Введение к работе
Актуальность теин.
Интенсивное развитие животноводства на промышленной основе поставило перед ветеринарными специалистами ряд.важных проблем по инфекционной патологии, среди которых наиболее актуальной является проблема медленных инфекций овец и коз таких, как адеиоматоа, висна-магди и скрепи. Эти инг фекции широко распространены во многих странах ыира, регистрируется ив нааеЯ стране, особенно в хозяйствах Нечерноземной зоны РСФСР, причиняя большой экономический ущерб отрасли.
Медленные инфекции били известны еяе в конце прозлого века С a.ftjstin), но более углубленное их иселедованад стало возкокнкм после сообщения в 1954 году СигурД^соном о наблюдаемых км цассоаых болезнях у овец в Исландии. В 1963--1967 годах появились сообщения сб аденоматозэ н у Has а стране (Митрофанов В.Ы., Алиев Д.И.).
Данные литературы отечественных я иностранных авторов
свидетельствуя?, что к настоящему времени достягнути зна
чительные успехи в изучении ряда аспектов этой болезни. В
то де время.многие вопроси этиологии, особенно культивиро
вания возбудителя, методов ранней диагностики аденоматоза
не разработаны. Йиепзаяся литература по этой болезни со-
сппзена, гл&внка образра, нзученио илиняяя, патоыорфолопга
и эпизоотологии болезни (Д.Н.Алиев, 1964г., В.Н.Митрс^анов,
1964г., Ь.Г.Костенко, 1964г., Н.И.Архипов,Т.Н.Братин,
І98І, 19Ь5гг., Н.И.Архипов, В.А.Шубнк н др. 1966г., A.Cuba-
-Сараго И Др. 1945г., I.Ifobel et ol., I958-79rr.t -
ir.Dungal, 1938, 1946г.,А.ЕЪег, 1899г., S.Er.chev, І958г., j.R.Greid, І9Ь0 и др.). В последнее вреня появился рзд работ по изучение этиологического фактора этой болезни: D.Verrvoerd et al. (І977-ІУ80ГГ.), J.De l^rtini et al. (1935г.), I?.Kartin (1980г.), A.Herring є* al- (1983г.), K.Lairmore (19Э6г.), A.Williamson et al. (1930), Y.Wta-dera et al. (1968г.). йх нселедоваївія подтвердила яредао-лозекие D.liitohell % который «со а 1915 году еиеказоя
.-3-
кненме о вирусной природе болезни. Однако, до сдас пор hst единого мненш! об этиологии этой инфекцаи. Одни авторы: V. Cvj е tanovi с etal. (1972г. ) , . De - Wil Hers в t al. С1979--Ш4ГГ.Л,Л».Martin et al. 11979г.), A.Ke«je3tic et al. Ц970-І98Ігг«), - склонны считать, что возбудителей аденоматоза является герпссввруе, а по последним данным: D.'/er-woerd et al. (I98(W990rr.), G.Querat et al. (I987l\), J.De T.artini et &1.СІ9ШГ.), A.Herrtog et al. 11983г.), J.Sharp et al. ЦШг.>,3. Irving et al. (І984Г.), A.Patme є лі. (І983-І986ГГ.), - рзтровкруе. Несмотря на многочисленные попытка авторов культивировать выделенный оетро-вярус,установить репродукцнп его в культуре клеток !Ш не удалось.
В нажзй стране до настоящего времени работ по изуче
нию этиологического фактора аденоматоза у овен не прово
дилось, ^агноз ставился на основании результатов
патоиорфологических исследований с учетом клинико-эпизоо-
тодогическиж данных. Разработка ранней прижизненной диаг
ностики ^ профилактики и борьбы с этой болезнь» сдержива
ется из«-за отсутствия способов культивирования возбудите
ля аденоматоза .
Настоящая научно-исследовательская работа является составнойчастью плановых НИР по темам 05.06-05.08; 7.1--6-66 и Ш.04да.программы 0.СХ62 и проводилась с І9У2 го-
Д*»-v
Цель и задачи исследования; Целью работы явилось
изучение некоторых биологических свойств возбудителя аденоматоза, изолированного из пораженных тканей легкого больных овею, разработка способа получения специфического антигена и ветода его использования в диагностике болезни.
Ддя достижения поставленной пели необходимо было редать следукшие задачи:
I. Подобрать клеточку» систему для выдолзнйя возбудителя адеяонатоза овец и получмь из организма спонтанно больных яивотных вируссодержаїеиє нзолкты.
