Введение к работе
Актуальность работы. Совершенствование средств специфической профилактики и иммунотерапии эшерихиоза все еще остается актуальной проблемой, для решения которой требуется комплексный подход в изучении биологически иммуногенных свойств возбудителя, факторов его пато-генности, разработке технологии получения из бактериальных клеток про-тективных антигенов и определение их оптимального соотношения и концентрации в готовом препарате. Актуальность вопроса подкрепляется ещё и тем, что выпускаемые биофабрикамивакцины и сыворотки в антигенном отношении не совершенны в системе противоэпизоотических мероприятий, направленных на профилактику эшерихиоза и не обеспечивают стойкого благополучия(Бондаренко В.М. и др., 1998, Головко А.Н. и др., 1998, Ануфриев А.И. и др., 2000, Пирожков М.К.,2002, ВолковаМ.В. и др., 2005).
По данным ряда авторов (Табачник А.Л., 1977, Зароза В.Г.,1991, Емельяненко ПА. ,2000) ведущую роль в этиопатогенезеколиинфекции играют токсигенные варианты Escherichiacoli, продуцирующие термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, поэтому считается, что использование инактивированных токсинов Е. coli в качестве антигенного материала для создания вакцин является наиболее перспективным направлением в ветеринарной вакцинологии.
За последние 10-15 лет разработан целый ряд отечественных, так и зарубежных вакцин на основе токсинов Е. coli, в которых в качестве антигенного компонента преимущественно используются термолабильный и термостабильный токсины. Данные препараты, по сообщениям авторов, достаточно иммуногенны и обеспечивают выраженный гуморальный ответ у иммунизированных животных (Масанская В.В. др., 2003, Козловский Ю.Е. и др., 2004, Панькова С.Ю., 2005, Караев Я. М., 2008).
Между тем, исследованиями Караева Я.М. (2008) установлено, что эшерихиозный анатоксин (ЭА), состоящий из инактивированных TL, TS, STX токсинов, хотя и стимулирует клеточное и гуморальное звенья иммунитета, но эта стимуляция непродолжительна и не сопровождается образованием высокого уровня специфических антител. В связи с чем автором делается вывод о целесообразности усиления иммуногенности ЭА. Одним из методов усиления иммуногенности различных антигенов заключается в использовании адъювантов (Покровский В.И. и др., 1994, Петров Р.В., 1998, Медуницин Н. В., 1999, Хаитов P.M., 1999).
В связи с этим изучение влияния различных адъювантов на иммуно-генные свойства ЭА, с целью создания эффективного биологического препарата, направленного на профилактику эшерихиоза животных, представляется актуальным и целесообразным.
Цель и задачи исследований. Основной целью работы было изучение влияния различных адъювантов на иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
изучить влияние эшерихиозного анатоксина в сочетании с различными адъювантами на иммунобиологическую реактивность лабораторных животных;
изучить влияние адъювантов на иммуногенные свойства анатоксина для лабораторных животных;
изучить влияние адъювантов на протективные свойства эшерихиозного анатоксина;
изучить влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина для сельскохозяйственных животных;
определить профилактическую эффективность анатоксина при эше-рихиозе поросят и телят.
Научная новизна. Впервые установлено влияние пирогенала, гидроокиси алюминия, полиакриловой кислоты и масляного адъюванта на им-мунногенные свойства эшерихиозного анатоксина. Определены особенности изменения гематологических показателей, функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и образования специфических антител в ответ на введение животным эшерихиозного анатоксина в сочетании с адъювантами. Установлено влияние адъювантов на протективную активность эшерихиозного анатоксина при экспериментальном заражении. Определено влияние адъювантов на иммуногенность эшерихиозного анатоксина при использовании супоросным свиноматкам и стельным коровам, а также продолжительность колострального иммунитета у потомства, полученного от иммунизированных матерей.
Научная новизна работы подтверждена двумя патентами РФ на изобретение №2429012 от 20.09.2011 и №2432174 от 27.10.2011.
Теоретическая и практическая значимость. Результаты проведенных исследований позволили выявить особенности иммуногенной активности эшерихиозного анатоксина, при введении в его состав различных типов адъювантов. Экспериментально установлены оптимальные схемы применения препаратов, показана их эффективность и возможность оценки на лабораторных и естественно-восприимчивых животных. Показана высокая иммуно-генная активность эшерихиозного анатоксина с адъювантами для супоросных свиноматок и стельных коров и возможность его использования для формирования колострального иммунитета у поросят и телят. По результатам проведенных экспериментов из четырех адъювантных веществ был выбран пирогенал (липополисахарид грамотрицательных бактерий), обладающий лучшими адъювантными свойствами для эшерихиозного анатоксина. Установлено, что в производственных условиях иммунизация эшерихиозным анатоксином с пирогеналом обеспечивает наиболее выраженный профилактический эффект, заключающийся в снижении заболеваемости и гибели поросят и телят в 2,8-4,3 и 2,7-5 раз соответственно.
Апробация работы. Результаты исследований были доложены на научных конференциях сотрудников и аспирантов факультета ветеринарной медицины Кубанского ГАУ (Краснодар, 2009, 2010, 2011); 3-ой и 4-й Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (Краснодар,
2009, 2010), международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию факультета ветеринарной медицины Кубанского ГАУ (Краснодар, 2009), международной научно-практической конференции «Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц» (Екатеринбург, 2010), П-й международной научно-практической конференции «Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения» (Краснодар, 2011).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 5 в рецензируемых журналах рекомендованных ВАК.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 124 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, предложений, списка использованной литературы и приложений. Работа включает 23 таблицы и 10 рисунков. Список литературы содержит 201 источник, из числа которых 53 иностранных.
