при введении ее экспериментальным животным; провести сравнительное морфологическое изучение препаратов толстой кишки, печени, других внутренних органов животных опытной и контрольной групп;
провести эксперимент по молекулярной гибридизации образцов ДНК для выявления возможности интеграции фрагментов чело-'' веческой опухолевой ДНК в чужеродный геном;
изучить влияние биостимуляторов - низкомолекулярных РНК биологического происхождения - на течение неопластических изменений у экспериментальных животных.
Научная новизна исследования. Проведенные нами исследования показали, что ДНК из опухоли толстой кишки человека проявляет трансформирующую активность in vivo f При внутрибрюшин-ном введении беспородным лабораторным крысам. Трансформирующее действие человеческой опухолевой ДШС выражается в индукции неопластических изменений в лизистой оболочке толстой кишки экспериментальных животных.
Введение биостимуляторов природного происхождения - дву-спиральной РНК - животным с индуцированными неопластическими изменениями в слизистой оболочке толстой кишки оказывает положительное влияние и приводит к регрессии процессов трансформации.
Практическая значимость работы. Показана возможность моделирования іл vivo рака толстой кишки человека принципиально новым путем - введением опухолевой человеческой ДНК внутри-бршинно беспородным лабораторным крысам.
Методом молекулярной гибридизации образцов ДНІС показано,
что имеет место интеграция фрагментов человеческой опухолевой ДНК в геном трансформированных клеток крысы.
Изучение влияния биологических стимуляторов - низкомолеку
лярных РНК - на течение неопластических процессов в эксперимен
те позволяет рекомендовать двуспиральную РНК биологического про
исхождения для применения в онкопроктологической практике с
целью профилактики метастазов и повышения неспецифической резис
тентности организма. - '
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсужде
ны на заседании ученого совета НИИ проктологии
на научной конференции Ереванского зооветеринарного института
11987), на научной конференции Ереванского зооветинститута к 60-
.летию (1988), на 7 конференции, посвященной 25-^летию основания
ЕрШУБа (1989), на конференции молодых ученых НИИ. проктологии'
(1989). '
Публикации. Цо теме диссертации опубликовано 8 научных работ, 2 рацпредложения.
Объем и структура работы. Диссертация изложения на 107 страницах машинописного текста я состоит из введения, 3 глав, заключения и выводов. Библиографический указатель включает труды 99 отечественных и 137 иностранных авторов. Текст диссертации иллюстрирован 3 таблицами и 14 рисунками.