Введение к работе
Актуальность настоящей работы определяется тем, что она направлена на выяснение условий, способствующих улучшению результатов аллотрансплантации органов, с учетом совместимости по антигенам HLA-DR, пресенсибилизации к донорским антигенам, вирусологического статуса донора и реципиента. При выполнении работы были использованы новые высокоспецифические методы диагностики герпесвирусной инфекции, позволяющие выбрать адекватную тактику ведения оольных, соответствующую иммунологическому статусу реципиента.
Целью исследования явилось изучение условий, способствующих улучшению результатов аллотрансплантации, с учетом совместимо-Л'и по антигенам HLA-DR, пресенсибилизации к донорским антигенам, вирусологического статуса донора и реципиента, что позволит выбрать адекватную тактику ведения больных, соответствующую иммунологическому статусу реципиента и индивидуальным эсобенностям течения болезни.
1. Отработать для клинико-диагностических целей оптимальный
:пособ получения обогащенной суспензии В- и Т-лимфоцитов.
2. Разработать надежную и чувствительную модификацию
ггостановки кросс-матча для селекции пар донор-реципиент при
аллотрансплантации почки.
-
Сконструировать отечественную иммуноферментную систему зля определения антител IgM и IgG классов к цитомегаловирусу, а также провести сравнительный анализ информативности, специфичности и чувствительности различных методических приемов для диагностики герпесвирусной инфекции.
-
Разработать условия использования иммунокондуктометриче-:кого сенсора для диагностики герпесвирусной инфекции.
-
Оценить влияние совместимости пар донор-реципиент по HLA-DR антигенам на результаты аллотрансплантации почки.
-
Выявить значение герпесвирусной инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса, цитомегаловирусом, и HBV инфекции [три селекции пар донор-реципиент.
-
Отработать схему использования- нормального иммуноглобу-пина человека для внутривенного введения при герпесвирусной ішфекции у больных с пересаженной почкой, с учетом иммунологических изменений и клинических проявлений.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА исследования определяется следующими эсновными результатами.
Впервые разработана модификация кросс-матча, повышающая їго надежность и эффективность, позволяющая выявлять антидо-яорские антитела при отрицательном стандартном кросс-матче.
Впервые обнаружено, что у больных хронической почечной недостаточностью с инфекционными заболеваниями регистрирова-іась повышенная частота антигенов HLA-DRw6.
Впервые определено отрицательное влияние на результаты HLA-DR типирования наличия вирусемии, обусловленной цитоме-
галовирусом, а также высокого уровня антител к цитомегаловирусу, что снижает эффективность селекции пар донор-реципиент.
Впервые доказано, что активная инфекция, обусловленная цитомегаловирусом и/или вирусом простого герпеса, выявляемая у реципиентов до пересадки и у доноров, оказывает отрицательное влияние на функцию аллотрансплантата почки. Выявлена высокая летальность реципиентов с пересаженной почкой от донора, позитивного по антигенам цитомегаловируса. Эту категорию реципиентов следует отнести в группу повышенного риска.
Впервые для диагностики заболеваний, обусловленных цитомегаловирусом (CMV) и вирусом простого герпеса (HSV), разработан и внедрен экспресс-метод определения антигенов герпесвирусов с помощью иммунокондуктометрического сенсора.
Впервые в клинических условиях проведен сравнительный анализ современных методов идентификации CMV и HSV, что позволило обосновать новый комплексный подход диагностики герпесвирусной инфекции.
Впервые установлено, что наличие антител IgM класса к полимеризованному альбумину человека отмечается при снижении выживаемости аллотрансплантата почки и свидетельствует об активации вирусной инфекции. Сочетанная активация герпесвирусной инфекции и вирусного гепатита В оказывает отрицательное влияние на результат аллотрансплантации и может закончиться летально.
