Введение к работе
1. Актуальность темы. Хламидиозы - группа контагиозных болезней человека, млекопитающих и птиц, вызываемых антигеннородственными и морфологически аналогичными микроорганизмами - хламидиями (Терских И.И., 1979; Хазипов Н.З. и др., 1984; Белоусов В.И/, 1997; Хамадеев Р.Х., Ра-вилов А.З., 1997; Обухов И.Л. и др., 1998; Караваев Ю.Д. и др., 1999; Garon et al., 1954, 1955; Schachter et al., 1975 и другие).
Антигены, присутствующие на поверхности хламидий, классифицируют на родо-, видо- и подвидоспецифические (Караваев Ю.Д. и др., 1998). Все виды хламидий имеют общий термостабильный родоспецифический антиген (ЛПС-липополисахарид). Видо- и типоспецифические антигены - термолабильные белки (Обухов И.Л. и др., 1998).
Для сельского хозяйства существенное значение имеет возбудитель хламидиоза животных Chlamydiaceae psittaci - облигатный внутриклеточный паразит, который обладает уникальным циклом развития. У сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот, овцы, свиньи и птицы), в зависимости от места локализации возбудителя, регистрируют пневмонию, конъюнктивит, артрит, энтерит, энцефаломиелит (Терских И.И, 1954, 1979; French, 1959; Blanco, 1968; Iohnsen F.W.A., 1984; Tshida Т. et al.,1987; Horchler H., 1987; Караваев Ю.Д-, 1976-1998; Митрафанов П.М., 1980; Гаффоров X.3., 1984; Равилов А.З., 1984; Конопаткин А.А., 1989; Хамадеев Р.Х. и др., 1991-1997 и другие).
В последние годы появились данные о возможной роли Chlamydiaceae psittaci в этиологии абортов у пушных зверей в звероводческих хозяйствах нашей страны (Равилов Р.Х, 1988-1999; Набиев Ф.Г., Литвиненко И.И., 1989; Шелим О.С, 1990). Это связано с неблагополучной эпизоотической обстановкой среди сельскохозяйственных животных, а также с ухудшением или отсутствием контроля за кормовой базой, так как установлено, что обостре-
ниє хламидиоза регистрируется при снижении качества кормления и использовании в качестве кормов отходов от продукции птицефабрик, неблагополучных по орнитозу.
У нас в стране имеются единичные сообщения об обнаружении хламидиоза у пушных зверей (Равилов Р.Х.,1999).
Выделены возбудители хламидиоза от песцов и серебристо-черных лисиц, однако иммуноферментная диагностика хламидиоза пушных зверей не разработана и в звероводческой практике не применяется. Все это определяет значимость и актуальность данной работы.
1.1. Цели и задачи исследований. Отсутствие надежной диагностики и
методов классификации внутри видов определяют цель и задачи данного ис
следования. Цель настоящих исследований - разработка иммуноферментной
тест-системы для диагностики хламидиоза пушных зверей (лиса, норка, пе
сец).
Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
выделить и провести идентификацию хламидий от пушных зверей;
отработать методы очистки и концентрирования хламидий;
получить специфические к хламидиям сыворотки;
оптимизировать процесс получения конъюгатов антител с пероксидазой хрена (норка, песец, лисица);
отработать оптимальные условия постановки ИФА;
разработать тест-систему для выявления антител к хламидиям методом ИФА;
испытать тест-систему ИФА для диагностики хламидиоза у пушных зверей в лабораторных условиях.
1.2. Научная новизна. Впервые изучены биологические свойства хла
мидий, выделенных от пушных зверей (лиса, норка и песец); сконструирован
набор ИФА для диагностики хламидиоза у пушных зверей; отработаны тех-
нологические процессы производства компонентов набора и условия постановки ИФА.
Основные положения научной новизны работы защищены получением из Российского агентства по патентам и товарным знакам (Роспатент) Федерального института промышленной собственности уведомления о положительном результате формальной экспертизы № 98110904/13 (011874) с приоритетом 02.06.98 г.
-
Практическая значимость работы. Впервые в нашей стране разработана высокочувствительная и специфичная иммуноферментная тест-система для диагностики хламидиоза пушных зверей (лиса, норка, песец). Разработаны дополнения к «Временной инструкции по изготовлению имму-ноферментной тест-системы для диагностики хламидиоза пушных зверей (лисица, норка, песец)» и дополнения к «Наставлению по проведению ИФА при диагностике хламидиоза пушных зверей», утвержденных директором ВНИТИБП.
-
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на:
Международной научно-практической конференции, посвященной ЮОлетию открытия вируса ящура (Владимир, 1997);
Всероссийской конференции к 100-летнему юбилею ВИЭВ (Москва, 1998);
Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 70-летию со дня рождения профессора В.А. Першина (Щелково, 1998).
Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 75-летию со дня рождения Н.Ф. Чуклова (Щелково, 1998);
заседаниях ученого совета ВНИТИБП (1996-2000).
1.5. Публикация результатов исследования. По теме диссертации
опубликовано 8 статей, получено положительное решение о выдаче патента
на изобретение.
1.6. Основные положения диссертации, выдвигаемые для защиты:
изолирование, выделение и идентификация возбудителей хламидиозов пушных зверей, изучение их свойств;
разработка иммуноферментной тест-системы для диагностики хламидиоза пушных зверей (лиса, норка, песец).
1.7. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на \\
стр. машинописного текста и включает введение, обзор литературы, мате
риалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение по
лученных результатов, выводы и приложения. Диссертация иллюстрирована