Введение к работе
Актуальность проблемы. Изыскание дешёвого и более стандартного сырья непищевого назначения, пригодного для использования в качестве белоксодержащих основ при изготовлении бактерийных питательных сред, остаётся одной из важных задач ветеринарной и медицинской микробиологии. В настоящее время для изготовления большинства биологических препаратов, особенно ветеринарного назначения, используют преимущественно мясные ферментативные гидролизаты, в том числе и в производстве вакцины против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.
Многочисленные попытки замены мясных гидролизатов на аналогичные продукты, полученные за счет белков растительного происхождения или отходов биологической промышленности в виде фибрина и эритроцитарной массы, предпринятые в разное время Д.В.Беленьким, Е.П.Макаровой (1934), М.П.Гороховой (1953), А.Г.Багмет (1956), А.И.Нефедьевым (1971) и другими, до настоящего времени не привели к промышленному внедрению и проблема поисков достаточно полноценной замены мяса, при изготовлении питательных сред для промышленного культивирования штаммов CI. cHAuvoEi продолжает оставаться актуальной.
Перспективным направлением поиска является определение возможности использования в качестве основ при изготовлении питательных сред ферментативного гидролизата белков молочной сыворотки, получаемой в виде отходов в промышленном сыроделии и маслоделии. Препарат разработан в лаборатории биохимических методов контроля и стандартизации ветеринарных
- 2 -препаратов ВГНКИ совместно с НПО "Углич" и получил название-"Лактопептон". По показателям общего, аминного и остаточного азота, содержанию полипептидов и набору аминокислот, а такке по величине коэффициента протеолиза он близок к перевару Хот-тингера (ферментативному гидролизату мяса). Лактопептон стандартизирован по главным биохимическим показателям ( ТУ 10.02.02.12-89), обеспечивающим ростовую потребность принятого БОЗ набора тест-штаммов. В настоящее время освоен его промышленный выпуск. Использование этого препарата позволит сократить потребление мяса при изготовлении бактерийных вакцин и снизить их себестоимость.
Цель работы - установить возможность культивирования производственных штаммов CI. chauvoei на питательных средах, приготовленных на основе лактопептона, взамен мясного ферментативного гидродизата, используемого в технологическом цикле промышленного изготовления живых и инактивированных вакцин против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.
Задачи исследований '
-
Разработать состав питательной среды па основе лактопептона, обеспечивающий ростовую потребность вирулентных и аттену-ированного производственных штаммов GI. chauvoei.
-
Разработать оптимальные условия технологического режима изготовления и установить тесты оценки пригодности среды с лактопептоноы при изготовлении вакцин против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.
-
Провести сравнительное изучение культуральных, морфологических, гемолитических, вирулентных свойств исходных и пассируемых на изучаемой ореде производственных и музейных штаммов CI.
CHAliVQEI«
4. Изучить аминокислотный и пептидный состав питательной
среды и установить динамику утилизации аминокислот и пептидов
в процессе культивирования производственных штаммов CI.chauvoej.
-
Приготовить из культур штаммов CI .chauvoej t выращенных на среде с лшяопептоном, инактивированные и живые вакцины против эмкара и изучить их в сравнении с коммерческими образцами аналогичных препаратов по срокам формирования иммунитета, степени специфической активности и стабильности их свойств в процессе хранения.
-
На основе полученных данных разработать проект дополнений к действующей "Инструкции по изготовлении и контролю вакцины против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота".
Научная новизна. Установлено, что питательная среда на" основе препарата лактопептона сухого бактериологического (ТУ 10.02.02.12-89), при разовом промышленном культивировании обеспечивает ростовую потребность и сохранение культурально-морфологических и антигенных свойств производственных штампов CI. chauvoej , а также производственных штаммов CI. septjcum и CI. perfri'ngens . Показано, что промышленное использование питательной среды с лактопептоном позволяет получать вакцинные препараты той же иммуногенной активности, что и коммерческие образцы вакцин против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.
Практическая значимость работы. Разработана, испытана и внедрена в практику биологической промышленности СССР новая питательная среда на основе лактопептона сухого бактериологического для культивирования штаммов CI. chauvoej при про-
- 4 -мышленном изготовлении вакцин против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.
Разработаны и утверядены Главным управлением ветеринарии (11.05.89 г.) дополнения к действующей технологической инструкции по изготовлению и контролю "Концентрированной гид-роокисьалхьшниевой формолвакциш против эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота и овец".
Апробация. Материалы диссертации доложены на
научной конференции молодых ученых ШЭВ (Москва, 1989 г.);
одиннадцатой научной конференции молодых ученых ВГЕКИ ветпредаратов (Москва, 1989 г.);
научно-проблемной методической комиссии по контролю и стандартизации биопрепаратов, применяемых при бактериальных и грибковых болезнях животных (Москва, 1987, 1988 гг.);
меглабораторном совещании сотрудников ВГНКИ ветпредаратов (Москва, 1990 г.) .
Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано 2 статьи.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полеченных результатов, вывода, практические предлоаения, список литературы и приложения. Работа иллюстрирована 23 таблицами, 16 рисунками. Список литературы включает 188 источников, из них 69 иностранных.