Введение к работе
-
.
-
Актуальность проблемы.
Как сказал Ганс Стаусс, “Antitumor immunity is beneficial autoimmunity.” – «Противоопухолевый иммунитет это полезный аутоиммунитет.» Действительно, работы последних лет привели к пониманию того факта, что большинство антигенов опухолевых клеток представляют собой нормальные белки организма, экспрессируемые аберрантно, т.е. не в то время и не в том месте. В процессе своего нормального развития иммунная система теряет способность к распознаванию таких антигенов, как и прочих собственных антигенов организма. Центральная роль в этом разграничении распознавания «своего» и «чужого» принадлежит внутритимусной негативной селекции, устраняющей клоны Т-клеток с высокой авидностью к «своему». Этот процесс охватывает и широчайший спектр Т-клеток, специфичных к стадио- и органоспецифическим антигенам, включая «забарьерные» антигены тестиса, что обусловлено способностью тимусного эпителия к их стохастической экспрессии.
Вместе с тем дефекты тимусной селекции могут приводить к опасным заболеваниям, которые связаны с выживанием и активацией аутоиммунных клеток на периферии. То, каким образом аутореактивные Т-клетки избегают негативной селекции в тимусе, остается неясным. Понимание закономерностей этого процесса позволит найти способы управления специфичностью развивающихся Т-клеток, – а значит, с одной стороны, научиться лечить аутоиммунные заболевания, а с другой стороны, сделать аутоиммунитет действительно полезным для лечения опухолей.
1.2 Цель и задачи исследования.
Целью данной работы является исследование природы аутореактивных Т клеток и механизмов избегания ими негативной селекции. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
-
Определить и цепи Т- клеточных рецепторов аутореактивных гибридом и проанализировать их СDR районы.
-
Определить специфичность TCR аутореактивных гибридом путем создания трансфектантов на основе линии тимомы 4G4, эскпресирующих и цепи ТCR полученных аутоиммунных гибридом в паре с корецепторами CD4 и CD8.
-
Выяснить роль корецептора CD4 в распознавании молекул МНС класса I.
-
Создать трансгенных животных, экспрессирующих TCR аутореактивной гибридомы 7.
-
Провести иммунофенотипирование и функциональный анализ Т клеток мышей, трансгенных по TCR ауторективной гибридомы 7.
1.3 Научная новизна.
Впервые в России нами были созданы трансгенные животные, экспрессирующие a-цепь аутореактивного TCR, проанализирован репертуар Т-клеток трансгенных животных, селектированных в присутствии и отсутствие делетирующего лиганда- молекул МНС класса II, были выяснены возможные принципы внутритимусной селекции аутоиммунных Т-клеток и их миграции на периферию и детально исследована роль a-цепи TCR в формировании специфичности TCR к антигенам. Нами было выяснено, что основным механизмом избегания аутореактивными Т-клетками негативной селекции является реаранжировка двух a-цепей и последующая экспрессия двух Т-клеточных рецепторов на поверхности одной Т-клетки. Показана доминирующая роль корецептора CD4 над CD8 за проведение сигнала через TCR, что проясняет многие эффекты, наблюдаемые при селекции и дифференцировки Т-клеток в тимусе. Было выяснено, что a-цепь TCR существенно влияет на его специфичность к аллельным вариантам молекул МНС. Причем наблюдаемый эффект обусловлен врожденным предпочтением вариабельных регионов TCR к взаимодействию с аллельными формами молекул MHC. Все это может иметь важное значение для выяснения способов управления специфичностью развивающихся Т-клеток и способов лечения, как аутоиммунных заболеваний, так и онкологических заболеваний.
1.4 Научно-практическая значимость исследования.
Результаты, полученные в ходе даной работы, могут быть использованы в фундаментальных исследованиях. Полученные данные способствуют пониманию особенностей селекции аутореактивных клеток и вносят новый вклад в представления о механизмах развития иммунопатологических состояний.
1.5 Апробация работы.
Диссертационная работа апробирована 25 июня 2008 года на совместной конференции лабораторий механизмов гибели опухолевых клеток, иммунологии онкогенных вирусов и механизмов регуляции иммунитета НИИ Канцерогенеза РОНЦ РАМН им. Н.Н. Блохина.
Результаты опубликованы в 6 научных статьях в рецензируемых журналах и представлены 13 сообщениями на международных конференциях.
1.6 Структура и объём работы.
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания использованных материалов и методов, собственных результатов, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Материалы диссертации изложены на 150 странице машинописного текста и включают 30 рисунков, 3 таблицы и список литературы из 177 источников.
Похожие диссертации на Изучение особенностей селекции аутореактивных Т-клеток
-
