Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1 Химический состав и биоморфологические особенности ротовой жидкости у пациентов с биоминералопатиями (обзор литературы по теме исследования) 11
1.1 Диагностическое значение ротовой жидкости при неинвазивных исследованиях 11
1.1.1 Химический состав ротовой жидкости и его роль в патогенезе стоматологических заболеваний 12
1.1.1.1 Изменения химического состава ротовой жидкости при воспалительных заболеваниях пародонта и кариесе зубов 14
1.1.1.2 Изменения химического состава ротовой жидкости при патогенном минералообразовании 16
1.1.1.3 Методы определения минерального состава ротовой жидкости
1.1.2 Метод кристаллоскопии 17
1.1.3 Лазерная корреляционная спектроскопия (метод динамического рассеяния света) 22
1.2 Камнеобразование и его влияние на организм человека 24
1.2.1 Биоминералопатии полости рта 26
1.2.2 Мочекаменная и желчекаменная болезнь 31
1.2.3 Биоминералопатии как проявление единого процесса патогенного камнеобразования в организме 35
1.3 Анализ стоматологической заболеваемости у пациентов с биоминералопатиями
1.4 Заключение по главе 1 41
ГЛАВА 2 Материал и методы исследования 44
2.1 Материал и дизайн исследования 44
2.2 Методы исследования
2.2.1 Методы клинического исследования 49
2.2.2 Ультразвуковое исследование 53
2.2.3 Методы лабораторного исследования 53
2.2.4 Объем исследования и статистические методы исследования 63
ГЛАВА 3 Особенности стоматологического статуса и минеральный состав ротовой жидкости, плазмы крови и эритроцитов у пациентов с биоминералопатиями
3.1 Стоматологический статус пациентов с биоминералопатиями 66
3.2 Минеральный состав ротовой жидкости, плазмы крови и эритроцитов у пациентов с биоминералопатиями
3.2.1 Ротовая жидкость 73
3.2.2 Плазма крови 75
3.2.3 Эритроциты 77
3.2.4 Результаты корреляционного анализа 78
3.3 Оценка функционального состояние антиоксидонтной защиты по величине
тиолдисульфидного отношения в сыворотке крови 80
ГЛАВА 4 Результаты изучения биоморфологических характеристик ротовой жидкости, ротоглоточного смыва и сыворотки крови у стоматологических пациентов с биоминералопатиями 82
4.1 Особенности кристаллографического рисунка фаций ротовой жидкости у пациентов с биоминералопатиями 82
4.2 Результаты линейного дискриминантного анализа показателей лазерной корреляционной спектроскопии сыворотки крови и ротоглоточного смыва у пациентов с биоминералопатиями
Заключение 97
Выводы 104
Практические рекомендации 106
Список сокращений 107
Список литературы
- Изменения химического состава ротовой жидкости при воспалительных заболеваниях пародонта и кариесе зубов
- Методы клинического исследования
- Плазма крови
- Результаты линейного дискриминантного анализа показателей лазерной корреляционной спектроскопии сыворотки крови и ротоглоточного смыва у пациентов с биоминералопатиями
Введение к работе
Актуальность настоящего исследования обусловлена необходимостью комплексного подхода к своевременной диагностике биоминералопатий с использованием неинвазивных методов исследования.
Степень разработанности темы исследования
К настоящему времени в наибольшей степени изучена роль минерализованных над- и поддесневых назубных отложений в этиопатогенезе заболеваний органов и тканей полости рта (Булкина Н.В., 2012; Янушевич О.О., 2009; Duckworth RM, 2005; Denny P. et al., 2008 и др.). Получены данные по особенностям состояния тканей полости рта у пациентов на фоне мочекаменной и желчекаменной болезней (Герасимова Л.П., Астахова М.И., 2010; Астахова М. И., 2012; Нестерова М.М., 2013).
В медицинских исследованиях для выявления групп риска по развитию как общесоматической, так и стоматологической патологии все чаще используется метод кристаллографии. По данным С.А. Краевой и Н.А. Колтовой (2016), кристаллографическим исследованиям посвящены 2432 печатные работы, выполненные в 52 городах России и ближнем зарубежье.
