Введение к работе
Актуальность те к ы. 3 настоящее врєі;я г/ромш-ЛЄКН08 птчцево (ство, как и многие тругие отрасли наооткого хозяйства налей страйк, переживает глубоки кризис. Часто вознпкаощие стрессовые ситуации, связанные с невозможностью обеспечения оптимальных условии светового, температурного, Елакностного ре-хш/.а со-їєр'жания, необхотиксгс уровня и качества кормления приботят к значительному снихенно резистентности организма птиц, обострению течения различных заболеваний, в том числе колибактериоза.
Проблемой колибактериоза птип занижались многие исследователи /Грошева Т.А. и тр.,1979, /-ртемьева С.А., ".976, 19, Байтев-лятов 1..Е. я то., 1987, ^аічта Н.А., 1ЭЭО, "оїємякє Н.В., 1991/. Однако, несмотря на большое количество.презло?.енных сретств лечения и профилактики этой инсЬекпии, проблема колибактериоза в современных условиях исключительно актуальна. Связано это со способностью элерихий приживляться в организме птиц, циркулировать по замкнутому циклу, то есть передаваться с яїоіом, с постоянным! значительными экзопостл'плениями возбутлтеля в хозяйствах вслетсгвие контаминации кормов, со способностью зиврихий длительное время сохраняться в объектах внєлней сгеты, с развитием у них полпрезистент-ности ко многим антибиотикам и химиоп^епгротвм. Колчбактериоз регистрируется не толью как сзм.оегоятельное заболевание, но таксе в билв ассоциаций с тругимп бактериальными и вирусными болезнями птии. Сн значительно сникает иммунный статус птиц и поэтому оказывает отрицательное влияние на эффективность вакцинации против вирусных и бактериальных болезней. т!меюдкеся средства спепнпгчес-кой профилактики колибактериоза не всегта об латают достаточной З'Х-феКТНВНОСТЬЮ, Ч"0 ОбЬЯСНЯЄТСЯ І.їїО"ЛЄСТсЄННССТЬ.О СЄР02КРИаНТСВ зоз-
бу тигеля и кс.тичкем у неге большого чиста *а:-.торОЕ патогенності!.
- 4 - . ..
В последние годы с целью профилактики колибактериоза животных создаются вакцины нового поколения, включаащие в себя поверхностные антигенные комплексы. Высказывалась возможность создания коммерческих вакцин с использованием адгезивных антигенов Е. coli / NaveK W.1^ е.а.,19&4, Avi 1 а ЕА^Щ^Аллилуев А.П., 1988/. Имеются данные, свидетельствующие о том, что вакцинные препараты, включающие отдельные виды фимбрий, могут сообщать защиту против энтеротоксигенных E.coli Включение в вакцины адгезинов в значительной степени увеличивает их протективные свойства /Mc.Covmell МЛ,
Однако роль E.coli с адгезивными свойствами в патологии птиц изучена далеко не достаточно. Мало данных о спектре и процентном ее отношении эшерихий, выделяемых при проявлениях колибактериоза у ПТЕ разных видов в различных возрастных группах, о выяснении корреляций ацгезивности с вирулентностью и иммуногенностью, что имеет существенное значение в подборе штаммов при конструировании коли-вакцин. Актуальным является выяснение этих вопросов.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение адгезивных свойств эшерихий, выделенных от птиц разных видов, пта различном клинико-эпизоотическом течении колибактериоза, из различных географических регионов, выяснение корреляции их с вирулентными и иммуногенными свойствами и подбор штаммов эшерлхий с учетом их биохимических, вирулентных, антигенных и адгезивных свойств для создания инактивированной поливакцины.
В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
изучить распространение Exoli, патогенных для сельскохозяйственной птицы разного возраста и видов, в различных географических регионах, определить их культурально-морФологические, биохимические свойства, принадлежность по О-антигенам.
