Введение к работе
Актуальность темы. В последние годы для интенсификации птицеводства предложены различные способы коррекции защитных свойств организма птиц. Особое место в технологии выращивания птицы занимают полноценные корма с наличием биологически активных веществ: витаминов, микроэлементов, пробиотиков, антиоксидантов. Большинство витаминов не синтезируются в организме и поэтому являются обязательной частью пищевого рациона. Физиологический баланс всех необходимых организму витаминов обеспечивается их поступлением в соответствии с суточной потребностью. (Околелова Т.М., Сергеева A.M., 1988г.).
Для достижения полноценного биологического питания птицы следует в рацион вводить правильно подобранные в количественном соотношении между собой и с другими пищевыми веществами витаминные комплексы. В организм птиц витамины поступают с кормами в виде готовых соединений или провитаминов. (Маслиева О.И., 1975г.).
Недостаточное поступление витаминов резко снижает усвоение питательных веществ из кормов, что приводит к нарушению функции отдельных органов, снижению устойчивости организма к различным инфекционным заболеваниям. Развиваются патологические процессы, которые приводят к скрытым формам - гиповитаминозам, а затем к авитаминозам (Имангулов Ш.А., Егоров И.А. и др., 2006г.).
В настоящее время получено большое количество новых данных по питательности кормов для сельскохозяйственной птицы, уточнены их параметры по обменной энергии, доступному фосфору, которые включены в таблицы питательности и химического состава кормов. Разработана концепция регламентирования качественных показателей комбикормов.
Все перечисленные факторы обусловливают необходимость по-новому оценивать питательную и энергетическую значимость каждого компонента, изменять нормы кормов с учетом потребностей различных возрастных групп птицы. (Войтов Л.И., Федорова Н.М., Бездверный В.П. идр.,1989г.).
Известны традиционные методы определения витаминов группы В в биологических объектах, препаратах, премиксах и комбикормах. Они основаны на спсктрофотометрических, флюориметрических и колориметрических методах, тонкослойной и газожидкостной хроматографии. (Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф., 1982г.).
Современными методами исследования являются метод иммунофер-ментного анализа с использованием микробиологической тест-системы Vita Fast и конкурентной тест-системы Ridascreen Fast, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с предварительной иммунноаф-финной очисткой на колонках EASY-EXTRACT, применяемые для анализа кормовых смесей и биологических объектов.
Однако данные по ветеринарно-санитарной оценке качества кормов для сельскохозяйственной птицы весьма ограничены, современных методов определения водорастворимых витаминов в полнорационных комбикормах мало, имеются только методы флюориметрический и ВЭЖХ для определения витаминов в премиксах. Поэтому совершенствование методов определения водорастворимых витаминов и применение их в практических лабораториях является весьма актуальным.
Цель и задачи исследований. Целью работы является сравнительная оценка и совершенствование современных методов определения витаминов в кормах, инкубационном яйце и биоматериале (печень) сельскохозяйственной птицы.
В задачи исследований входило:
дать характеристику кормовой базы и особенностей питания сельскохозяйственной птицы различных возрастных групп;
изучить показатели качества и безопасности кормов для выращивания сельскохозяйственной птицы различных возрастных групп;
изучить возможность использования метода ИФА с помощью микробиологической тест-системы Vita Fast для определения витаминов группы В в комбикормах, инкубационном яйце и биоматериале (печень);
изучить возможность использования метода ИФА с помощью конкурентной системы Ridascreen Fast для определения витаминов группы В в комбикормах;
изучить возможность использования хроматографического анализа
(ВЭЖХ) с предварительной иммунноаффииной очисткой на колонках
EASY-EXTRACT для определения витаминов В9, Вп в комбикормах;
дать сравнительную оценку методов ИФА Vita Fast и Ridascreen Fast, а также ВЭЖХ для определения водорастворимых витаминов;
разработать методические рекомендации по определению витаминов группы В в комбикормах, сырье для производства комбикормов, ингредиентах, премиксах, печени и яйце методом иммуноферментного анализа, микробиологическим методом и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Научная новизна. Дана комплексная оценка физико-химических показателей, пищевой ценности, качества и безопасности полнорационных комбикормов для выращивания сельскохозяйственной пгицы различных возрастных групп, с различным содержанием протеина, жира, углеводов, витаминов, макро- и микронутриентов. Модифицированы методы ИФА с помощью микробиологической тест-системы Vita Fast и конкурентной тест - системы Ridascreen Fast для обнаружения витаминов группы В в полнорационных комбикормах, инкубационном яйце и биоматериале (печеш,). Предложена предварительная иммунноаффинная очистка на колонках EASY-EXTRACT для проведения ВЭЖХ при обнаружении витаминов В9, В12 в комбикормах.
Практическая значимость работы. Разработаны «Методические рекомендации но определению витаминов группы В в комбикормах, сырье для производства комбикормов, ингредиентах, премиксах, печени и яйце методом иммуноферментпого анализа, микробиологическим методом и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии» ,утвержденные методической комиссией ФГУ ЦНМВЛ, протокол №11 от 16.03.2009г. и секцией «Ветеринарпо-санитарная экспертиза» Отделения ветеринарной медицины РАСХН от 26.04.2011 г.
Основные положения, выносимые на защиту
На защиту выносятся следующие основные положения:
характеристика кормовой базы и особенности питания сельскохозяйственной птицы различных возрастных групп;
показатели пищевой ценности, качества, и безопасности полнорационных комбикормов различных возрастных групп птицы;
использование модифицированного метода ИФА с помощью микробиологической тест-системы Vita Fast и конкурентной системы Ri-dascreen Fast, для обнаружения витаминов группы В в полнорационных комбикормах, инкубационном яйце и биоматериале (печень).
использование хроматографического анализа ВЭЖХ с предварительной иммунноаффинной очисткой на колонках EASY-EXTRACT для обнаружения витаминов В? и B]2. в комбикормах.
Апробация работы. Основные результаты научных исследований доложены и обсуждены на VI Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (М.: МГУПБ, 2007г.), на Международной научно-практической конференции преподавателей, молодых ученых и аспирантов аграрных вузов РФ «Актуальные проблемы современного аграрного производства» (М; РУДН, 2008г.), а также на расширенном заседании кафедры ветери-нарно-санитарной экспертизы МГУПБ (2011г).
Публикации. По результатам исследования опубликовано 6 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 133 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Работа иллюстрирована 10 рисунками, 30 таблицами. Список литературы включает 112 источников, в том числе 22 иностранных авторов.