Наибольшее число исследований посвящено изучению особенностей микрокристаллизации ротовой жидкости у пациентов со стоматологической патологией, в основном при кариесе зубов (Разумова С.Н. и соавт., 2007; Разумова, С.Н., 2007; Сунцов, В.Г., 2010; Сунцов, В.Г. и соавт., 2011; Данилова М.А. и соавт., 2012; Прудников З. П., Камакин Н. Ф., 2012; Екимов Е.В. и соавт., 2015 и др). Одна из последних диссертационных работ посвящена кристаллографическиму исследованию биологических жидкостей полости рта при воспалительных заболеваний пародонта (Поделинская В.Т., 2016).
Накоплены данные по перспективам использования различных биологических сред организма для диагностики системных биоминералопатий, однако остается не до конца выясненным прогностическое значение состава и физико-химических характеристик ротовой жидкости для оценки риска развития и прогрессирования заболеваний, сопровождающихся
камнеобразованием и патологическими минеральными отложениями в полостях и тканях.
Цель исследования: разработка неинвазивных способов ранней и дифференциальной диагностики нарушений процессов биоминерализации у стоматологических пациентов с биоминералопатиями.
Задачи исследования
-
Установить особенности стоматологического статуса у пациентов с биоминералопатиями.
-
Выявить зависимость образования зубного камня от химического состава ротовой жидкости.
3. Оценить распределение макро- и микроэлементов в различных
биологических средах и активность окисления белков у пациентов с
биоминералопатиями
4. Изучить информативность биоморфологических методов исследования
ротовой жидкости и возможность их применения для определения риска
развития и прогнозирования течения биоминералопатий у стоматологических
пациентов.
Научная новизна исследования
Впервые установлена информативность биоморфологических методов исследования ротовой жидкости для определения риска развития и прогнозирования течения биоминералопатий у стоматологических пациентов.
Уточнены закономерности образования органо-минеральных агрегатов в полости рта на фоне биоминералопатий.
Выявлены клинико-функциональные особенности течения
патологических процессов в полости рта у пациентов с нарушениями минерального обмена.
Теоретическая и практическая значимость работы
Показана возможность комплексной диагностики патогенного минералообразования в организме человека с помощью биоморфологических методов исследования ротовой жидкости.
Получены дополнительные сведения об этиологии и механизмах образования слюнных и зубных камней в условиях нарушения минерального обмена, которые могут явиться основой для разработки эффективных мер профилактики биоминералопатий.
Результаты исследования могут быть использованы для совершенствования ранней диагностики патологии полости рта и внутренних органов, связанной с камнеобразованием и нарушением минерального обмена.
Работа вносит вклад в развитие междисциплинарного подхода к комплексному лечению больных с биоминералопатиями. Результаты могут быть использованы в стоматологии, общей терапевтической практике, нефрологии, урологии, гастроэнтерологии.
Методология и методы исследования. В основу методологии диссертационного исследования положены принципы доказательной медицины, соблюдались правила научных исследований и принципы биоэтики. Для решения поставленных задач в работе применялись следующие методы исследования: клинические, лабораторные, аналитические и статистические. В работе использованы современные методики: клиновидной дегидратации ротовой жидкости, лазерной корреляционной спектроскопии сыворотки крови и ротоглоточного смыва с линейным дискриминантным анализом полученных результатов, электротермической атомно-абсорбционной спектрометрии с графитовой печью, определение тиолдисульфидного отношения в сыворотке крови.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Течение патологических процессов и закономерности образования органно-минеральных агрегатов в полости рта имеют следующие характерные
особенности: снижение гигиенического состояния полости рта, выраженное воспаление тканей пародонта, изменения химического состава ротовой жидкости (понижение уровня магния на фоне повышения цинка и железа).
-
Различные виды биоминералопатий ассоциируются с системными изменениями минерального баланса в организме. Для каждого вида биоминералопатий характерен особый профиль нарушения распределения макро и микроэлементов в биологических средах.
-
Формирование биоминералопатий влечет изменение характеристик ротовой жидкости, биоморфологические особенности которой можно использовать в качестве дифференциально-диагностических критериев раннего распознавания слюнокаменной, желчекаменной и мочекаменной болезней.
Степень достоверности и апробация результатов исследования
обеспечивается использованием сертифицированного оборудования, корректностью статистической обработки данных и апробацией выводов, полученных в ходе работы. Использованные методики адекватны цели и задачам исследования. Исследование проведено на достаточном статистическом материале (обследовано 88 человек, из них 57 пациентов с биоминералопатиями (СКБ, МКБ, ЖКБ) и 31 пациент группы сравнения (в том числе 8 обследованных без соматической патологии, но с обильными отложениями зубного камня).
