Введение к работе
Актуальность темы. В "Основных направлениях экономического и социального развития на 1986-1990 годы и на период до 2000 г." указывается на необходимость увеличения производства продуктов . животноводства с тем, чтобы обеспечить потребности населения. Рост количества потребляемого молока на душу населения можно рассматривать как один из факторов роста благосостояния народа. К 1990 году предусмотрено довести производство молока.в нашей стране до І06-ІІ0 млн. тонн. .'.-."''
Наряду с увеличением валового производства молока имеет важное значение и повышение его санитарно-гигиенического качества, для характеристики которого используют бактериальную ойсеме-ненность молока, содержание в нем некоторых патогенных микроорганизмов, соматических клеток, примеси молока от коров, больных маститом, а такжетемпературу, кислотность,; степеньчистоты, наличие посторонних веществ (И.И*Архангельский, В.М.&рташойа; 1966; ft. jdcii'tUx t W?6; Н.В.Еарабанщиков;I980jП.ВЛитён-ко, I960;'В.М.Карташбва., I960' К;. ^л'г^.^и ,1951);
Основными показателями сануїтарно-гигиенического состояния молока являются общая бактериальная-обсемененность и наличие ингибирущих веществ в нем. По этим показателям главным образом определяют качество молока при его сдаче-приемке.і Поэтому быстрое и достоверное определение общей бактериальной обсемененности и наличия ингибиторов в яабораторно-пройзводственных условиях является актуальным. Успешное решение указанной задачи нёвозмож-I Но без применения простькі быстрых и чувствительных методов контроля. Йэ всего арсегіала "существующих методов самими быстрыми, простыми» доступными и наиболее распространенными при сда-: '. чв-приемке молока являются редуктазные' пробы, в основе которых '
использована биохимическая активность микроорганизмов.
Однако применяемые' в нашей стране редуктазные методы с метиленовим голубым и резазурином не полностью отвечают современным требованиям. Метод определения общей бактериальной обсемененное с.мотнленовым голубым достаточно длителен и данный индикатор в нашей стране не выпускается. Проба с резазурином часто дает необъективные результаты из-за нестабильности выпускаемого препарата по оптической плотности, неспецифичности реакции и широкой цветовой гаммы при восстановлении индикатора.
В связи с этим большую значимость приобретает разработка быстрого и надежного по своей специфичности и чувствительности метода определения микробных редуктаз сборного молока, с применением новых окислительно-восстановительных индикаторов.
Вопросы группового'состава мікрофлори сборного молока, поступающего на молокоперерабатьшащие предприятия, биохимической активности отдельных видов шпфоорганизмов, их окислительно-восстановительного потенциала недостаточно освещены в литературе. Поэтому изучение биохимических свойств микроорганизмов сборного.молока имеет важное научное и практическое значение.
Показатель общей бактериальной рбсемененности молока тесно связан с наличием ингибирущих веществ в нем. Попавшие в молоко ингибиторы искажают достоверность редуКтазных проб, так ісак они задерживают рост и развитие микрофлоры молока (Н.И.Маш-кин и соавт., 1977; . В.М.Карташова, А.С.І^сева, Л.Д.Демидова, 1983; В.П.Шидловская, 1985; В.И.Хоменко, 1985).
Поскольку на молочных предприятиях' при приемке закупаемого молока, как правило, общая бактериальная обсемененность определяется одновременно с выявлением ингибиторов, мы также
~4 -
поставили перед собой задачу изучить возможность разработки более быстрого и чувствительного метода определения ингибирукщих веществ в молоке с применением новых окислительно-восстановительных индикаторов.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы являлась разработка ускоренных редуктазных методов определения общей бактериальной обсемененности и ингибирущих веществ в сборном молоке, изучение механизма редукции индикаторов микрсфлорої молока.
В связи с этим на разрешение были поставлены следующие задачи:
-
Провести сравнительное изучение существующих методов определения общей бактериальной обсемененности молока.
-
Разработать ускоренный редуктазный метод определения общей бактериальной обсемененности молока.
-
Изучить биохимическую активность и редуцирующие СБОЙСТ ва наиболее часто встречающихся микроорганизмов, выделенных из сырого молока.
-
Разработать новый ускоренный микробиологический метод определения ингибиторов в молоке,
' 5. Видать методические указания по определению общей бак териальной обсемененности молока и ингибиругащих веществ.
Научная новизна. Разработан ускоренный редуктазниЛ метод тетразолиевым синим для определения общей бактериальной обсемє ненности сборного молока, позволяющий за короткое время и .объективно (по двум цветам) определить класс молока. Метод признан изобретением и защищен авторским свидетельством № 1306322 от 22.12.1986 г.
' Впервые в стране изучен механизм взаимодействия меиду ра: ' личными группами микроорганизмов молока, их биохимической ак-
-5--.
тивностыэ, окислительно-восстановительным потенциалом и редук- " цией некоторых индикаторинх красителей.
Разработан новый ускоренный редуктазпый метод определения ингибирующих веществ в молоке с тетразолиевым синим, обладающий высокой чувствительностью, объективностью и простотой исполнения. Метод признан изобретением и защищен авторским свидетельством 1,5 1493949 от 15.03.1989 г.-
Практическая ценность. Использование предлагаемых ускоренных редуктазных методов определения общей бактериальной обсеме-ненности и ингибиругацих веществ в молоке позволит своевременно и с высокой точностью определять санитарно-гигиеническое качество заготовляемого молока.
Данные методы вошли в следующие нормативные документа: "Временные методические указания по определению общей бактериальной ебеємекенности" сборного молока, ускоренным методом с тетразолиевым синим", утверзденнке.Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 16.II. 1988 г.,,-"Методические рекомендации по получению высококачественного молока на фермах и промышленных комплексах", . утвервденные Главным управлением ветеринарии Госагропрома УССР 30.05.1989- г., "Методические указания по опредолешнэ ингибируицих- веществ в. молоке с' термофильным-.стрептококком и тетразолиевым синім",.утвержденные Государствен-ней комиссией Совета Министров'СССР по продовольствию и закупкам-23.10.1989 г.
Апробация работы. Матеріали диссертации были долокены на:
заседании Президиума Центрального агропромышленного научно-технического общества (Москва, 1989);
Всесоюзной конференции'молодых ученых и специалистов (Рига, 1990);
Всесоюзном координационном совещании по зоогигиене
- б -
(Львов, 1990).
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 3 печатных работы (тезисы докладов). Получено два авторских свидетельства (в соавторстве.) на способ определения бактериальной обсемененнооти молока (А.с. І? 1306322) и на способ определения шгибирущих веществ в молоке (А.с. № 1493949).
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка использованной литературы, включающей 311 источников, в том числе 176 иностранных. Работа изложена на 176 страницах машинописного текста, содержит 22 таблицы, II рисунков, 5 фотографий.