изучить вирулентные свойства выделенных культур E.coli.
определить типы адгезинов E.coli по тесту І-маннозочувст-вительности в реакции иммуноадгезивной гемагмютинаиии и
в реакции агглютинация с-аятлзтгезивнымп сввороткаш;
- изучить адгезивную активность выделенных культур на моделях:
эритроцитов человека;
эритроцитов петуха;
эпителиальных клеток трахеи цыплят, с определением среднего показателя адгезии(СПА) и коэффициента участия клеток-малєней в адгезивном процессе - К;
изучить иммуногенные свойства эшерихий, обладающих высокой адгезивной активностью и подобрать штаммы E.coli , с учетом их биохимических, Биоулентных, антигенных и адгезивных сеойств, для создания кнактиБироЕанной коли-вакцаны;
провести дифференциацию патогенных микроорганизмов семейства энтеробактерий, близких к Е.СОІІ, с учетом их культурально-морфологи-ческих и биохимических свойств.
Научная новизна. Собрана коллекция штаммов Е.СОІІ выделенных от разных еидоб птиц при различном клинико-эпизоотичес-ком течении колибактериоза в разных регионах, е хозяйствах различно-го технологического направления, определены типы адгезинов и степень адгезивной активности. Разработаны методы определения адгезивных свойств Е.СОІІ , выделенных от птиц, на моделях, близких к их биологическому типу: эритроцитах петуха и эпителиальных клетках трахеи цыплят. Выяснена корреляция адгезивных сеойств эаерихий с вирулентными свойствами, "зучены иммуногенные свойства эзерихий, обладающих выраженными адгезивными СЕОйствами. Подобраны штампы эяерихий для создания инактиБ:тоЕанной вакцины на основе растворимых антигенных комплексов. ПпоЕедена дифференциация Е.соїі в 'Микробиологической системе ''^ВАЯТ^НГ' от трутах энтеробактерий, прояелялЛдіх сходные с ними ку-яьтуралмю-моР'ї'ологичєекие & биохимические свойства по минимальному набору дифференциально-диагностических сред. идентифицированные б системе "'ЗАЕПТМ-ТГ культуры Klebsiella oxiioca бы.ли Еирулентными.
Практическая ценность работы. На основании проведенных исследований разработана к предлагается методика изучения адгезивных свойств E.coli, выделенных от птиц, на моделях эритроцитов петуха и эпителиальных клеток трахеи пыплят. Определена зависимость между вирулентностыо и степенью адгезивной активности эаерихий, подобраны штаммы для вакцины против колибактериоза с учетом их биохимических, антигенных, вирулентных и адгезивных свойств, Получены лабораторные обт»азиы вакцины, обладающей шигюким спектром специфической защиты.-,. Установлено, что сходными по биохимическим свойствам с З.соїі могут быть бактерии вида Klebsiella oxitoca которые обладали высокой вирулентностью по отношению к цыплятам и могут, следовательно, являться этиологическим фактором, ведущим к заболеванию и гибели птиц.
Апробация работы. Основные положения диссертации долокены, обсуждены и одобрены на заседаниях Ученого совета ВНИВИ птицеводства / 1989-1.395 гг./, на Научно-ііроизводствешіой ко нференции национального отделения России Всемирной научной ассоциации по птицеводству /Санкт-Петербург, 19ЭЗ/, на Научно-производственном координационном совещании "Проблемы ветеринашой профилактики в промышленном птицеводстве"/Петрозаводск, 1ЭЭ4 г/.
Публикация. По теме диссертации опубликованы 3 работ в которых изложено ее основное содержание.
Структура и объем работы, диссертация из ло-кена на страницах машинописного текста и включает введение, о зор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использован ной литературы и приложение, ^абота илллетрипована 14 таблицами, 3 рисунками, 1 Фотографией. Список литературы включает 220 наименс ваний работ, в том числе Э8 - зарубежных исследователей.