Материалы диссертации доложены на III, V,VI международных конгрессах (СПб, 2009, 2014, 2015), научно- практических конференциях «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины» (СПб, 2011, 2014) и на международных стоматологических выставках (Dental expo 2015,2016,2017).
Достоверность работы подтверждается публикацией её результатов в рецензируемых научных изданиях.
По материалам диссертационного исследования опубликовано 10 печатных работ, в том числе 4 статьи в рецензируемых научных изданиях, входящих в реестр ВАК Минобразования РФ, подана заявка на изобретение.
Личное участие автора в исследовании
Автором лично осуществлен выбор и обоснование темы исследования, сформулированы цели и задачи, обоснован дизайн исследования, проведен анализ специальной литературы, набор материала и статистический анализ полученных результатов. Вклад соискателя в сбор материала – 100 %, в обработку материала – 90%, в обобщение и анализ результатов исследования – 100 %.
Структура и объем работы. Диссертация представлена рукописью на русском языке объемом 159 машинописных страниц и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложений. Список литературы содержит 275 наименований, в том числе 174 отечественных и 101 зарубежных. Работа иллюстрирована 24 таблицами и 24 рисунками.
Изменения химического состава ротовой жидкости при воспалительных заболеваниях пародонта и кариесе зубов
Воспалительные заболевания пародонта оказывают влияние на состав и свойства ротовой жидкости, за счет включения жидкости десневой борозды, содержимого пародонтальных карманов, продуктов воспалительной реакции и распада тканей [1, 210, 232].
Установлено значительное изменение рН в зависимости от тяжести состояния пародонта. По данным S. Baliga, S. Muglikar, R. Kale (2013) более щелочная рН слюны по сравнению с контрольной группой имеет место у пациентов с хроническим генерализованным (р = 0,001), в то время как у пациентов с хроническим генерализованным периодонтитом рН более кислая, по сравнению с контрольной группой (р = 0,001) [164].
Низкий уровень рН слюны рассматривают как маркер кариесогенных поражений и пародонтита у пациентов с сахарным диабетом [178].
Получены данные корреляционного анализа между показателями стоматологического статуса и содержанием таких микроэлементов, как Ca, Cu, Mg, Mn, Zn [58].
Установлена положительная корреляция между высоким содержанием кальция в слюне и пародонтитом [162, 186].
При кариесе зубов по данным М.В. Галиулиной (1988) отмечаются отклонения в электролитном составе слюны. Происходит ее подкисление, повышение концентрации активных ионов натрия и калия, величины Са/Р коэффициента, содержания кальция и снижение концентрации неорганического фосфора [32].
Установлено, что присутствие статерина (пролин- и тирозин-обогащённый фосфопептид, состоящий из 43 аминокислотных остатков) в ротовой жидкости может служить признаком заболевания полости рта, в частности кариеса [157].
Поражение зубов кариесом повышается при уменьшении количества цинка в ротовой жидкости [102].
Разработаны способы диагностики предрасположенности к кариесу зубов основанные на биохимическом исследовании ротовой жидкости: – определении содержания соединений кальция и фосфора, ее вязкости, кислотности, буферной емкости, скорости слюноотделения [92]. – комплексный анализ концентраций кальция и фосфора и активности щелочной фосфатазы в слюне, позволяет дифференцировать предрасположенность к кариесу зубов, обусловленную дефицитом минеральных веществ, кальция и фосфора, и обусловленную сниженной реминерализующей способностью слюны. Кроме того, учитывается влияние воспалительных процессов, которые могут протекать в полости рта и приводить к повышению активности щелочной фосфатазы в слюне, а при значительной выраженности воспаления и концентраций кальция и фосфора возрастает[108].
Предложен способ лабораторной диагностики заболеваний полости рта по элементному составу слюны, основанном на определении параметров слюны и отношения их концентраций, определяют содержание натрия, калия, кальция и фосфора в слюне обследуемого, рассчитывают соотношения Са/Р и Na/K и при значениях Са/Р меньше 0,3 и Na/K меньше 0,2 диагностируют кариес зубов; при значениях Са/Р меньше 0,3 и Na/K больше 0,2 диагностируют процесс камнеобразования в полости рта; при значениях Са/Р больше 0,3 делают вывод о нормальном состоянии полости рта [107].
