Введение к работе
Актуальность проблемы.
Несмотря па значительный прогресс,достигнутый в предупреждении и лечении вирусных заболеваний, они продолжают занимать ведущее место среди инфекционной патологии. Одним из широко распространенных вирусных заболеваний, в лечении которых пока не получено ощутимых результатов является цитомегаловирусная ( ЦМВ) инфекция. В мире вирусом цитомегалии инфицировано около 80% взрослого населения.
ЦМВ инфекция является серьезной проблемой для больных с дефектом системы иммунитета и основной причиной смерти иммуносу-прессированных лиц,особенно реципиентов костного мозга (Erice А., et.al.,1989 ). Интерес к цитомегалии в последнее время возрос в связи с частым проявлением этой инфекции у больных СПИДом (Qmnann G. V. ,et. al. ,1934; Jacobson MA. ,et. al. ,1983). ЦМВ известен как внутриутробный вирус. Большую опасность представляет эта инфекция для беременных женщин с физиологическим снижением активности иммунной системы. Обычно ЦМВ инфекция протекает без клинических проявлений и часто остается нераспознанной, но у женщин в период беременности вирус может активироваться и инфицировать плод, что нередко приводит к невынашиванию плода, преждевременным родам, мертворождениям и различным аномалиям развития с высокой летальностью. Среди новорожденных ЦМВ инфекция выявляется в 0,2-2,2% случаев. Летальность детей достигает 20-30%, а у более чем Э0% выживших проявляются различные осложнения (психоневрологические нарушения, торможение психомоторных реакций, задержка интеллектуального и речевого развития, глухота, хориоретиниты с атрофией зрительного нерва) (Stagno S. , Whitley R.J. , 1985).
Учитывая, что в основе патогенеза ЦМВ,инфекции лежат иммунологические сдвиги, такие как снижение активности Т-хелперов, мак-
рофагов и естественных киллеров (ЕЮ ( Rook Н. Н. ,et. al. ,1985; Ци-ронкайте Э. Ф. , Палайкене 3. И. ,1987), функции которых также зависят от состояния системы интерферона, можно предположить важную роль иммуномодулятороЕ - интерферона и его индукторов - в комплексном лечении этой инфекции.
Одними из наиболее эффективных химиопрепаратов избирательного действия против ЦМВ являются ганииклоЕир и фоскарнет. Однако высокая токсичность препаратов ограничивает их широкое применение. Есть данные о применении лейкоцитарного о^-ИФН в лечении и профилактики ЦМВ инфекции, свидетельствующее об эффективности его профилактического использования (Hirsch MS. at. al. ,1983; Meyers J. D. et. al. ,1987). Одним из направлений профилактики и лечения вирусных инфекций является комбинированное использование химиопрепаратов с различным механизмом противовирусного действия, другими -применение индукторов ИФН,а также сочетанное использование химиопрепаратов с ИФН или индукторами ИФН. Получены первые положительные результаты применения индуктора природного дсРНК. - ларифана при лечении рецидивирующего герпеса (Самгин М. А. , Носик Н. Н. и др. , 1991). Впервые дано экспериментальное обоснование эффективности комбинированного применения аналогов пирофосфата или ациклогуано-зина отечественного синтеза с индукторами ИФН ларифаном или ри-достином на различных экспериментальных моделях герпесвирусной инфекции ( Лі. во в II. Д. , Самойлович Е. О. и др. ,1989).
Цель и задачи исследования.
Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение противоцитомогаловирусной активности ряда новых отечественных препаратов ИФН. индукторов ИФН и химиопрепаратов, разработка их комбинаций и схем применения для усиления противовирусного эффекта: оценка функционального состояния системы интерферона у Соль-
ных ЦМВ инфекцией, в том числе у контингентоЕ повышенного риска -беременных и детеИ раннего возраста.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
разработать наиболее эффективные комбинации химнопрепара-тов с ИФН или индукторами И'ГН;
определить ряд показателей интерферонового статуса в зависимости от формы заболевания и оценить их значимость с целью разработки подходов к возможной коррекции функций системы ИФН и иммунитета.
Научная новизна.
Впервые была показана антишітомегаловирусная активность индукторов ИФН - дс РНК (ларнфана и рлдостина) в системе m vitro п проведено сравнительное изучение их действия в профилактической и лечебной схемах. Установлена высокая противовирусная эффективность комбинаций ациклогуанознна і Ацг) и ганцикловира с ИФН и их индукторами, позволяющая при снижении доз препаратов получить си-нергидный эффект.
Выявлены нарушения в системе ИФН у больных ЦМВ инфекцией: повышение уровня циркулирующего ИФН и снижение способности лейкоцитов периферической крови к продукции ИФН, изменения уровней ин-терферонзависимых ферментов. Установлена обратная корреляционная зависимость уровня циркулирующего ИФН и активности ЕК у беременных женщин с ЦМВ инфекцией. У детей, матери которых имели активную инфекцию обнаружены повышенный уровень циркулирующего ИФН в сыворотке крови и тенденция к снижению иммунного ИФН.
Практическая ценность. 1. Эффективность комбинированного применения химиопрепаратов с ИФН или индукторами ИФН в культуре клеток позволяет рекомендовать ис-
пользование таких сочетаний препаратов для клинического изучения.
-
У Сольных женщин с активной формой ЦМВ инфекции отмечается повышение уровня циркулирующего ИФН в сыворотке крови,снижение способности лейкоцитов к продукции о/-и /'-ИФН,снижение активности ин-терферонгависимой протеинкиназы и ЕК, наиболее выраженная у беременных. 'Эти показатели могут быть рекомендованы в качестве дополнительных критериев сценки активности, характера течения ЦМВ инфекции и контроля за эффективностью профилактики и коррегирующего лечения.
-
Установлено, что у детей, родившихся от матерей с активной инфекции наблюдается повышенный уровень сывороточного ИФН и тенденция к снижению активности лимфоцитов продуцировать иммунный ИФЕ
Положения. выносимые на зашиту. і. Индукторы ИФН (ридостин и ларифан) и ИФН оказывают эффективное противовирусное действие Е культуре инфицированных ІШВ фибро-бластов. преимущественно при профилактическом применении.
-
Отечественные препараты Ацг, ФУК, Ара-А обладают противоцито-ыегаловирусной активностью in vitro.
-
Сочетания Ацг, ганцикловира. ФУК с ИФН или с индукторами - ла-рифаном и ридсстином - обладают синергидным противоцитомегалови-русным эффектом.
-
Обнаружены нарушения функционирования системы интерферона при ЦМВ инфекции, проявляющиеся повышенным содержанием циркулирующего ИФН в сыворотке периферической крови, снижением продукции о/-И I-ИФН in vitro в отеєт на специфическую стимуляцию, снижением активности ЕК и изменением уровней интерферонзависимых ферментов: снижением протеинкиназы и тенденцией к повышению 2-5А синтетазы.
Апробация работы.
Результаты исследований были представлены и обсуждены на
2-ом Всесоюзном симпозиуме "Теоретические и прикладные аспекты молекулярной биологии" (Самарканд, 1991 г.), на международном симпозиуме по интерферону (Торонто, Канада,1992 г.).
Диссертация апробирована 13 октября 1992 г. на заседании Окепертного Совета по предварительной экспертизе диссертационных работ при Институте вирусологии им. Д. И. Ивановского.
Публикации.
По материалам диссертации опубликованы 4 работы.
Объем и структура диссертации.