Введение к работе
Актуальность проблемы. Аренавирусы Ласса и Мачупо являются возбудителями острых инфекционных заболеваний человека, лихорадки Ласса и Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ), соответственно. Несмотря на то, что ареал распространения вируса Мачупо ограничен северовосточными районами Боливии, а вируса Ласса - странами Западной и Центральной Африки, эти возбудители, в связи с расширением экономических отношений и развитием туризма, могут представлять реальную опасность и для неэндемичных территорий.
В Западной Африке ежегодно выявляются более 250 000 случаев инфицирования людей вирусом Ласса. Заболевание характеризуется тяжелым течением и высокой смертностью (свыше 5 000 случаев в год). При этом в эндемичных районах выявляется высокий уровень (25 - 55%) здоровых людей, имеющих антитела к вирусу Ласса, что.свидетельствует о наличии стертых. субклинических форм данного заболевания. В отличие от лихорадки Ласса. при БГЛ не наблюдается большого количества заболевших людей. Однако, спорадические случаи возникновения этой лихорадки характеризуются высокой летальностыо (до 80%), что указывает на сохраняющуюся опасность этого заболевания в эндемичных районах.
Специфическая терапия геморрагических лихорадок основана, главным образом, на использовании рибавирина и иммунной плазмы, полученной от переболевших людей. Однако, результаты применения как иммунной плазмы, так и рибавирина для лечения аренавирусных лихорадок противоречивы и не могут однозначно свидетельствовать .о достаточной эффективности такого лечения.
Поэтому сохраняется актуальной проблема поиска новых средств терапии и скрининг пригодных для этой цели препаратов должен быть основан на использовании адекватной модели заболевания.
В последнее время появились убедительные данные о важной роли некоторых штгокинов в иммунопатогенезе различных геморрагических лихорадок и их участии в возникновении шокового состояния при бактериальных и вирусных инфекциях.
В этой связи вьпывает интерес изучение роли факторов неспецифического иммунитета в развитии экспериментального заболевания и возможности лечения инфекций, вызванных вирусами Ласса и Мачупо, у мышей различных линий.
Целью настоящей диссертационной работы являлось изучение чувствительности инбредных мышей к заражению вирусами Ласса и Мачупо, выбор линии мышей и оценка активности факторов неспецифического иммунитета и влияния некоторых препаратов на течение экспериментальных инфекций, вызванных этими вирусами.
Для этого необходимо было решить етедующие задачи:
-
Изучить чувствительность инбредных мышей различных линий к заражению вирусами Ласса и Мачупо и охарактеризовать иммунопатологические особенности течения у них экспериментальных инфекций.
-
Изучить изменения продукции ФНО, ИФН (в головном мозге и сыворотке крови) и ИЛ-1, изучить изменение активности НК при экспериментальных инфекциях, вызванных вирусами Ласса и Мачупо.
-
Изучить влияние иммунобиологических препаратов на иммунный ответ после инфицирования инбредных мышей вирусами Ласса и Мачупо.
Научная новизна работы. Впервые изучена чувствительность к вирусу Мачупо (штамм Carvallo) различных линий мышей. Отобрана экспериментальная модель - высокочувствительные инбреяные мыши линии BALB/c.
Впервые изучены иммунологические и клинико-патоморфологические особенности экспериментальной инфекции инбредных мышей, вьпванной вирусом Мачупо.
Впервые изучена динамика неспецифических факторов иммунитета (ФНО, ИЛ-1, ИФН и НК) при экспериментальных инфекциях у инбредных мышей, вызванных вирусами Мачупо и Ласса.
Впервые изучено влияние препаратов десферал (ДФО), ридостина. специфического гамма-глобулина и анти-ФНО сьшоротки на течение экспериментальной инфекции инбредных мышей, вызванной вирусами Мачупо.
Впервые изучено влияние препаратов десферал (ДФО), антагониста рецептора ИЛ-1 и анти-ФНО сыворотки на течение экспериментальной инфекции инбредных мышей, вызванной вирусом Ласса.
Практическая значимость работы. Результаты диссертационной работы позволяют рекомендовать мышей линии BALB/c и CBA/CaLac для оценки влияния имммунобиологических препаратов на активность некоторых медиаторов иммунного ответа при экспериментальных инфекциях у инбредных мышей, вызванных вирусами Мачупо и Ласса, соответственно.
Получен Патент РФ R.U 2029561 О 'Способ получения концентратов вирусов, вызывающих геморрагические лихорадки и обладающих иммуногенной и протективной активностью-', приоритет.от 14.10.91, № 5004595/14, решение о выдаче 27.02.95.
_ Штамм Carvailo вируса Мачупо депонирован в музее вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского (депонент ГКВ N 922 от 12 апреля 1991 г.). Апробация работы. Полученные результаты были представлены на: International Symposium "100 Years of Virology" (Moscow, 1992), IX International Congress of Virology (Glasgow, Scotland, 1993), Российской Научной Конференции "Иммунология и специфическая профилактика особо опасных инфекций" (Саратов, 1993), Seventh International Conference on Antiviral
Research (Charistone, USA, 1994), Third Congress of the European Society for Veterinary Virology (Interiaken, Switzerland, 1994), Eighth International Conference on Antiviral Research (Santa Fe, USA. 1995), "New Approaches to Vaccine Development" (NAVD'95) (Vienna, Austria, 1995), Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene Residential Meeting (Cambridge, UK, 1996). В завершенном виде диссертационная работа доложена на заседании научного семинара НИИ молекулярной биологии ГНЦ ВБ "Вектор" 4 сентября 1996 г.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ. Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения и четырех глав: Обзор литературы (Глава 1), Материалы и методы (Глава 2), Результаты исследований (Глава 3), Обсуждение результатов (Глава 4), выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 151 странице машинописного текста. Иллюстрирована 13 таблицами и 22 рисунками. Библиография представлена 199 источниками отечественных и зарубежных авторов.
Использованные сокращения: БГЛ - Боливийская геморрагическая лихорадка; БОЕ - бляшкообразующая единица; ИЛ-1 - интерлейкин-1; и.с. -индекс стимуляции; ИФА - иммуноферментный анализ; ИФН - интерферон; Кон А - конканавалин А; НК - натуральные киллеры; РБТЛ - реакция бластной трансформации лимфоцитов; СПЖ - средняя продолжительность жизни павших животных (сут.); ФНО - фактор некроза опухоли; IL-lra -антагонист рецептора ИЛ-1.