А.П. Солоненко и соавт. (2011) на основании данных о макро- и микроэлементном составе ротовой жидкости человека выполнен термодинамический расчет для оценки возможности образования малорастворимых соединений Са, Mg, Cu, Fe, Al и Zn, а также изучения роли микроэлементов в процессах биокристаллизации. Показано, что микроэлементы слюны при нормальных физиологических концентрациях не должны существенно влиять на равновесия процессов, ведущих к образованию ортофосфатов кальция. При малых концентрациях ионов Cu, Fe, Al и Zn в ротовой жидкости образование малорастворимых соединений этих элементов в присутствии большого избытка катионов кальция термодинамически маловероятно [134].
В условиях патогенного минералообразования отмечается: сдвиг рН в щелочную сторону, создающий условия для образования гидроксилапатита [15, 32, 91], снижение ионов кальция, на фоне увеличения ионов фосфора, что является результатом нарушения ее структурных и минерализующих свойств, снижение содержания белка, что свидетельствует о нарушении структурных свойств слюны, повышение содержания цинка, железа и ряда микроэлементов (концентрация порядка 0,5 мг/л): Fe, Mn, Ni, Al, Zn и Cu [17].
A.R. Pradeep et al. (2011) проводили биохимический анализ слюны на содержание ортофосфата, пирофосфата и пирофосфатазы и пршли к выводу, что эти вещества играют очень существенную роль в формировании и уменьшении развития зубного камня [244].
A. Tawfig (2017) установил, что в ротовой жидкости и в моче у пациентов с ЗКБ и МКБ отмечается некоторое снижение ионов магния, являющихся ингибиторами отложения кальция [247].
Фактором, препятствующим минерализации зубного налета является уменьшение значения водородного показателя ротовой жидкости (в сторону нейтрального значения) и снижение концентрации неорганического фосфора [57]. 1.1.1.3 Методы определения минерального состава ротовой жидкости
«Атомно-абсорбционная (АА) спектрометрия, основанная на измерении поглощения резонансного излучения свободными атомами, находящимися в газовой фазе, за относительно короткое время утвердилась как один из наиболее эффективных современных аналитических методов, отличающийся высокой избирательностью, чувств и тельностью, экспрессностью … метод анализа достиг весьма широкого распространения в аналитической практике среди прочих спектральных методов анализа элементного состава вещества» [13].
Атомно-абсорбционный метод, определения концентрации микроэлементов в ротовой жидкости имеет существенное диагностическое значение для выявления заболеваний полости рта даже на доклинической стадии [25, 131].
Капиллярный электрофорез – масс-спектрометрия (КЭ/МС) рекомендована для фармацевтических и биотехнологических исследований [144]. Е.А. Сарф и Л.В. Бельская (2014) предлагают использовать данный метод для определения минерального состава слюны человека [129].
По данным К.М. Костенко (2009), разнообразный состав секрета слизистой оболочки, который включает альбумины и глобулины, липопротеиды, иммунные комплексы и др., исследуется целым набором методов хроматографии, электрофореза, высокоскоростной седиментации и т.д. Помимо сложности такого подхода, который требует длительного препаративного анализа больших объемов, практически не учитывается характер межмолекулярных взаимодействий отдельных ингредиентов, находящихся в нативной биологической среде [106].
Методы клинического исследования
Для оценки соматического статуса пациентов были проанализированы особенности основного заболевания. Общее клиническое обследование проводилось в стационаре и в амбулаторных условиях. Были изучены жалобы, анамнез заболевания, клиническая картина течения заболевания, оценены результаты лабораторных и инструментальных исследований. При сборе анамнеза уточнялась длительность основного заболевания (ЖКБ, МКБ, СКБ).
