Введение к работе
Актуальность темы. Создание генетических карт на основе молекулярных маркеров является современной высокоэффективной технологией для надежной и ускоренной селекции растений непосредственно по генотипу (Pillen et al., 1996; Haanstra et al., 1999; Saliba-Colombani et al., 2000). Молеку-лярно-генетические маркеры на основе микросателлитных последовательностей ДНК в настоящее время являются одними из самых популярных для изучения геномов многих видов организмов (Schlotterer et al. 1998).
Томат - ценная сельскохозяйственная культура" с развитой системой
производственных и селекционных технологий и хорошо изученная в гене
тическом плане (Жученко, 2001). Большое количество молекулярно-
генетических маркеров, полученных с использованием таких методов как
RFLP, RAPD и AFLP, локализовано на генетической карте томата (Tanksley
et al., 1992; Grandillo and Tanksley, 1996; Haanstra et al., 1999). Однако до сих
пор не было проведено исследований, которые позволили бы интегрировать
маркеры на основе широкого спектра микросателлитных последовательно
стей в уже имеющиеся генетические карты томата. Исследования по физиче
ской и генетической локализации микросателлитов в геноме томата касались
ограниченного количества их типов, и основывались на методах, исполь
зующих длинные микросателлитные последовательности (Grandilo and
Tanksley, 1996; Areshchenkova and Ganal, 1999; Areshchenkova and Ganal,
2002). ~ -;'./
Получение насыщенной маркерами карты томата позволит вести на-' прааленную селекцию этой культуры по ценным хозяйственным признакам, включая количественные, и проводить' клонирование генов. Генетические карты являются также мощным инструментом для изучения организации, функционирования и эволюции генома (Tanksley et al., 1992).
Цель и задачи. Целью данной работы явилось создание интегрированной генетической карты групп сцепления межмикросателлитных последовательностей (ISSRs) генома томата Lycopersicon esculentum:
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие основные задачи:
Изучить организацию микросателлитных и межмикросателлитных последовательностей в геноме Lycopersicon ssp.
Определить степень полиморфизма межмикросателлитных последовательностей на межвидовом уровне.
Исследовать особенности физической локализации межмикроса-теллитных последовательностей на хромосомах томата/
Выяснить возможность использования межмикросателлитных маркеров для Филогенетических исследований.
Определить шозможнесть^лвіййШаций м ікросателлитов вблизи
генов устойчивости тс
ИтМ*іт#еШїЛИОТЕКА ' '
Моск. сель-::олоз. академии им. К.
Инв. Щ
Научная новизна 1 Создана интегрированная карта групп сцепления межмикросателлитных последовательностей ДНК томата
-
Приоритетными являются полученные данные с использованием линий томата WSL6 и IL6-3 с интрогрессиями в хромосоме 6, свидетельствующие о возможности физической локализации микросателтитов и межмикросателлитных последоватечьностей ДНК тома га вне прицентромерной области хромосом томата
-
Впервые использованное комбинирование ISSR-праймеров и прай-меров д ія ампчификации аналогов генов устойчивости растении (R.GA) сви-дететьствует о возможности токализации микросатет іитов в структуре генов устойчивости томата к патогенам или в непосредственной бчизости от них
-
С использованием (IbSR-PCR) выявлена высокая степень по пшор-физма межмикросателлитных последовательностей у пяти видов томата На основе выявленного полиморфизма создано филогенетическое дерево исспе-дованных видов томата
Прдктическдя значимость. Предложен набор нраймеров на основе межмикросатет-итныч последовательностей для маркирования генотипов томата на межвидовом уровне и использования в селекции томата при межвидовой гибридизации дтя выявления гибридов и изучения интроі-рессий генетического материхча в постеяующих поколениях
Показана возможность использования межмикросатечлитных маркеров для маркирования генов устойчивости томата к патогенам
Межмикросате.ілиткьіе мцркеры могут ^спешьо быть применены дія филогенетических исстедоваций Lvcaperswon ььр
Созданная интегрированная і-енетичесяая карта групп сцепления может быть использована для направленной селекции томата и клонирования генов хозяйственно ценных признаков
Апробация работы Результаты работы доложены на 5-й международной конференции по Solanaceae (23-29 Июля, 2000, Nijmegen, The Vetherlands), на ежегодной научной конференции ученых МСХА (1499, Москва), на Конференции молодых ученых «Моподые ученые - воірождению сепьсхого хозяйства России» (2000, Брянск), на Генетической конференции і.освященнои 100-летию со дня рождения А Р Жебрака и 70-іетик> образования кафедр генетики в Тимирязевской академии (2002, Москва), на л?седа-княч кафедры сельскохозяйственной биотехнологии МСХА
Публикации. По материалам диссертации опубтиковано 5 печатных работ, 1 направлена в печать
Структура и объем работы Диссертация состоит из __ глав, выводов, списка іитературьі, включающего/^'наименований, в т ч ^У/иностранных авторов Материалы диссертации изложены на/J*/ страницах ма-шинопчсного текста, юдьржаг/^-7 табздц, /' рисунков и фотографий
