Введение к работе
Актуальность проблемы. Среди злокачественных опухолей головы и шеи плоскоклеточный рак органов полости рта и ротоглотки является наиболее распространенным и по частоте занимает второе место после рака гортани (Chhetri D.K. et al., 2000; Diaz E.M. et al., 2003). В мире ежегодно регистрируется около 600000 больных, впервые заболевших раком органов полости рта (А.А.Уваров, 1997; Reichard К. et al., 1993; American Cancer Society, 2004). Среди вновь выявленных больных раком слизистой оболочки полости рта 50% вскоре после лечения будут иметь локальный рецидив и отдаленные метастазы (М.А. Кропотов, 2004; Khuri F.R. et al., 2000; Forastiere A. et al., 2001). По данным Г.В. Фалилеева и соавт. (1988), W.J. Goodwin (2000), О.А. Жаркова (2007) 5-летняя выживаемость больных раком слизистой оболочки полости рта колеблется от 20,0 до 43,4%, а по результатам исследования Е.Г.Матякина (1988) в первые два года от начала лечения погибают 96,8% больных от локальных рецидивов и регионарных метастазов.
Этиология рака слизистой оболочки полости рта неизвестна, патогенез изучен не до конца. Вместе с тем, показано, что эти опухоли способны экспрессировать ряд молекулярно-биологических маркеров, которые связаны с пролиферативной активностью клеток опухоли, характеризуют ее чувствительность к лекарственным препаратам, степень выраженности апоптоза и неоангиогенеза, и тесно связны с ее инвазивной способностью и метастатическим потенциалом (Н.Е. Кушлинский, 2005; Е.Н. Имянитов, 2008; Schliephake H. et al., 2003; Mignogna M.D. et al., 2004; Cruz J.J. et al., 2007).
В последние годы пристальное внимание исследователи уделяют системе активации плазминогена – протеолитическому каскаду, участвующему в разрушении окружающей опухоль базальной мембраны и внеклеточного матрикса, что способствует выходу опухолевых клеток из их первоначального окружения и образованию опухолевых узлов в отдаленных органах и тканях (Е.С. Герштейн и соавт., 2007; Ulisse S. et al., 2009). Ключевыми компонентом этой системы является сериновая протеаза – активатор плазминогена урокиназного типа (uPA), которая расщепляет плазминоген до плазмина. Плазмин уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые про-металлопротеиназы, что играет решающую роль в процессах инвазии и метастазирования (Н.Е. Кушлинский и соавт., 2008; Mignatti P. et al., 1986; Baker E.A. et al., 2007). Кроме того, известно, что активность uPA регулируется несколькими способами, в частности, подавляется двумя белковыми ингибиторами класса серпинов – PAI-1 и PAI-2 (Andreasen P.A. et al., 1990; Binder B.R. et al., 2007). Помимо uPA в активации плазминогена может участвовать также активатор тканевого типа (tPA), однако, его роль при развитии опухолей, по-видимому, противоположна роли uPA и сводится к разрушению опухолевых клеток и защите окружающих тканей от распространения опухоли (Е.С. Герштейн и соавт., 2010; Bell W.R., 1996). В последние годы пристальный интерес онкологи проявляют к системе активации плазминогена у больных плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта (Baker E.A. et al., 2007; Speleman L. et al., 2007; Bacchiocchi R. et al., 2008), однако роль основных компонентов системы активации плазминогена в опухоли этих пациентов изучена пока еще недостаточно.
Цель исследования – улучшение оценки прогноза и выбора адекватных методов терапии больных раком слизистой оболочки полости рта на основании сравнительного изучения содержания основных компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в биоптатах рака и непораженной слизистой оболочки, анализ взаимосвязи выше указанных маркеров с основными клинико-морфологическими особенностями заболевания.
Задачи исследования:
-
Иммуноферментным методом определить концентрации активаторов плазминогена урокиназного (uPA) и тканевого (tPA) типов и ингибитора активатора плазминогена 1 типа (PAI-1) в цитозолях опухолей больных плоскоклеточным раком слизистой оболочки полости рта.
-
Сопоставить уровни uPA, tPA и PAI-1 в злокачественных опухолях слизистой оболочке полости рта и гомологичных гистологически неизмененных тканях.
-
Оценить взаимосвязь содержания uPA, tPA и PAI-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта с основными клинико-морфологическими особенностями заболевания (стадией, локализацией, полом и возрастом пациентов, степенью дифференцировки и характером роста опухоли).
