Введение к работе
Актуальность проблемы. Активация системы свертывания крови у больных злокачественными новообразованиями известна уже с 1865 года, когда Trousseau впервые описал развитие мигрирующего тромбофлебита у больных раком желудка, матки, яичка, сделав вывод, что "спонтанная коагуляция" является нередким явлением для онкологических больных (Trousseau А., 1865). Эта работа положила начало накоплению клинических и патологоанатомических данных, указывающих на наличие системной активации каскада коагуляции у больных злокачественными опухолями. В настоящее время известно, что тромбозы и тромбоэмболии вызваны состоянием гиперкоагуляции, которое может быть связано с аномалиями пристеночного тока крови, сосудистой стенки и самого состава крови (Patterson W.P., Risengenberg Q.S., 1990). Одним из механизмов развития состояния гиперкоагуляции, которое может привести к возникновению синдрома диссеминирован-ного внутрисосудистого свертывания (ДВС) у онкологических больных, является активация гемостатических свойств эндотелия - основного источника фактора Виллебранда (фВ), гликопротеина, играющего важную роль в плазменно-коагуляционном и сосудисто-тромбоцитарном процессах. Способность фВ образовывать многочисленные связи с клеточными рецепторами, нерастворимыми компонентами субэндотелия и циркулирующим фактором VIII свертывания крови позволяет отнести его к адгезивным белкам, изменение уровня которого может стать определяющим фактором в развитии патологических состояний, проявляющихся как кровотечениями, так и тромбозами.
В самые последние годы пристальное внимание исследователей сосредоточено на взаимосвязи системы свертывания крови с иммунной системой. Такие продукты иммунокомпетентных клеток как фактор некроза опухолей альфа, трансформирующий фактор роста бета, некоторые интерлейкины, факторы ан-гиогенеза и многие другие цитокины активно влияют на гемокоагуляцию. Особенно активны в этом отношении монокины - продукты, вырабатываемые макрофагами (Войтенков Б.О., Окулов В.Б., 1995).
Общепринятая оценка свертывающей системы крови в повседневной клинической практике, как правило, не выявляет каких-либо существенных изменений, которые позволяли бы заподозрить повышенную вероятность тромбообразо-
вания (Luzatto G., Schafer A.L, 1990). В то же время, наличие повышенного содержания фВ в плазме крови больных следует расценивать как неблагоприятный признак вероятности развития тромботических осложнений (Папаян Л.П., 1991), Поскольку фВ наряду с другими поверхностными гликопротеинами тромбоцитов играет важную роль во взаимодействии последних с опухолевыми клетками, можно предположить, что его повышенная концентрация будет способствовать также эмболизации сосудов опухолевыми клетками и развитию метастазов (Karpatkin S. et al., 1988, Nierodzik M. et al., 1995). В связи с вышеизложенным выявление уровня фВ у онкологических больных представляется актуальной научно-практической задачей.
Цель и задачи исследования. Цель работы - изучить содержание фВ в крови онкологических больных и в качестве маркера различных состояний эндотелия при экспериментальном моделировании клинических ситуаций.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Разработать чувствительный и-специфичный метод количественного анализа фВ в физиологических жидкостях. Наиболее соответствующим этой задаче является иммуноферментный анализ (ИФА) на основе моноклональных антител, и их получение легло в основу решения данной задачи.
-
Оценить пригодность разработанного метода количественного определения фВ для клинической практики.
-
Изучить влияние различных схем химиотерапии на уровень фВ в крови онкологических больных в связи с другими характеристиками гемокоагуляционного процесса.
-
Изучить фВ как возможный маркер повреждения или активации эндртели-апьных клеток - основного источника изучаемого субстрата при непосредственном воздействии химиопрепаратов в культуре.
-
Изучить влияние активированных иммунокомлетентных клеток на эндоте-лиальные клетки в культуре, используя фВ как маркер повреждения эндотелия.
Научная новизна работы.
-
Впервые получены отечественные моноклональные антитела (МКАТ) против фВ человека и на их основе разработана тест-система для иммунофер-ментного количественного. анализа фВ человека в различных биологических жидкостях.
-
Получены новые данные о влиянии химиопрепаратов на уровень ФВ у больных злокачественными опухолями в динамике химиотерапевтического лечения.
Практическая значимость работы. На основе полученных МКАТ создан набор реактивов для количественного иммуноферментного анализа фВ, не уступающий по чувствительности и специфичности известным коммерческим имму-нодиагностическим наборам. В клиническую практику НИИ онкологии им. проф.Н.Н.Петрова, других онкологических учреждений, НИИ гематологии и трансфузиологии, Республиканского центра по лечению больных гемофилией, Санкт-Петербургского Медицинского Университета им.И.П.Павлова внедрен новый метод определения фВ в плазме крови людей. Определение фВ в плазме крови может быть применено для анализа состояния гемокоагуляционной системы у онкологических больных, у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями и для прогноза развития тромбозмболических осложнений, а также для диагностики болезни Виллебранда. Установлена пригодность фВ как маркера для диагностики осложнений и мониторинга токсических последствий в процессе химиотерапевтического лечения.
Апробация работы. Результаты исследования обсуждались на научных лабораторных конференциях НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова, материалы диссертации были доложены на Всесоюзной конференции по биотехнологии, Тарту, 1989; Всесоюзной конференции "Физиология и патология гемостаза", Полтава, 1991; на съезде Международного общества по тромбозу и гемостазу, Нью-Йорк, 1993; на съезде Британского общества по гемостазу и тромбозу, Лондон, 1996; на I съезде онкологов стран СНГ, Москва, 1996; на заседании Международного симпозиума "Chernobyl-Wilsede VII", 1997.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ и получено 1 авторское свидетельство.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на страницах
![Формирование групп повышенного риска для выявления рака тела матки на основе многофакторного анализа экзо- и эндогенных факторов [Электронный ресурс]](/i/i/4334/195698.png "Формирование групп повышенного риска для выявления рака тела матки на основе многофакторного анализа экзо- и эндогенных факторов [Электронный ресурс] Маликова Лилия Владимировна")