-
Изучить некоторые биологические свойства возбуди- теля аденоматоза овец (характер ЦПД ка чувспзитвльной культуре клеток, изаенеше ыетаболнгада инфицированных клеток, идентификаций специфического антигена, воспроизведение болезни у овец и лабораторных яивоткзх).
-
Разработать способ получения специфического акта-гена аденоматоза іі метод его использования в серологической диагностике болезни.
-
Отработать оптимальные параметры серологической реакции для прижизненной диагностика аденоиатйза у овец.
Научная новизна.
Впервые з назей стране из организма спонтанна больных аденоиатоэом овец полученыс>сгвнздан?й Еультураяышо язолягы возбудителя аденоматоза овец. Разработай способ получения культурального преципатирукзего антигена п ке-тод его применения для прижизненного выявления sapycoHOca* теяєя аденоматоза.
Разработали методы очистки и Еонцеїггрлрования впруся» исследованы его морфологические и некоторые фнзико-хіглі-чеекие свойства. Показано, что но шрфологии» размерам, плавучей плотности и физико-хаыкчеснзш свойствен полученный в изолятах вирус мозно отнести к семейству Retroyiri-йае . Экспериментально воспроизведен аденоматоз у овец, ягнят и кроликов при интратрахеадьноы я внутравенноа заражении Еируесодержазей суспензией из опухолей» а также очи-ценкши культурадьгазд'изолятаїлі возбудителя аденоыатоза. Изучена.и обоснована возможность рино-цятохагичсекого метода для выявления больных аденоялтозом йшзотшх на стадии ТЕЛинического проявленая болезни.
Практическая ценность»
Выделены е помощьй культури клзток ЇЯ пзоляты возбудителя аденоматоза от естественно больных аденоматозок овец. Разработан способ получения специфических.антигенов возбудителя болезни, которне используются для изготовления. дйагностякумов.
Разработан и апробирован "Набор" для диагностики адекоиагоэа овец. Предложена схема приаязнанной диагностики болезни.
Практическое использование результатов проведенных исследований определено Следувзиыи нормативно-техническими документами, утвержденными ГУБ МСХ СССР:
Технические условия $ 4620-1127-84 на "Набор препаратов для диагностики аденоыатоза легких овец методом РИД";
Временная инструкция по изготорленя» и контроле "Набора";
Наставление по применении "Набора" от 28.11.84;
Временные ыетодкческке указания по лабораторной диагностике адеконатоза овец и коз от 02.07.85;
Временная .инструкция "О мероприятиях по борьбе с аденоиатоэоы овец к коз" от 18.11.85.
Результаты -исследований используются во ВНИИВВй'і и ветерииарио-бактерислогических лабораториях при проведении: .диагностики аденоыатоза методом РИД.
Апробация,работы. Результаты основних научных'исследований апробированы и подтверждены комиссионными испытаниями в институте (акт от 04.11,88 %> 17), межведомственной комиссией (акт от марта 1983г.), Росконтролером института (паспорт на "Набор препаратов для диагностики аденокагоза иетодоу ИЩ" от 27,11.89) а танке результатами экспертиз-' них исследований полевых ыатериаяов из 21 хозяйства и 15 областей нашей страна.
Материалы диссертации были доложены на научно-теоретических конференциях-'в институте в 1983, 1985 и 1986 годах, на ученом совете института в 1985 году, на ВДНХ в 1989 и 1990 годах, на облаегнои совеааник ветеринарных врачей г.Владишра 8 1939 году. ,
рубликация результатов. Ыагериала диссертации опубликована в отчетах по научно-исследовательским темам в период I9S2-I990 гг. в 9 научных статьях, в 7 удостоверениях на рационализаторские предложения, нормативно-технических документах, утвержденных ГУВ МСХ СССР.
„Основные подогеная, вка,вигатене pa .зелоту:
иорфолопіческає и некоторые физико-якмичеекне свойства возбудителя аденэматоза овец;
биологические свойства: способность к воспроизведения болезни у ягнят, овец я кроликов.при лмтратрахеальном и внутривенном заражении;
чувствительность культур клеток к возбудителе аденокатс» за. и цккшишческке изменения.в шх;
методы выделения специфических, антигенов возбудителя . аденоматоза;
диагностический "Набср" а схема для ярдаязкешой диаг-ноегазз! аденоматоза. . . / .
Объем и структура диссертации: Диссертация изложена на 168 страницах кааинописного ?екета, шшзч&ет. введение, ,: обзор література, собстзешше исследования, обсуждение, выводы, практические лредЛояетая. :.'