Введение к работе
Актуальность проблемы. Актуальным вопросом современной иммунологии продожавт оставаться клеточный и молекулярный механизм распознавания чужеродных антигенов Т-лимфоцитами. В рамках этого вопроса не первый план выхолит проблема развития иммунного ответа в аллогеяной системе. Понимание закономерностей этого процесса откроет новые перспективы для решения важных вопросов современной медицины и прежде всего проблемы отторжения трансплантируемых органов и тканей. Молекулярные механизмы вллораспознавания также, как и структура аллогенных мишеней, распознаваемых аллореактивными Т-клеткамн, остаются до конца не выясненными. Крайне мало изучены процессы дифференцкровки еллоантиген-специфических Г-лимфоцитов, приводящие к появлению, у клеток-предшественников функций эффекторных клеток. Немаловажным является вопрос о том, через одни и те же атапн или нет проходит диффереицировка клеток, впервые встречающихся с антигеном, и клеток памяти (КП).
Актуальность темы исследования обусловливается также теоретической и практической значимостью изучения роли ко-рецепторов и адгезивных молекул в Т-клеточном распознавании. Данные исследования предоставляют дополнительные возможности селективной регуляции иммунных реакций отторжения трансплантата.
Цель работы. Целью диссертационной работы явилось изучение особенностей распознавания вллоантигена популяциями CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов (ЮТ) в зависимости от различной аффинности Т-рецептора (TcR) и от участия в распознавании CD8 и LPA-t .ко-рецепторных молекул, а также сравнение природы аллогенных эпитопов, распознаваемых супрессорным и
цитотоксическим подклассами CD8+ Т-лимофоцнтов. Вторая проблема исследования заключалась в выяснении условий дифференцировкн предшественников еффекторных первичных ЦГЛ и КП в' 8ЛЛ0ГЄНН0Й системе.
Задачи исследования. 1. В аллогенной системе сравнить
условия и скорость дифференцировки преды ственников первичных ЦГЛ и КП, являющихся предшественниками вторичных вффекторных ЦГЛ.
-
Изучить влияние ко-рецепторной молекулы CD8 (Ly2) на функцию вллоанти-ген-специфических эффекторных ЦГЛ а КП в зависимости от аффинитета TcR.
-
Исследовать роль р-цеш адгезивной молекулы LPA-1 в процессе аллоанти-ген-специфяческой активации Т-лимфо-цитов.
*4. Выяснить возможные различия в
распознавании антигенных эштопов
СМ* адлорвахтивными Т-лимфоцитами,
опосредующими специфические супрес-
сорную и цитотоксичесую активности в
одних и тех же условиях иммунизации.
Научная новизна. В представленной работе получены
экспериментальные . - данные, свидетельствуицие в пользу
существования различных условий дифференцировки предшественников
первичных эффекторных ЦГЛ и КП. Впервые показано, что для
созревания первичных ЦТЛ из пре-ЦТЛ на заключительном этапе
антигбН-завр"!Имой дифференцнровки синтезы РІЖ и белка являются . необходимыми. Напротив, формирование вторичных ЦТЛ из КП происходит в условиях ингибирования указанных синтезов.
В оригинальной экспериментальной системе с использованием адсорбции-элюции иммунных лимфоцитов на монослоях макрофагов (Мф) выяснен вопрос о необходимости Сов молекулы при взаимодействии низкоаффинных TcR с аллоантигеном. Для р-цепи адгезивной молекулы LFA-J выявлены новые возмокносги в ко-стимуляции аллогенного иммунного ответа.
Показана возможность генерации Г-клегок, опосредующих как специфическую супрессорную, так и специфическую цитотоксическую активности при одних я тех же условиях иммунизации. Полученные данные свидетельствуют о том, что одна и та ке популяция Ср8+ Т-лимфоцитов мокет проявлять различные функциональные активности, а распознавание аллоантигенного эпитопа функционально различными субпопуляциями происходит сходным образом, по-видимому, в контексте собственных молекул МНС класса I.
Практическая значимость работы. Диссертационная работа вносит определенный вклад в развитие фундаментальных представлений о- механизмах функционирования и дифференцировке специфических эффэкторных ЦТЛ, важных для развития, в первую очередь противоопухолего и противовирусного иммунитета.
Результаты работы, свидетельствующие о том, что ЦТЛ и специфические т-супрессоры (СТС) могут иметь сходный характер распознавания антигена In vivo, могут быть полезны при разработке подходов иммунотерапевтического воздействия на популяцию Т-лимфоцитов, опосредующих супрессорный эффект,. Поскольку стратегия иммунотерапии зависит как от выяснения эпитопов, распознаваемых
СТО, так в такой хе мере и от решения вопроса о существовании СТО как отдельное линии дафференвдровки Г-клеток.
Результаты работы внедрены в учебный процесс и используются в курсах лекций по фундаментальной иммунологии для студентов биологического факультета МГУ им. W.B. Ломоносова и факультета физико-химической биологии Крымского медицинского института.
Апробация работы и публикации. Результаты исследований, вошедшие в диссертационную работу, были представлены на отечественных и зарубежных конференциях и симпозиумах: на I съезде иммунологов России (Новосибирск, 1992), I съезде аллергологов и иммунологов Азербайджана (Баку, 1992), VIII Международном конгрессе по иммунологии (Будапешт, Венгрия, 1992). Междурародном симпозиуме "Структура и функции регуляторних полипептидов" (Москва-Ярославль, 1992), XI республиканской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" (Челябинск,1992), Ш съезде гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов и паразитологов Респ. Молдова (Кишенев. 1992). Международной конференции по механизмам киллинга (Израиль, 1993). Республиканской конференции по иммунологии (Луганск, 1993).
Полученные экспериментальные данные докладывались на лабораторных и межлабораторных - конференциях, а также на совместной конференции лабораторий механизмов регуляции иммунитета, противоопухолевого иммунитета и иммунохимии опухолей НИИ канцерогенеза ОШ РАМН и кафэдры вирусологии биологического факультета МГУ*
Материалы диссертации отражены в 17 научных публикациях.
Основные положения, выносимые на защиту. 1. Ко-рецепторная молекула CD8 оказывает существенное влияние на проявление цитолитического нотэнциала ЦТЛ, несущих низкоафЗ&шные рецепторы.
'2. Адгезивная молекула LFA-1 способна передавать индуктивный ко-стимуляторны сигнал через свею р-субъединицу.
-
Аллсраактивные CD8+ Т-лимфоциты со специфическими супрессоркой и цитотокелческой активностями, индущфованные в одних и тех яга условиях иммунизации, способны распознавать узкую аллоантигенную детерминанту в измененном (отличном от донорского) контексте.
-
Условия и пути антиген-зависимой дифференцировки предшественников первичных ЦТЛ и КП в зффекторные- ЦТЛ различны.
Объем и структура диссертации, диссертация изложена на 1<1?6 страницах машинописного текста. Она состоит из введения, пяти глав обзора литературы, раздела материалов и методов исследования, четырех глав собственных результатов, главы обсувдения результатов, выводов и списка используемой литературы, содержащего 154 источника, диссертация иллюстрирована 22 рисунками и 6 таблицами.'