Введение к работе
Актуальность проблемы . В последние годы проводятся интенсивные структурно-функциональные исследования веществ, способных усиливать и пролонгировать биологические оффекты брадикинина (Ш>. Это связано с участием калликреин-кининовой системы (ККС) в регуляции уровня артериального давления (АД), тонуса сосудов» а также с ключевой роякэ одного из основных кшпшразрушаюцісс ферментов - йкнишзы II - в метаболизме не только кининов, ко н ангкотензинов. В связи с этим возникла необходимость пояучо-нкя избирательных ингибиторов фермента с цельи создания нового типа антигипертензивных препаратов.
Работа с природными и синтетическими брадикшпш-потенкдруо!» т пептидами (ШП) - ингибиторами ккншазы II - показали перспективность этих исследований в поиске новых биологически активных веществ, снижающих артериальное давление. Наибольший интерес среда таких соединений представляют пептиды, выделеккаа Ез ядов змей и насекомых. Однако молекулярный механизм потенцирующего действия на брадикккин до конца еще на ясен.
Этим обусловлена необходимость широкого поиска брадиккнин-потенцирувщих пептидов из различных источников, в частности ядоа вивотныж, отлігоазднхся большим содерзанием биологически активних веществ. Получение их а индивидуальной состоянии, установление химического строения и механиэш действия в совокупности определяет актуальность настоящих исследований, направленных на выделение пептидов, потєйсііруащиз: брадшштн из яда паука Latro-
dectus tredecimguttatua В ГОЦОГбНИОИ ВИДЗ It ЙЗуЧЗНКО НОКОТОрШЇ
еспэятов мехат&ма их действия.
ЛМЬ-й еадачч исследований. Основная цэль нааях исследова-пнЯ - идкшфікапяя я прзиаративкоа сыдолегсга брадкякшш-потен-
ПЯРЗТОПЗС ПЄПТИДОВ ИЗ яда паука Latrodectus trudeuimguttutua
2 ваяснение механизма их действия.
Для достижения поставленной цели решались саедухкцие ездзчм:
определение брадимшии-потенцирувцей окишносги в яд и во фракциях, выделенных на яда паука каракурта}
разработка г»з?ода получения Еысоксочзщгннызг брадвякшш-потенцирующих пептидов нз ядаj
определение фиэико-гзашческих свойств отих пептидов: молекулярная масса, изоэлектрическая точка, аминокислотный состав, концевые аминокислотные последовательности}
характеристика биологического действия выделенных пептидов}
установление механизма потенцирования брацикиника пептидами из яда паука Latrodectus tredecimguttatua.
Научная новизна и практическая значимость. Впервые выделены в гомогенном виде два брадикюЕіа-вотенвдруїКцях пептида из яда наука каракурта с молекулярной їізссой 10 000 и 2500 Д. Показано „ что они являются эффективными ингибиторами кининразрушающих ферментов, сниаают артериальное давление, что дзет возможность расоатрявать шс в качестве потеиииалыдо терапевтических среде»».
Изучены физико-химические свойства и биологическое деист-виз пептидов но яда . Установлено, что пепкзда в» яда паука усиливают и пролонгируют спазмогагный и депресссрныЯ1 еф|екты брадикишдаа, стицулирувї шевобоздеиие игезгагска кз- вічних зйомок, енняапт прессорный эффект енгиотензкна I. Теы саза&г расширен арсенал брадикинин-поївнчйрувчях пептидов с широке* спэкт-рои действия для бйояиазчосялх исследования при изучения компонентов каляккренн-киннновой и роиш-онглотенэин-альдостерошвой систем (РААС) организма.
Брацикигаш-потенцирукда пептиды иэ яда паука batrodec-
tua tredeciraguttatus используются во Всесоюзном химшш-фврмаце-вткческоы институте ни. С.Орджоникидзе в процессе пояска и изучения новых антигипортензивных препаратов, а также в Институте биологической н медицинской химии АМН СССР как "инструмент" щы изучении свойств и функций компонентов кадликреин-кининовой и решш-ангнотензин-адьдостероновой систем организма млекопитао-
ЧИХ.
Публикации и апробация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы были представлены на ІУ Всесоюзном съезде фармакологов в г. Ташкенте (1988 г), на I региональном совещании по химическим реактивам республик Средней Азии и Казахстана, г. Душанбе (1986 г), на конференции молодых ученых "Актуальные проблемы укрепления связи науки и производства", г. Фергана (1988 г), на Всесоюзном симпозиуме по химии белков, г. Тбилиси (1990 г). По полученным результатам опубликовано б статей.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 170 страницах машинописного тексте и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов и обсуждения, заключения, выводов и списка литературы, включающего 204 наименования, из них 145 зарубежных авторов. Работа содержит 8 таблиц и 33 рисунка.