-
Оценить взаимосвязь содержания uPA, tPA и PAI-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта со степенью выраженности лечебного патоморфоза.
-
Выявить прогностическую значимость компонентов системы активации плазминогена у больных раком слизистой оболочки полости рта.
Научная новизна
Впервые в отечественной практике проведено одновременное иммуноферментное определение содержания нескольких компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в опухоли и гистологически неизмененной ткани слизистой полости рта. Обнаружено, что в опухолях слизистой оболочки полости рта содержание uPA и PAI-1 было выше, а tPA – ниже, чем в непораженной слизистой. При этом показатели uPA, tPA и PAI-1 в опухоли не связаны с возрастом больных и длительностью анамнеза заболевания. Показано, что анатомическая локализация рака слизистой оболочки полости рта, форма его роста и степень дифференцировки не связаны содержанием ключевых компонентов системы активации плазминогена в опухоли. Однако коэффициент соотношения uPA/tPA в опухолях, локализованных в области корня языка, был выше, чем в опухолях слизистой оболочки щеки. Выявлено, что уровни uPA в опухоли достоверно выше при IV стадии, чем при I, при критерии Т4, чем при Т1, при N2, по сравнению с N0. В то время как показатели PAI-1 и tPA в опухоли не связаны со стадией рака слизистой оболочки полости рта и критериями T и N.
Обнаружено увеличение частоты раннего прогрессирования (в течении первого года наблюдения) рака слизистой оболочки полости рта после проведенной терапии при сочетании таких неблагоприятных признаков как Т3-Т4 и повышенные уровни uPA в опухоли. Наиболее высокие показатели 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой оболочки полости рта выявлены при IV степени лечебного патоморфоза опухоли, по сравнению с I-III степенями или его отсутствием, при этом выявлена связь уровней PAI-I в опухоли со степенью выраженности ее лечебного патоморфоза. Показано снижение показателей 3-летней общей выживаемости больных раком слизистой оболочки полости рта с увеличением содержания uPA в опухоли, а многофакторный анализ установил, что критерий Т и экспрессия PAI-I в опухоли значимо связаны с прогнозом заболевания.
Практическая значимость
Анализ результатов исследования основных компонентов системы активации плазминогена показал, что высокие уровни uPA в опухолях слизистой оболочки полости рта позволяют выделить группу пациентов с «высоким» риском развития раннего местного рецидива, регионарных и отдаленных метастазов, что настоятельно требует более пристального внимания за этими больными после проведенной терапии, а также дополнительного использования более агрессивных методов лечения этой категории пациентов. Уровень экспрессии PAI-1 в опухолях слизистой оболочки полости рта связан со степенью выраженности ее лечебного патоморфоза и определяет прогноз 3-летней общей выживаемости пациентов. Многофакторный анализ установил, что критерий Т и экспрессия PAI-1 в опухоли достоверно связаны с прогнозом рака слизистой оболочки полости рта и при неблагоприятных уровнях этих маркеров, пациенты нуждаются в более агрессивном адъювантном лечении.
Апробация работы
Основные результаты диссертации доложены на XI Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 19-23 апреля 2004 г.); Конгрессе «Национальные дни лабораторной медицины России - 2004» (Москва, 20-22 октября 2004 г.); Российской научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии», посвященной 25-летию НИИ онкологии Томского научного центра сибирского отделения РАМН (Томск, 24-25 июня 2004г.); XII Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 18-22 апреля 2005г.); I Всероссийской научно-практической конференции патологоанатомов «Актуальные вопросы патологической анатомии» (Орел, 31 мая - 2 июня 2005г.); Х Российском онкологическом конгрессе (Москва, 21-23 ноября 2006 г.); XIII Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 3-7 апреля 2006г.); XIV Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 8-12 апреля 2007г.); Конгрессе «Национальные дни лабораторной медицины России-2007» (Москва, 10-12 октября 2007г.).
Материалы диссертации апробированы на совместной научной конференции кафедры онкологии факультета последипломного образования Московского государственного медико-стоматологического университета (МГМСУ) и лаборатории клинической биохимии, хирургического отделения опухолей верхних дыхательно-пищеварительных путей и хирургического отделения опухолей черепно-челюстно лицевой области НИИ КО РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, кафедры онкологии и кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики факультета последипломного образования МГМСУ.
Публикации результатов исследования
По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, 3 из них в журналах, рекомендованных ВАК.
Структура и объем работы