Стоматологическое обследование проводили в условиях стоматологического кабинета по общепринятой методике. Внутриротовое обследование включало в себя изучение состояния слизистой оболочки полости рта и выявление патологий твердых тканей зубов. На основании полученных данных устанавливали выраженность воспаления десны, а также распространенность и интенсивность кариеса по индексу КПУ (количество кариозных, пломбированных и удаленных зубов). С помощью стоматологического зеркала и пародонтального зонда проводили осмотр в пришеечной области зубов с целью определения наличия мягкого зубного налета, зубного камня и пародонтальных карманов. Результаты стоматологического обследования заносили в карту с использованием стандартных кодов для компьютерной обработки данных. 1) Определение индекса гигиены Ю.А. Федорова и В.В. Володкиной Для оценки гигиенической характеристики полости рта определяли индекс гигиены по методу Ю.А. Федорова и В.В. Володкиной. Количественная оценка была производена по пятибалльной системе: окрашена вся поверхность коронки зуба - 5 баллов; окрашено 3/4 поверхности коронки зуба - 4 балла; окрашена 1/2 поверхности коронки зуба - 3 балла; окрашена 1/4 поверхности коронки зуба - 2 балла; отсутствие окрашивания поверхности коронки зуба - 1 балл. Разделив сумму баллов на число обследованных зубов, получают показатель гигиены полости рта (ИГФВ). Критерии оценки гигиены полости рта по ИГФВ: - хорошая 1,1 - 1,5 балла; - удовлетворительная 1,6 - 2,0 балла; - неудовлетворительная 2,1 - 2,5 балла; - плохая 2,6 - 3,4 балла; - очень плохая 3,5 - 5,0 баллов. 2) Определение упрощенного индекса гигиены Гринн-Вермиллиона OHI-S [191]. Для определения индекса обследуют 6 зубов: три зуба на верхней челюсти и три зуба на нижней челюсти: вестибулярные поверхности 11 и 31 зубов, щечные поверхности 16 и 26 зубов и язычные поверхности 36 и 46 зубов. Зондом проводили от режущего края зуба по направлению к десне, чтобы оценить наличие или отсутствие налета на нем.
С помощью индекса КПУ определялась интенсивность поражения кариесом КПУ – сумма кариозных (К), пломбированных (П) и удаленных (У) зубов у одного обследованного. Сумма К+П+У отражает интенсивность кариозного процесса у конкретного человека. ВОЗ в 1980 году предложила выделять 5 степеней поражённости кариесом в зависимости от КПУ в возрастной группе от 35 до 45 лет: 0,2-1,5 – крайне низкий; 1,6-6,2 – низкий; 6,3-12,7 – средний; 12,8-16,2 – высокий;16,3 и выше – очень высокий.
Определение папиллярно-маргинально-альвеолярного индекса (РМА) Для определения состояния тканей пародонта и оценки степени тяжести гингивита воспользовались папиллярно-маргинально-альвеолярным индексом (РМА) в модификации Parma (1960), позволяющим судить о протяженности и тяжести гингивита. Производили оценку состояния десны у каждого зуба после окрашивания ее раствором Шиллера-Писарева (воспаленные участки десны за счет присутствия гликогена как правилоокрашиваются в коричневый цвет).
Оценка индекса РМА проводится следующим образом: 0 — отсутствие воспаления; 1 — воспаление только десневого сосочка (Р); 2 — воспаление маргинальной десны (М); 3 — воспаление альвеолярной десны (А). Оценивают состояние десны у каждого зуба. Индекс гингивита (РМА) вычисляют по формуле: сумма показателей в баллах х 100 Индекс гингивита (РМА) = 3 х число зубов у обследуемого где 3 - коэффициент усреднения (3) Примечание: если есть отсутствующие зубы, то делят на число зубов, имеющихся в полости рта. При отсутствии воспаления индекс РМА равен 0. Увеличение РМА свидетельствует о интенсивности гингивита: менее 30% -определяет легкую степень тяжести гингивита, при выраженной распространенности и интенсивности патологического процесса показатели составляют от 30 до 60% - средняя степень тяжести, 60% и выше - тяжелая степень гингивита.
Объектом лабораторного исследования служили образцы ротовой жидкости, ротоглоточных смывов, сыворотки крови, плазмы крови, эритроциты.
Образцы ротовой жидкости для исследования собирали утром до приема пищи в пластиковую пробирку 1,5-2 мл (3 пробирки на пациента). Ротоглоточный смыв получали ополаскиванием полости рта 10 мл физиологического раствора в течение 20 секунд с последующим 10-ти минутным центрифугированием при 3000 об/мин. Затем биологический материал доставлялся в лабораторию. Для выявления морфологической картины ротовой жидкости применяли метод клиновидной дегидратации ротовой жидкости с использованием диагностического набора «Литос-система» [149] и лазерно-корреляционную спектроскопию ротоглоточного смыва (лазерный корреляционный спектрометр ЛКС-03-"ИНТОКС), основанную на изменении спектральных характеристик лазерного излучения и рекомендованную МЗ РФ для определения субфракционного состава биологических жидкостей [105]. Забор крови для исследования осуществляли также в 3 пробирки на каждого пациента: 2 пробирки – без антикоагулянтов (для получения сыворотки крови); 1 пробирка обработана гепарином (для отделения плазмы крови и эритроцитов. Определение содержания Ca, Mg, K, Na, Zn, Cu и Fe проводили методом электротермической атомно-абсорбционной спектрометрии с графитовой печью (спектрофотометр “КВАНТ Z1” фирмы “КОРТЭК”), определение тиолдисульфидного отношения в сыворотке крови - при амперометрическом титровании тиоловых соединений рабочим раствором нитрата серебра на фоне аммиачного буферного раствора по предельному току комплексного аммиаката серебра [132]. 1) Метод клиновидной дегидратации ротовой жидкости Метод клиновидной дегидратации является способом дегидратации биологической жидкости, размещенной на плоскости. При этом образуется капля, имеющая на поперечном срезе форму клина, что создает условия для неравномерной скорости дегидратации в радиальном направлении. Происходит осмофоретическое перемещение растворенных веществ в объеме дегидратируемой капли в соответствии с их физико-химическими параметрами и формирование четких, строго индивидуализированных структур, соответствующих состоянию организма [55, 150].
