Введение к работе
Актуальность темы. Вопросы сохранения, ускоренного воспро-. изводства и рационального использования особей, представляючих высокую генетическую ценность, были ж остаются злободневными, и актуальний. Ускоренное воспроизводство особо ценных особей я их интенсивное использование в селекционно-генетической программе способствует повышению эффективности селекционного процесса,т.е.. достизенпга высокого уровня продуктивности той или иной популяции, где проводится данная работа.
Как показали работы как зарубежных,так к отечественных ученых {J.HAmond ,1949; Є. L. WiLL&f Д953; Ф.Н.Мухамедгалиев и др.,1981; Л.К.Эрнст, 1932 и др.) одним из самых перспективных биотехнологических приемов ускоренного воспроизводства животных, особенно ыалоплодных видов, является применение метода трансплан- тации эмбрионов, который дредде всего преследует задачу максимального размножения ценных в племенном отношении маток, получение от них как мояно большего количества потомства. Это особенно зажно в отношении малоплодных животных, как овцы.
Использование метода трансплантации зигот э сочетании с индукцией суперовуляции маток-доноров путем обработки их з биологически оптимальные сроки полового цикла гонадотропними гормонами способствует значительному увеличению количества получаемого от них потомства за один половой цикл, что ускорит темпы размножения желательных генотипов.
До настоящего времени остается нерешенным вопрос относительно влияния организма матерей-реципиентов на биологические и продуктивные показатели трансплантатов,существуют прямо противоположные мнения. Одни авторы (Лопырин,1952; Курбатов,1952; Кзасіпщ-кийД951) считают, что. организм матерей-реципиентов.оказывает су-
ществзнное влияние не только на фенотип выращиваемых ими жавот-ных-тракснлантатов, но к вызывает изменение их качественных признаков (масть, телосложение я т.д.), то есть их наследственных основ, тогда как другими авторами (.М.ЇДухамедгалііев.и др., 1981;
Л.К.Эрнст, 1982 и др.) эта точка зрения отрицается.
Исходя из вяшеизлоненного, основной целью работы явилось выяснение роли материнского организма в формировании продуктивно-биологических особенностей овец-трансплантатов с решением следу-
щих задач:
определить реакцию яичников кроссбредных овцематок на введение определенных доз гонадотропних гормонов;
определить характер формирования про^ктнзко-биологкческих показателей ягнят одинакового генотипа в эмбриональный период в зависимости о? качества матерей-реципиентов;
изучить характер досгэмбрионального формирования дродук-тлзно-биологических особенностей озец-трансплантатов в зависимости от качества "истинных" (своих) родителей и приемных (реципи-ентннх) матерей.
Научная.ковтана исследования заключается в том, что научно обоснованы принципы отбора реципиентов для.получения нормальных, хорошо-развитых яшютнах-трансшіантатоз новой казахской полу тонкорунной породы овец» Доказано, что для достикения этих целей , имеют значение: приспособленность реципиентов к условиям среды, их здорозье, величина и молочность.- Генотип матерей-реципиентов имеет'значение лишь как определяющий фактор вышеуказанных признаков.
Ока заключается-е,-том, что разработанные принципы отбора реидгш»
ентов позволяя? правильно определите контингент иатск-рецглиек-тов для конкретных регионов республики в зависимости от природно-климатических условий зоны, где предполагается получение и использование овец (к но только)-трансплантатов. Обеспечивает получение здорового потомстза от завозных трудкоакклкглатизируешх
ПОРОД ОЕЄЦ.
Оснозные положения диссертации, зыкосжне на защиту. На защиту выносятся:
результаты разработанной схема гормональной индукции су-пер овуляции яичников у овец доноров;
результата изучения характера и степени влияния организма матерей-реципиентов на формирование продуктивно-биологических особенностей плодов-трансплантатов;
результаты выяснения характера и степени влияния на формирование продуктивно-биологических особенностей озец-тракспдакта-тов, качества маток-реципиентов.
Апробация работы. Результати исследований долонезш и обсуждены на ежегодных научных конференциях молодых учеіпгх и асігаран-тоз Института экспериментальной биологии ш.Ф.М.^ухешдгалиева ', (1992-1994 гг.).
