Введение к работе
Актуальность работы. Крымская-Конго геморрагическая лихорадка -острое вирусное природно-очаговое заболевание человека с высокой степенью летальности. Вирусная этиология заболевания была установлена М.П.Чумаковым при изучении в 1944-1945 гг. в Крыму вспышки новой для науки геморрагической клещевой лихорадки.
В 1967 г. штаммы вируса крымской геморрагической лихорадки чКГЛ) были выделены из крови больных КГЛ (Чумаков М.П., Бутенко A.M. и соавторы 1968 г.). В 1969 г. доктор J. обнаружил единство вируса КГЛ и вируса Конго, выделенного в 1956 г. в Заире из крови больного ребенка, на основании чего М.П.Чумаковым было предложено, а позднее и принято, общее международное название "вирус КГЛ-Конго? Дальнейшие исследования позволили отнести возбудитель КГЛ-Конго к семейству Bunyavmdae роду WariovizaS.
До настоящего времени антигенные варианты вируса КГЛ-Конго не бы ли обнаружены, хотя сегментированность генома представителей семейства ^unyo-Vlt idae не исключает высокую вариябильноеть штаммов. Возможное причиной ятого являлось отсутствие адекватных методоп изучения антигенной структуры. Новые возможности в изучении фундаментальных свойств вирусов открывают мококлональные антитела (МКА) и высоко -чувствительные и специфичные методы, такие как иммуно^егментный анализ (ИФА) и лантанидный имнунофлтюресцентный анализ (Л1№.\).
Широкое географическое распространение і зысокая опасность заболевания для человека делают более глубокое изучение свойств вируса КГЛ-Конго актуальным как в плане получения новых данных гб антигенной структуре, дифференциаци" штаммов, так и в плане усовершенствования лабораторной диагностики. Изучение антигенной структуры штаммов видится нам важным также и в плане изучения экологии вируса КГЛ-Кої. о, отбора наиболее перспективных штаммов для производства диаг-ностикумов и вакцин.
Цель и задачи исследования: Целью ні тоящей работы являлось изучение антигенной структуры штаммов вируса КГЛ-Конго и совершенствование лабораторной диагностики на основе моноклоналышх антиі-Л.
Для выполнения намеченной программы требовалось решение следую-
щих задач:
I. Выделение новых штаммов вируса КГЛ-Конго на территории Таджикистана от источников природы к от больных, изучение их биологических свойств.
2; Анализ антигенной структуры коллекционных штаммов с помощью моноклональных и поликлональных антител методами иммунофлюоресценциі иммуноферментного анализ-», лантанидного- иммунофлюоресцентного анализа и иммуноблотинга.
3. Получение новых высокочувствительных и специфичных диагност] ческих тест-систем на основе применения моноклональных антител и лаі танидного иммунофлюоресцентного анализа для выявления антигенов вир; са КГЛ-Конго.
Научная новизна работы.
-
Пополнена научная коллекция вирусов оригинальными штаммами вируса КГЛ-Конго, выделенными в Таджикистане.
-
Впервые использованы моноклональные антитела, индуцированны к штамму КГЛ-Конго УЗ І0І45, для изучения антигенной структуры озиа ских, европейских и африканских штаммов вируса. Впервые с помощью М типа Н.ЗІ.І2 к вирусу Дугбе показано наличие общего эпнтопа на белк G1 У вирусов Дугбе и КГЛ-Коі^о.
-
Выявлено не менее двух антигенных вариантов вируса КГЛ-Конг
-
Впервые показана высокая чувствительность и специфичность метода ЛИФА для выявления антигенов вируса КГЛ-Конго.
Практическая ценность. \
-
В Государственную коллекцию вирусов НИИ вирусологии им.Д.И. Ивановского РАМН депонированы семь оригинальных штаммов вируса КГЛ-Конго. Депонированные штаммы используются для получения диагностику мор в НИИ вирусологии им.Д.И.Ивановского РАМН и в Таджикском НИИ эп демиологии и гигиены МЗ Таджикистана.
-
На уровне лабораторных разработок получена новая высокочувс вительная тест-система на основе метода ЛИФА для выявления антигене вируса КГД-йонго.