Плазма крови
Увеличение длительности заболевания при МКБ и ЖКБ сопровождается статистически значимым повышением индекса РМА - 14,7±1,03 относительно 27,3±1,1%, (р0,001) и 20,7±1,07 относительно 23,9±0,7%, (р0,05), что свидетельствует о более выраженном воспалении десны. При СКБ данная закономерность не установлена, что может быть связано с малочисленностью группы пациентов с длительностью заболевания 10 и более лет.
Однако выявленное увеличение выраженности воспаления десны наряду с длительностью заболевания связано и с возрастом пациентов (таблица 10) так как установлена прямая корреляция длительности заболевания с возрастом (r=0,635).
Результаты изучения макро- и микроэлементов в ротовой жидкости у пациентов с биоминералопатиями представлены в таблице 15. Таблица 15 - Минеральный состав ротовой жидкости в группах обследованных
У всех пациентов с биоминералопатиями в ротовой жидкости установлено повышение Na относительно группы сравнения (без системных биоминералопатий) - 38,86±5,22 мМоль/л; 38,3±6,63 мМоль/л; 36,99±2,16 мМоль/л относительно 19,77±1,60 мМоль/л (при р 0,05-0,001).
При МКБ и ЖКБ происходит статистически значимое повышение уровня калия до 39,64±7,47 и 28,95±2,81мМоль/л, соответственно, относительно пациентов с СКБ (18,0±1,71 мМоль/л) и контрольной группы (18,89±1,67мМоль/л) (р 0,01-0,05). Также при МКБ отмечено снижение уровня железа до 7,21±0,76 мкМоль/л относительно пациентов с ЖКБ (11,6±0,92 мкМоль/л) и СКБ (9,88±0,57 мкМоль/л) и группы сравнения (9,24±0,48 мкМоль/л) (р 0,01 - 0,05) (таблица 15).
У пациентов с СКБ нами отмечено повышение уровня кальция до 3,64±0,30 мМоль/л как относительно других групп пациентов с системными биоминералопатиями (2,65±0,26 и 2,6±0,26 мМоль/л), так и группы сравнения (2,05±0,12 мМоль/л) при р0,01-0,05 (таблица 15), что соответствует данным других исследователей. В группе сравнения проведено изучение изменений минерального состава ротовой жидкости у пациентов с обильными отложениями зубного камня и при их отсутствии (таблица 16). Уровень макро- и микроэлементов в ротовой жидкости в зависимости от наличия обильных отложений зубного камня (M±m) В группе сравнения при наличии обильных отложений зубного каминя в ротовой жидкости отмечается статистически значимое снижение магния (0,29±0,03 относительно 0,37±0,02 мМоль/л, при р0,05), повышение цинка (15,16±0,49 относительно10,75±0,36 мкМоль/л, при р0,001) и железа (10,76±1,06 мкМоль/л, при р0,05) (таблица 16).
Корреляционный анализ связи уровня макроэлементов в ротовой жидкости с возрастом в группах пациентов с биоминералопатиями (МКБ, ЖКБ, СКБ) и в группе сравнения выявил статистически значимые корреляции только в группе сравнения: положительная корреляционная связь возраста обследованных с натрием (r=0,384) и отрицательные корреляционные связи с кальцием (r=-0,368) и магнием (r=-0,58).
