Введение к работе
В последние годы внимание исследователей привлекают физические методы воздействия на биосистему, в частности, использование различных видов лазерного излучения. Низкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ) в настоящее время широко применяется в медицине (Данилевский Н.Ф. и соавт., 1989; Корочкин И.М. и соавт., 1989; Кошелев В.Н., 1992; Балакирева СЮ и соавт., 1994; Солун М.Н., 1994; Gallachi G. et al., 1981; Kato H., 1985; Lunde O.C., 1985; Castorina N. P., Padva R., 1993; Coulter A. H., 1994; Oriba H.A. et al., 1994). Специалисты, имеющие большой опыт лечебного использования излучения гелий-неонового лазера, отмечают, что достигаемый клинический эффект нередко бывает лучше, чем при использовании традиционных методов лечения (Савицкий С.Ю., Попова Л.И., 1989; Бабиченко Е.И. и соавт., 1994; Lowe A.S. et al., 1994). Лазерное воздействие имеет ряд безусловных преимуществ перед методами лекарственной терапии: оно не вызывает аллергических реакций, хорошо переносится больными, как правило, не дает нежелательных побочных эффектов, легко дозируется, обладает значительной терапевтической широтой (Охширо Т., Калдерхед Р.Г. , 1991). Однако лазерное облучение стали применять в клинике, не имея четких представлений о точках приложения и механизме действия когерентного света на живой организм, и при лечении многих заболеваний параметры излучения и дозы воздействия выбирались произвольно, без теоретического и практического обоснования. Вследствие этого результаты, получаемые в клинике, нередко противоречивы.
Излучение гелий-неонового лазера с успехом используется при лечении ряда заболеваний, в патогенезе которых значительное место принадлежит изменениям в системе регуляции агрегатного состояния крови. Так, имеются данные о нормализующем действии лазерного излучения на измененные при патологических состояниях тромбоцитарно-сосудистый гемостаз, плазмо-, гемокоагуляцию и фибринолиз (Бугаев М.В., 1989; Чипченко Е.И. и соавт., 1992). Наряду с этим, имеются сведения о повышении коагулирующей активности облученной крови, росте антитромбинового потенциала, активации фибринолитической и тромбоцитарной активности (Войтенок Н.К. и соавт., 1988). Литературные данные о влиянии низкоинтенсивного лазерного излучения на систему гемокоагуляции и фибринолиза весьма противоречивы.
Ряд концепций, объясняющих биологические эффекты НИЛИ, фиксируют внимание на его способности изменять структуру и конформационную подвижность элементов биомембран (Илларионов В.Е., 1992), а также возможности изменения структуры мезоморфной жидкокристаллической матрицы (Минц Р.И., Скопинов С.А., 1989). Следовательно, лазерное излучение может воздействовать на основные компоненты, играющие важнейшую роль в формировании гемостатического потенциала.
Важным патогенетическим звеном в развитии многих заболеваний является
стресс-реакция, вызванная различными факторами окружающей среды,
и предупреждение стрессорных повреждений является важным этапом в разработке
эффективных методов их патогенетической терапии (Alonso J., Navarro Е.,
1993; Steptol А., 1993). В литературе описаны изменения состояния
различных звеньев системы регуляции агрегатного состояния крови при стрессе (Piepot H.A. et al., 1994). Одним из факторов, способным оказать модифицирующее действие на измененную гемокоагуляцию при стрессе,
является низкоинтенсивное лазерное излучение. Для уточнения влияния лазерного излучения на систему гемостаза, измененную в условиях стресса, важная информация может быть получена в экспериментальных исследованиях, где создаются относительно стандартные условия.
Целью настоящей работы явилось экспериментальное изучение влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на коагуляционный потенциал, фибринолитическую активность крови и функцию тромбоцитов на различных этапах формирования стрессорнои реакции, а также выявление возможности модификации плазмокоагуляции и функции тромбоцитов при облучении плазмы крови в условиях in vitro.
1. Изучить влияние гелий-неонового лазерного излучения на систему
гемокоагуляции и фибринолиза, а также на состояние тромбоцитарного звена
системы гемостаза в экспериментах in vitro.
2. Исследовать состояние гемокоагуляционного гомеостаза, агрегационную
и адгезивную активность тромбоцитов на этапе запуска стресс-реализующих систем.
-
Изучить модифицирующее влияние лазерного излучения на систему гемостаза на этапе запуска стрессорного ответа.
-
Изучить характер нарушения гемокоагуляции и функции тромбоцитов в условиях патологического стресса.
-
Апробировать возможность предупреждения изменений гемокоагуляции при патологическом стрессе с помощью предварительного облучения светом гелий-неонового лазера.
В работе впервые установлено, что лазерное облучение плазмы в условиях
in vitro может изменять ее коагуляционную и фибринолитическую активность,
оказывать влияние на агрегационную способность тромбоцитов и их поведение на
экстраклеточном матриксе. Впервые изучены изменения состояния системы
гемостаза на ранних этапах формирования стрессорного ответа. Показана
возможность модифицирующего влияния низкоинтенсивного лазерного излучения
на формирование ранних стрессорных изменений гемокоагуляции и нарушение
функции тромбоцитов. Доказано, что при патологическом стрессе,
сопровождающемся развитием ишемических и геморрагических изменений в сердце и мозге, возникает отчетливая гиперкоагуляция, повышается адгезивная и агрегационная активность тромбоцитов. Предварительное транскутанное облучение гелий-неоновым лазером препятствует развитию индуцированной стрессом гиперкоагуляции и модифицирует агрегационную активность тромбоцитов.
Результаты проведенного исследования дополняют имеющиеся представления
об изменениях, происходящих в системе гемостаза, на различных этапах
формирования стрессорного ответа и свидетельствуют о возможности влияния
НИЛИ на компоненты системы гемостаза. Применение транскутанного
лазерного облучения позволяет предотвратить развитие изменений
гемостаза, характерных для стресса, что является теоретическим
(экспериментальным) обоснованием возможности использования НИЛИ в клинической практике с целью профилактики стрессорных повреждений. Проведенные исследования также расширяют существующие представления о механизмах действия лазерного излучения на живую систему.
Результаты данного диссертационного исследования внедрены в учебный
процесс на кафедрах патологической физиологии, физиологии человека
Саратовского государственного медицинского университета.
Результаты исследований доложены и обсуждены на научных конференциях кафедры физиологии, Центральной научно-исследовательской лаборатории, на совместном заседании кафедр патологической физиологии, физиологии человека и фармакологии Саратовского государственного медицинского университета. Фрагменты работы доложены на 17-м Международном симпозиуме по реологии (Саратов, 1994) и представлены в виде стендовых докладов на 5-ом Конгрессе Азиатско-Тихоокеанской ассоциации лазерной медицины и хирургии ("5th Congress of the Asian-Pacific'Association for Laser Medicine and Surgery", Tel Aviv, Israel, 1994); на Международной конференции "Light and Biological Systems" (Wroclaw, Poland, 1995); на XV Международном конгрессе "Thrombosis and Haemostasis" (Jerusalem, Israel, 1995), на 6-м Всемирном конгрессе по микроциркуляции ("Sixth World Congress for Microcirculation", Munich, Germany, 1996); на 1-м Всемирном конгрессе по лазеротерапии ("1st Congress of the World Association for Laser Therapy", Jerusalem, Israel, 1996).