Совокупность представленных клинических данных и научных положений позволили сформулировать новую концепцию в трансплантологии — выживаемость аллотрансплантата как многофакторная система, где определяющее значение имеет зависимость от селекции пар донор-реципиент по HLA-DR антигенам, вирусологического статуса донора и реципиента, генетической предрасположенности к инфекционным заболеваниям и выраженности иммунологических процессов.
На материалах Московских трансплантационных центров в рамках выполнения Международной программы по изучению влияния совместимости по HLA-DR антигенам пар донор-реципиент на результат аллотрансплантации почки показана необходимость подбора донора и реципиента по антигенам HLA-DR локуса.
Модификация методов выявления антидонорских антител, разработка экспресс-метода для диагностики CMV и HSV улучшает селекцию пар донор-реципиент, способствует своевременной диагностике вирусной инфекции и целенаправленному лечению с учетом особенностей клинического течения посттрансплантационного периода.
Разработанные принципы диагностики герпесвирусной инфекции используются в НИИ трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ, в НИИ детской гематологии МЗ РФ, в Морозовской детской клинической больнице и в клинической больнице ЦМСЧ-119.
Метод получения обогащенной суспензии В-лимфоцитов из селезенки доноров при помощи отечественной синтетической ваты внедрен в клиническую практику лаборатории иммунологии клинической больницы ЦМСЧ-119 и отдела забора органов НИИ трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ.
Данные о связи HLA фенотипа и предрасположенности к заболеваниям человека, а также выживаемости аллотрансплантата почки, о современных подходах диагностики цитомегаловирусной и герпетической инфекции используются в лекционных курсах по иммуногенетике Челябинского медицинского института и Центрального института усовершенствования врачей г. Москвы.
Полученные данные по связи фенотипа HLA с выживаемостью аллотрансплантатов сердца и почки входят в Международную программу CTS (Collaborative Transplant Study).
Некоторые разделы диссертационной работы включены в монографии ("Клиническая иммуногенетика", Ю.М.Зарецкая; М.: Медицина, 1983; "Новые антигены тканевой совместимости человека", Ю.М.Зарецкая, В.Ю.Абрамов, М.:Медицина, 1986).
Изданы методические рекомендации "Получение обогащенной суспензии В- и Т-лимфоцитов крови человека", которые утверждены МЗ СССР. М., 1985.
Основные результаты работы изложены в 42 научных работах, список их прилагается. Получено авторское свидетельство № 1725124 от 8.12.1991 г. на способ выбора донора при аллотрансп-лантации почки.
Диссертационная работа апробирована на Ученом Совете НИИ трансплантолопіи и искусственных органов МЗ РФ в 1993 г., на заседании Общества трансплантологов в 1993 г., на межлабораторной
конференции НИИ трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ в 1995 г. Основные положения диссертации были представлены на заседаниях I съезда иммунологов России (Новосибирск, 1992); на Всесоюзной конференции "Актуальные проблемы химиотерапии бактериальных инфекций" (Москва, 1991), на II Всероссийском съезде сердечно-сосудистых хирургов (Санкт-Петербург, 1993), на Международном симпозиуме "10th CTS Anniversary and 100000 CTS transplant" (Гейдельберг, 1992), на Международной конференции трансплантологов "Сучасні проблеми клинічноі та експериментальноі трансплантологи" (Киів, 1995), на XI Всесоюзной научной конференции по трансплантации сердца, печени, почки, поджелудочной железы и др. органов (Львов, 1990, 2 сообщения), на симпозиуме по клинике, диагностике и лечению патологических состояний при экстремальных воздействиях (Москва, 1993), на Всесоюзном симпозиуме, посвященном 60-летию Тбилисского НИИ вакцин и сывороток (Тбилиси, 1984), на Всесоюзных научных конференциях и симпозиумах по пересадке органов и тканей (Рига, 1984; Киев, 1985; Ленинград. 1985), на 1-ом съезде иммунологов Эстонии (Тарту, 1989).
СТРУКТУРА РАБОТЫ