Нами проведено изучение минерального состава плазмы крови у пациентов с мочекаменной, желчекаменной и слюнокаменной болезнью (таблица 17). Таблица 17 - Минеральный состав плазмы крови в группах обследованных (M ± m) Группы Na, мМоль/л K,мМоль/л Ca, мМоль/л Mg, мМоль/л Cu, мкМоль/л Zn, мкМоль/л Fe,мкМоль/л 1.МКБ(n=22) 140,02± 1,85 4,55± 0,14 2,36± 0,05 0,8± 0,03 13,2± 0,67 22,03± 1,47 15,9±Q ПЛ 2. ЖКБ (n=20) 141,7± 2,49 4,6± 0,15 2,36± 0,03 0,746± 0,02 13,8± 0,68 17,7± 0,67 16,5± 0,81 З. СКБ(n=15) 145,3± 1,54 4,4±o,n 2,30± 0,05 0,752± 0,02 12,65± 0,75 19,7± 0,49 17,4± 0,86 Контроль (n=31) 140,3± 1,7 4,02± 0,2 2,41± 0,04 0,83± 0,02 14,3± 0,5 21,7± 0,8 21,6± 0,7 PI-2 (t) P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 (2,68) P 0,05 Pl-3 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P2-3 (t) P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 P 0,05 (2,41) P 0,05 Примечание: различия относительно контрольной группы статистически значимы - при р0,05; - при р0,01; -при р0,001 При исследовании плазмы крови у пациентов с ЖКБ установлено статистически значимое снижение микроэлемента цинка относительно пациентов с МКБ и СКБ, а также относительно группы сравнения (17,7±0,67 против 22,03±1,47, 19,7±0,49 и 21,7±0,8 мкМоль/л, при р0,05-0,01) (таблица 17).
У пациентов с СКБ выявлено повышение относительно группы сравнения натрия (145,3±1,54 мМоль/л) и снижение магния (0,752±0,02 мМоль/л), цинка (19,7±0,49 мкМоль/л) и железа (17,4±0,86 мкМоль/л) (таблица 17).
У пациентов с ЖКБ выявлено повышение относительно группы сравнения в плазме крови калия (4,6±0,15 мМоль/л) и снижение магния (0,746±0,02 мМоль/л), цинка (17,7±0,67 мкМоль/л) и железа (16,5±0,81 мкМоль/л). У пациентов с МКБ также отмечалось повышение относительно группы сравнения в плазме крови калия (4,55±0,14 мМоль/л) и снижение железа (15,9±0,71 мкМоль/л) (таблица 17).
В группе сравнения проведен анализ минерального состава плазмы крови у лиц с обильными отложениями зубного камня и с их отсутствием (таблица 18). Таблица 18 - Уровень макро- и микроэлементов в плазме крови в зависимости от наличия обильных отложений зубного камня у пациентов группы сравнения (M±m)
Результаты линейного дискриминантного анализа показателей лазерной корреляционной спектроскопии сыворотки крови и ротоглоточного смыва у пациентов с биоминералопатиями
У пациентов с МКБ и ЖКБ в ротовой жидкости отмечено статистически значимое повышение уровня калия до 39,64±7,47 и 28,95±2,81мМоль/л, соответственно, относительно пациентов с СКБ (18,0±1,71 мМоль/л) и пациентов без системных биоминералопатий (группы сравнения) (18,89±1,67мМоль/л) (р0,01-0,05). Также при МКБ отмечалось снижение уровня железа до 7,21±0,76 мкМоль/л относительно других групп обследованных. У пациентов с СКБ отмечено повышение уровня кальция до 3,64±0,30 мМоль/л. Полученные результаты соответствует данным других исследователей [197].
У пациентов с ЖКБ в плазме крови установлено статистически значимое снижение микроэлемента цинка относительно других групп обследованных с биоминералопатиями и без системных биоминералопатий (группа сравнения) (17,7±0,67 относительно 22,03±1,47, 19,7±0,49 и 21,7±0,8 мкМоль/л) (р0,05-0,01). Также выявлено повышение относительно группы сравнения в плазме крови калия (4,6±0,15 мМоль/л) и снижение магния (0,746±0,02 мМоль/л), цинка (17,7±0,67 мкМоль/л) и железа (16,5±0,81 мкМоль/л).
При СКБ в плазме крови выявлено повышение относительно пациентов без системных биоминералопатий (группа сравнения) натрия (145,3±1,54 мМоль/л) и снижение магния (0,752±0,02 мМоль/л), цинка (19,7±0,49 мкМоль/л) и железа (17,4±0,86 мкМоль/л). У пациентов с МКБ также отмечалось повышение относительно пациентов без системных биоминералопатий (группа сравнения) в плазме крови калия (4,55±0,14 мМоль/л) и снижение железа (15,9±0,71 мкМоль/л)
У пациентов с ЖКБ в эритроцитах уровень микроэлемента меди оказался ниже чем у пациентов с МКБ и СКБ (7,57±0,31 относительно 9,72±0,96 и 9,48±0,44 мкМоль/л, р0,01), а при СКБ отмечался более низкий уровень калия -82,2±0,96 мМоль/л.
