Введение к работе
Актуальность проблемы, своевременная диагностика и профилактика болезней обеспечивает возможность интенсивного развития промышленного птицеводства и значительно снижает экономический ушерб. в случае возникновения заболеваний.
Наибольшую потенциальную опасность для птицеводства представляют вирусные болезни, к числу которых относится инфекционный ларинготрахеит птиц (ИЛТ).
Эта болезнь часто протекает атипично, в ассоциации с другими инфекционными заболеваниями (Малушко В.В.. 1962; Коровин Р.Н., Зеленский В. П.. Грошева Г. А.. 1989; СЮРИН В. М. И ДР. , 1991). что значительно затрудняет ее своевременную диагностику.
В настояшее-^ремя диагностика инфекционного ларинготрахеита птиц в нашей стране основана на применении серологических методов - реакций нейтрализации и непрямой гемагглютинапии. эффективность которых не отвечает требованиям промышленного птицеводства из-за значительной трудоемкости или недостаточной чувствительности. Поэтому усовершенствование, разработка и внедрение высокочувствительных и специфичных методов экспресс-диагностики ИЛТ согласуется с запросами промышленного птицеводства, имеет научное и практическое значение.
По данным отечественных и зарубежных исследователей одним из наиболее эффективных методов диагностики вирусных болезней животных и птиц, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью является иммуноферментный анализ (ИФА), в частности твердофазный - ELISA СДжавадов Э. Д, и др., 1988; BlocK J., 1988; Аб-дукалыкова С. т. и др., 1989; Сергеев В. Д. и др. , 1990; Fenzes Z. , Heszaros J., 199Е; Тышенко и.п.. 1993; гулямов Н.К., 1995).
Цель.и задачи работы. Целью наших исследований явились разработка и испытание метода иммуноферментного анализа для серологической диагностики инфекционного ларинготрахеита птиц, в соответствии с целью были поставлены следующие задачи:
разработать методику получения и контроля специфических компонентов для иммуноферментного анализа;
экспериментально обосновать и отработать методику постановки ИФА для выявления антител к вирусу илт птиц;
изучить диагностическую ценность иммуноферментного анализа в сравнении с реакцией непрямой гемагглютинации;
- испытать ИФА для диагностики илт в лабораторных и произ Бедственных УСЛОВИЯХ.
Научная новизна. Для серологической диагноста ки инфекционного ларинготрахеита разработана и испытана иммуно ферментная тест-система с использованием отечественных црепара тов и реактивов. Впервые предложена технология очистки вируса и Фекционного ларинготрахеита птиц на основе гель-Фильтрапионноп метода. Отработана методика постановки ИФА для выявления вирус специфических антител, изучена динамика накопления антител к ви русу ИЛТ в сыворотках крови экспериментально зараженных и вакди нированных цыплят, впервые дана сравнительная оценка непрямоп варианта ИФА и реакции непрямой генагглютинааии при диагностикі данной инФекдии. Установлена высокая чувствительность и спепифіг ность ИФА при выявлении антител к вирусу инфекционного ларинго трахеита птиц.
Практическая ценность работы. На основа нии проведенных исследований разработана иммуноферментная тест система, обеспечивающая раннюю серологическую диагностику инфек нионного ларинготрахеита птиц.
Разработаны и одобрены Ученым советом ВНИВИП "Методически рекомендации по ретроспективной диагностике инфекционного ларин готрахеита птиц иммуноферментным методом" (протокол Нб от 26,06, 1995). Установлена высокая чувствительность и специфичность ме тода ИФА, обеспечивающего возможность проведения массовых диаг ностических исследований.
Материалы исследований используются в учебном процессе н. курсах повышения квалификации ветеринарных врачей и в диагности ческом центре ВНИВИП.
Апробация работы. Разработанная иммунофермен-ная тест-система выявления антител к вирусу ИЛТ птиц прошла ко ииссионные испытания во ВНИВИП (протокол н 10 от 10.08.93) ] апробацию на птицефабриках России (акты от 31.08.93 и 18.03.94).
Основные положения диссертации доложены, обсуждены И ОДОбР! ны на: заседаниях Методического совета отдела вирусологии и Ученого совета ВНИВИП (1989-1994 гг.); XXXII всесоюзной конференції) молодых ученых и аспирантов по птицеводству (г. Загорск.. 1989); Всесоюзной научно-производственной конференции "Комплексная сие-тема ветеринарных мероприятий в птицеводстве - резерв повьшениі
- 5 -эффективности птицеводства* (г. Ленинград. 1989); межрегиональном научно-производственном координационном совещании "Проблемы ветеринарной профилактики в промышленном птицеводстве" (г. Петрозаводск, 1994).
Публикации. Основные положения диссертации опубликованы в ю печатных работах.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на -І90 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложение. Работа иллюстрирована 14 таблицами. 14 рисунками, 3 Фотографиями. Список литературы включает 293 наименования работ, в том числе 165 зарубежных.