Введение к работе
1.1.Актуальность темы. Несмотря на значительный прогресс в изучении свойств возбудителя и важнейших проблем диагностики, эпизоотологии и специфической профилактики, бешенство животных, по-прежнему характеризуется глобальной распространенностью (Ведерников В. А., 1987-2009 гг.; Сидоров Г.Н. 1995-2004 гг.).
Использование при разработке новых и совершенствовании существующих промышленных биотехнологий производства биопрепаратов c применением современного высокопроизводительного оборудования и высокоспецифических иммунобиологических методов способствует повышению их эффективности, а следовательно, и улучшению эпизоотической, экологической и социальной обстановки в Российской Федерации (Самуйленко А.Я., Рубан Е.А., 2000).
Повышение качества биологических препаратов и эффективности их производства с осуществлением технического и технологического перевооружения является актуальной задачей. При этом необходимо повысить надежность и экологическую безопасность работы предприятий. Внедрение новых и существующих технологий при промышленном производстве биопрепаратов требует решения не только технологических, но и экономических вопросов (Красуткин С.Н.,2002).
Изучением проблем производства антирабических препаратов занимались и занимаются многие исследователи как в России, так и за рубежом (Селимов М.А., 1978; Черкасский Б.Л., 1984, 1985; Бучнев К.Н. и др.1985; Кузнецова С.В., Сухарев О.И., 1991; Хрипунов Е.М.и др., 1998; Гусев А.А., Панин А.Н., 1998; Равилов А.З. и др., 1999; Кузнецов П.П., 1978-2000; Нагасингхе К.Д.С.,2000; Иванов В.С., 1978-2010; Макаров В.В. 2002; Гулюкин М.И.,2002; Ботвинкин А.Д.,2004; Рыбаков С.С., Метлин А.Е.,2009; Сафонов Г.А.2011; Shill М., Вауnеs R.D., Мillег S.D., 1987; Uhаа I.J., DаtoV.М., Sorhagе F.Е., 1982; Pastoret P.P., 2002; Brookess V., Parsons G. еt аl. 2005; Hanlon S.A., Kuzmin I.V., et al.2005)
Повышение эффективности производства биопрепаратов, в том числе антирабических вакцин является актуальной задачей XXI века.
1.2. Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось совершенствование технологии производства инактивированных антирабических вакцин.
Для достижения указанной цели необходимо решить следующие задачи:
-
Отработать технологический режим культивирования клеток и вируса бешенства штамм «Щелково-51» в промышленных биореакторах.
-
Изучить иммунобиологические свойства вируса бешенства, полученного в промышленных биореакторах суспензионным и псевдосуспензионным способами.
-
Разработать технологию изготовления жидкой инактивированной антирабической этанол-вакцины для кошек и собак.
-
Разработать технологию изготовления сухой инактивированной антирабической вакцины для крупного и мелкого рогатого скота.
1.3. Научная новизна. Впервые в РФ отработаны технологические режимы суспензионного и псевдосуспензионного культивирования клеток ВНК-21 и вируса бешенства штамм «Щелково-51» для промышленного производства антирабических вакцин.
Впервые разработана инактивированная антирабическая жидкая этанол-вакцина для кошек и собак, на основе вируса бешенства штамма «Щелково-51», репродуцированного в культуре перевиваемых клеток ВНК-21, включающая гидроокись алюминия (ГОА) и этанол (Патент РФ № 2366457 от 10 сентября 2009 г. «Вакцина антирабическая для животных »).
Впервые разработана инактивированная антирабическая сухая вакцина для крупного и мелкого рогатого скота, на основе вируса бешенства, штамма «Щелково-51», включающая защитную среду высушивания на основе пептона, сахарозы и желатина, гидрат окиси алюминия, а также стимулятор иммунитета сапонин (Патент РФ № 2402348 от 27 октября 2010 г. «Вакцина антирабическая сухая для крупного и мелкого рогатого скота»).
1.4. Практическая значимость работы. Усовершенствована промышленная технология изготовления инактивированных вакцин против бешенства животных из штамма «Щелково-51».
Результаты исследований и технологические решения вошли в следующие нормативно-технические документы, которые рассмотрены и утверждены в установленном порядке:
1. Регламент на опытно-промышленное производство инактивированной антирабической жидкой этанол-вакцины из штамма «Щелково-51» для кошек и собак, утвержденный директором ВНИТИБП 20.09.2009 г.
2. Инструкция по применению инактивированной антирабической жидкой этанол-вакцины из штамма «Щелково-51» для кошек и собак, утвержденная директором ВНИТИБП 20.09.2009 г.
3. Лабораторный регламент на производство инактивированной антирабической сухой вакцины из штамма «Щелково-51» для крупного и мелкого рогатого скота, утвержденный директором ВНИТИБП 22.10.2010 г.
4. Инструкция по применению инактивированной антирабической сухой вакцины из штамма «Щелково-51» для крупного и мелкого рогатого скота, утвержденная директором ВНИТИБП 22.10.2010 г.
1.5. Основные положения, выносимые на защиту
-Отработка технологических режимов культивирования клеток и вируса бешенства штамм «Щелково-51» в промышленных реакторах.
-Изучение иммунобиологических свойств вируса бешенства, полученного суспензионным и псевдосуспензионным способами.
-Разработка технологии производства инактивированной антирабической жидкой этанол-вакцины из штамма «Щелково-51» для кошек и собак.
- Разработка технологии производства инактивированной антирабической сухой вакцины из штамма «Щелково-51» для крупного и мелкого рогатого скота.
-Оценка безвредности и иммуногенности разработанных инактивированных вакцин.
1.6. Апробация работы. Материалы диссертации доложены:
на заседаниях Ученого совета ВНИТИБП, Щелково, 1998-2010 гг.;
на Международной научно-практической конференции: «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными экзотическими и зооантропо-нозными болезнями животных», Покров, 2000 г.;
на Международной научно-практической конференции, посвященной 50-
летию ВНИИВВиМ, Покров, 2008 г.;
на Международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково, 1998,2000,2005,2007,2009 гг.
1.7. Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 1 работа в журнале, рекомендованном ВАК РФ для публикации материалов диссертаций. Получены 2 Патента РФ на изобретения.
1.8.Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 100 страницах машинописного текста и состоят из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы и данные о практическом использовании научных
выводов, список использованной литературы включает 133 источника, в том числе 89 отечественных и 44 зарубежных. Работа содержит 13 таблиц, 2 рисунка, 6 страниц приложений.
1.9. Личный вклад. Основная часть диссертационной работы выполнена автором самостоятельно. Отдельные опыты проведены с участием специалистов ФГУ «Щелковский биокомбинат» (Красуткин С.Н.), сотрудников отдела противовирусных препаратов ВНИТИБП (Пухова Н.М., Лебедько Е.И.), сотрудника ФГУ ВГНКИ (Елаков А.Л.) - за что автор выражает им искреннюю благодарность.
