Введение к работе
Актуальность темы. Одной из важных проблем современной науки являются респираторные болезни.
По данным ученых, смертность от них во всём мире имеет тенденцию ко всё большему нарастанию (Воробьев А.А. и др.,1999; Гранитов В. М., 2001; Камышенцев М.В. и др., 2002; Костыркин Ю.А. и др., 2005; Тулева Н.П., 2004 – 2010; Богомолова И. К. и др., 2010; Дмитриева Г. М. и др., 2010).
Выявлено многообразие различных вирусов и их многочисленных серотипов, что затрудняет борьбу с ними с помощью методов специфической профилактики и способствует возникновению спонтанных инфекций (Сюрин В. Н. и др.,1991 – 1998; Нестерова И. В., 2002; Тулева Н. П., 2004 – 2011).
В племенном животноводстве у телят наиболее часто встречаются инфекционные болезни, вызванные вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae. Возбудители данных семейств поражают эпителий верхних дыхательных путей, что способствует активации условно – патогенной и сапрофитной микрофлоры и проникновению её в ткань лёгких. Ассоциация респираторных вирусов и микроорганизмов приводит к снижению иммунологической реактивности организма телят и возникновению вторичного иммунодефицитного состояния. Переболевшие животные в дальнейшем не могут быть использованы для племенных целей, что затрудняет воспроизводство стада. Наиболее опасным является вирусоносительство в критические возрастные периоды жизни, когда колостральный иммунитет находится на стадии затухания, а иммунная система еще не сформирована (Сюрин В. Н.,1991 – 1998; Тулева Н. П., 2004 – 2011).
Поиск средств защиты новорожденных телят от респираторных вирусных болезней проводится учеными всего мира в нескольких направлениях:
-
Активная иммунизация живыми или инактивированными вакцинами;
-
Пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками;
-
Повышение неспецифической резистентности организма с использованием иммунотропных препаратов.
Применение живых или инактивированных вакцин не предотвращает латенции вирусов сем. Herpesviridae в организме животных (Сюрин В. Н.,1991 – 1998; Глотов А. Г., 2003; Тулева Н. П., 2004, 2009).
Пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками легко может быть преодолена вирусами с высокой вирулентностью (Ершов Ф. И., 2006).
Интерес к иммунотропным препаратам обусловлен возрастающей неэффективностью традиционных методов терапии, а также ростом устойчивости патогенов к лекарственным средствам (Манько В. М., Петров Р. В. и др., 2002; Фёдоров Ю. Н., 2005; Деева А. В. и др., 2006; Тулева Н. П. и др., 2000 – 2011).
Однако использование иммуностимуляторов, иммунокорректоров, вызывающих активацию Т и В – клеточного иммунитета, представляет серьезную проблему. При их длительном применении возможна переактивация клеток иммунной системы (Агеенко А.И.,1994).
На современном этапе науки для профилактики респираторных болезней телят необходимы препараты с направленным действием: антимикробным, противовирусным, противовоспалительным и предотвращающим запуск опухолевой трансформации клеток даже при их длительном применении. Таким требованиям отвечают патентованные иммуномодулирующие препараты Витулин и Тулимкар. В своём составе они содержат соединения нескольких подгрупп флавоноидов (флавоны, флавонолы, флавононы) и их гликозиды, полученные из цветов, вегетативной части и корней растений нескольких семейств: сложноцветные, барбарисовые и астровые. Флавоноиды этих растений, находящиеся в гликозидированном виде, подвергнуты полному гидролизу, что абсолютно исключает токсичность препаратов. При ферментации гликозидов образуются радикалы, которые обладают активным бактериостатическим действием в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, а также патогенных грибков, микоплазм и простейших.
Витулин включает биологически активные вещества, способствующие индукции эндогенного гамма – интерферона, который в свою очередь обладает противовирусным, антибактериальным, противовоспалительным, антипролиферативным и гепатотропным действием.
Тулимкар корректирует Т- и В-клеточный иммунитет, активирует NK клетки. Содержащийся в препарате 3 – окси – флавон – силибин тормозит лектинининдуцированный митогенез клеток (Тулева Н. П., 2004 - 2010).
Цель исследований. Целью данной работы является определение противовирусного действия Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo.
Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
-
Изучить противовирусное действие препарата Витулин in vitro в перевиваемой конфлюэнтной культуре клеток MDCK, исключая влияние гомеостаза организма на активность вирусов;
-
Изучить противовирусное действие препарата Витулин in vivo на чувствительной биологической модели, самках мышей линии CBA;
-
Разработать эффективные и экономичные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорожденных телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.
Научная новизна.
- впервые изучено ингибирующее действие Витулина на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для человека, животных и птиц вирусов гриппа А/Сидней/05/97(H3N2) и А/17/утка/Потсдам/86/92 (H5N2) в опытах in vitro в конфлюентных культурах клеток MDCK, без влияния гомеостаза организма на активность вирусов;
- впервые изучено в опытах in vivo на чувствительной биологической модели, самках мышей линии CBA, ингибирующее действие Витулина на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae;
- разработаны экономичные и эффективные схемы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорожденных телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae.
Практическая значимость диссертационной работы:
- разработаны эффективные и экономичные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных болезней новорождённых телят, обусловленных вирусами из семейств Herpesviridae и Ortho-myxoviridae;
- разработаны рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней телят (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо – Западного научно – методического центра Россельхозакадемии, протокол №4 от 09 декабря 2009г.);
- разработанные рекомендации по применению Витулина и Тулимкара для активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней новорождённых телят с высоким положительным эффектом применены в племенных хозяйствах Калининградской области (Российская Федерация);
- полученные данные о противовирусном действии препаратов Витулин и Тулимкар используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «СПбГАВМ».
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Витулин оказывает ингибирующее действие на репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для животных, человека и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae в опытах in vitro в конфлюэнтной культуре клеток MDCK, без влияния гомеостаза организма;
2. Витулин ингибирует репродукцию респираторных эпидемических высоковирулентных для человека, животных и птиц вирусов гриппа семейства Orthomyxoviridae в опытах in vivo в тканях лёгких мышей линии CBA.
3. Разработаны оптимальные схемы и методы активной неспецифической иммунопрофилактики респираторных вирусных болезней новорожденных телят, обусловленных возбудителями из семейств Herpesviridae и Orthomyxoviridae, в критический период жизни животных с использованием Витулина и Тулимкара.
Апробация работы. Основные материалы исследований по диссертационной работе доложены и обсуждены на ежегодных научных конференциях Санкт – Петербургской Государственной академии ветеринарной медицины (Санкт – Петербург, 2007 – 2011 гг); Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства» (СПб, 2008 г); Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2009 г); научных конференциях молодых учёных и студентов СПбГАВМ (2008 – 2009 гг); Международных конгрессах ветеринарных фармакологов (СПб, 2008 – 2009); Международном съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов (СПб, 2011 г).
Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 4 в журналах, рецензируемых ВАК; а также методические рекомендации (утверждены на научно - координационном совете по животноводству и ветеринарии Северо – Западного научно – методического центра Россельхозакадемии, 2009г).
Объем и структура диссертации. Диссертация включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список литературы, приложения. Диссертационная работа изложена на 130 страницах машинописного текста, содержит 5 таблиц, 24 рисунка. Список литературы включает 263 источника, из них 103 иностранных авторов.
Похожие диссертации на Противовирусное действие Витулина и Тулимкара в опытах in vitro и in vivo