Наиболее значимые положительные корреляционные связи в ротовой жидкости и плазме крови установлены по Mg (r=0,35) и Cu (r=0,33).
Во всех группах пациентов с биоминералопатиями тиолдисульфидное отношение оказалось статистически значимо ниже, чем у пациентов без системных биоминералопатий и ООЗК (2,46±0,09). Наиболее высокое тиолдисульфидное отношение отмечено у пациентов при СКБ (2,01±0,13) и в группе сравнения без ООЗК (1,95±0,21), что свидетельствует о менее выраженных нарушениях антиоксидантной защиты. При ЖКБ и МКБ тиолдисульфидное отношение было наиболее низким (1,7±0,07 и 1,82±0,12, соответственно).
Установлена отрицательная корреляционная связь тиолдисульфидного отношения с возрастом в контрольной группе пациентов (Р0,01 при r = -0,53) и отсутствие связи тиолдисульфидного отношения с возрастом у пациентов при биоминералопатиях (Р 0,05, при r=-0,05), что свидетельствует о преимущественном влиянии на него основного заболевания.
Изучена информативность биоморфологических методов исследования и возможность их применения для определения риска развития и прогнозирования течения биоминералопатий у стоматологических пациентов.
Установлено, что у пациентов без системных биоминералопатий, при отсутствии ООЗК, в периферической зоне фаций ротовой жидкости маркеры патологии не выявляются. Наименьшее число маркеров патологии выявлено при обильных отложениях зубного камня у стоматологических пациентов без системных биоминералопатий (2,37±0,5), а наибольшее при ЖКБ (8,25±1,5). В группе пациентов с СКБ на исследуемой единице площади выявлено 6,57±0,7маркеров патологии, а при МКБ - 5,13±1,0 маркеров.
Изучение видов маркеров в периферической зоне фаций ротовой жидкости показало, что наибольшее число прямых трещин выявлено при МКБ - 4,13±0,7, а наименьшее при СКБ (2,71±0,12) и при обильных отложениях зубного камня у пациентов без системных биоминералопатий (2,25±0,5). Наибольшее число разветвленных трещин с одним узлом установлено при ЖКБ (2,88±0,62), а наименьшее также у пациентов с обильными отложениями зубного камня без системных биоминералопатий (0,125±0,125). Аркадные остроугольные и дисковые трещины были обнаружены в периферической зоне только у пациентов с ЖКБ и СКБ.
Изучение среднегрупповой структуры маркеров патологии в группах пациентов с биоминералопатиями выявило следующие особенности: - при МКБ по переферической зоне фаций ротовой жидкости в основном выявлялись прямые трещины (87%), в редких случаях имели место разветвленные с одним (10%) и двумя узлами (3%); - при ЖКБ и СКБ маркеры патологии отличались большим разнообразием, в случае ЖКБ это были в основном прямые (42%) и разветвленные трещины с одним (35%) и двумя (12%) узлами, редко встречались аркадные остроугольные (5%) и дисковые (6%) трещины.При СКБ также в большинстве случаев выявлялись прямые трещины (44%), одинаково часто встречались аркадные остроугольные (17%) и дисковые (14%), а также разветвленные с одним узлом (14%). Редко встречались разветвленные трещины с двумя (7%) и тремя узлами (4%). - наименьшее разнообразие маркеров патологии отмечалось у пациентов без системных биоминералопатий при обильных отложениях зубного камня – это были, прежде всего, прямые трещины (94%).
Изучение соотношения периферической и центральной зоны фации показало значительное увеличение периферической зоны у пациентов с СКБ, как относительно пациентов с другими биоминералопатиями (23,48±0,96% относительно 6,03 ± 0,53, 5,58 ± 0,49 и 9,92 ± 0,75 % у пациентов с МКБ, ЖКБ и МОЗК, соответственно) (р0,001), так и относительно пациентов без системных биоминералопатий (группа сравнения) (10,95 ± 1,63%) (р0,001). При ООЗК соотношение периферической и центральной зон соответствовало показателям, полученным у пациентов группы сравнения с отсутствием ООЗК.