Объем работн. Диссертация кзлокена'на /^^страницах машино-.-, писного текста, вклэтая 10 таблиц, одну схему, содерлзіт II мпсро-фотограЬий. Список литература включает ^39 наименований.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ -
Экспериментальная часть работн проводилась з 1593-1395 гг. . в лаборатории научло-эксягрпмбнталзкого центра по биотехнологии и воспроизводству кивотнкх НАН РК.
В качестве доноров по.получению яизотных-трансшгантатов служили: маткп класса элита новой казахской полутонкорунной породы (п = 4 гол.), осемененные семенем одного элитного барака-производителя той яе породи.
Реципиентами слукили овцематки эдильбаезской, дегересской и казахской тонкорунной пород, приобретенные из племенных хозяйств по их разведению в количестве 14 голов.
Исследования проводились по схеме, указанной на рис.1.
ОТБОР
овцематок-донопоз
овцематок-->\ реципиентов
гоамональная ооран богка с цель» индукции пслпозуля-
баоака-произвсдптеля
I диагностика і охоти
диагностика охоты
осеменение
>-
ваыызакле рашшх экбоионов кз яіідеводов
оценка качества
j_
трансплантация оая-кйх эмбрионов озце-' иаткач-рещшіентам
диагностика сует
ности овпематок-
рециінентов
' : ~ I
; беременность и ' ооды у овцематок- авципиентов
''_'" ._ t.
j зврзлйвакие 'ягиет-
; -трансплантатов
7 подопытных животных учитывались основные показатели продуктивности - зшвая wacca,шерстная и молочная продуктивность, а также изучен морфологический состаз крови и содержание общего белка сыворотки крови овцематок-доноров к реципиентов в разные периоды их физиологического состояния - до су яркости и в период суяг-ности. Подсчет эритроцитов осуществляли з камере Горяева, гемоглобина - методом Сали, лейкоцитов - з счетной камере, общего белка - рефрактометрическим методом.
С целью цнцукцаг полиовуляции озцематок-докороз обрабатыва-ли гормональными препаратами. Обработка проводилась в случннй сезон по схеме: на 8-12 день полового цикла маткам инъецировали СШК в дозе 2000-2500 м.е. или пролозан в дозе 1200-1500 ІЇ.З., на 15 день полового цикла вводили зстройен з дозе 250 мкг. Озцека-ток, выявленных в стадии половой охоты, покрывали одним бараком-производителем 2-3 раза с интервалом 6-3 часов до полного окончания стадии половой охоты. До осеменения овцематкам внутривенно вводили человеческий хорпснпческий гонздотроппн (з дозе 1000 ед.).
Хирургическую операцию по вымыванию эмбрионов из репродуктивных органов овцематок-доноров и их трансплантацию проводили согласно методике, описанной М.М.ТойЕибековым (1983).
Змбрионы сразу не после обнаружения оценивали под микроскопом (стереоскопический микроскоп лБС-9) по морфологическим признакам. При этом учитывали следующие основные морфологические признаки полноценности эмбрионов: целостность и равномерность развития бластомеров, прозрачность перивителлинового пространства, целостность апо pePuciclQ , соответствие стадий развития возрасту эмбриона.
Полноценными считали те, которые имели правильную иарообраз-пую форму, гомогенную светлую цитоплазму, целостную прозрачную
оболочку, одинаковый размер бластомеров с определенным характером их расположения (плотность межклеточных контактов).
От трансплантации овцематкам-реципиентам культивированных ранних эмбрионов получено потомство' в количестве 36 голов. Эти животные были разделены на 3 опытные группы, в зависимости от породности реципиентов.
Изучение роста айвой массы животных-трансплантатов осуществлялось взвешиванием: при роздешш, в возрасте 4,5; .13 месяцев. Вычислял: абсолютную (среднесуточный прирост) и относительную скорость роста.
При изучении гистологической структуры, методом биопсии брали образцы-коки в области бочка: при родценш, в 4,5; 12-месячном возрасте. Гистологические препараты образцов коки готовили по методике Н.А.Дцощдовой (1957) в модификации И.А.Чагирова и В.И.Карповой (1958), микроскопический анализ - по методу Н.А.Диомидовой и др. (I960).
Цифровой материал, полученный в процессе опытных работ,обрабатывали методом вариационной статистики (Н.А.Пяохннский, 1970; Е.К.Меркурьева, Т.Н.Шангин-Березовский, 1983).