Введение к работе
Актуальность проблемы. Важную роль я функционировании многих физиологических процессов в клетках организма игрштг внутриклеточные регуляторы. Препстявителпми ОТОГО класса ВРЩЄСТВ ЯВЛЯЮТСЯ простагландини (FG), физиологически активные производные полине-настенных жирных кислот. Эти соединения обледрют широким спектром биологической активности. Их роль ярко проявляется в регуляции иммуногенеза, репродуктивной, сердечно-сосудистой, нервно!! систем. Поэтому от концентрации простагландинов в большей степени зависит функционирование различных систем иизнеделтельгости организма. Регуляция уровня простагландинов осуществляется специальным м«хп-ниэмом контроля их синтеза d клетке. Активное участие в функционировании этого механизма должны принимать эндогенные регуляторы проствгландинсинтеэпрующей системы. На существо впние подобных регуляторов указывают вчуісі »t м ,. 1985; я*ваі et .-j , 1989;
Strickland et al , 1990. БЫЛО уСТОІГОВЛвНО, ЧТО В РМНИОТИЧРСКОИ
жидкости человека присутствуют два фактора, один из которых пктч-вирует, а другой ингибирует синтез проствглшш.инов. Три факторі, влияющие па синтез FGEg» FGPr> і PGIg найдены в пернтопллміоіі жидкости человека.
В настоящее время проводятся интенсивные исследования зндсгеч ных ингибиторов синтеза простаглендинов, которые найдены в смык различных жидкостях организма. Однако не вмясноьа их природа, механизм действия, неизвестно являются ли ингибиторы из разных ИСТОЧНИКОВ подобными по структуре, активности ч механизму их действия. Пока лишь для сыворотки крови установлено, что ос ингиби-торная активность связана с глнкопротемдом гвптоглебшюм, действие которого направлено на ключевой фермент полифермептной системы, ответственной за синтез простагландинов, простагландин II-сннтетазу (FGH-сшітстозу).
В связи с отим-изучение эндогенных ингибиторов синтезе прое-тпгландинов, механизма их действия представляет как трярстичрг--кий, так и практический интерес.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей роботи явилось выявление эндогенного ингибитора FGH-синтетозн в кістках везикулярних желез барана, установление его природы и механизма действия.
Для постижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
I. Выяснить присутствует ли в цитозоле клеток везикулярных
келен ouptv.n ингибитор скорастьлимитирущего фермента синтеза прсстагдвнциноз FCh'-синтетпзы и установить природу этого ингибитора.
К. НіілсіП'ть ипгнбирует ли і-нптоглаоин PGH-синтетааную и пер-с-кси^азиуп активности 4'ермента.
і. KeuiKiioiiRTU плияние гаптоглобина ни скорость PGH-синтетазной ь гс.ісчспдлз'йіі реакции в зависимости от концентрации и времени продиі;кус:вц-іи белка с PGH-синтетазой.
«і, Изучить кинетические характеристики ингибирования PGH-синте-тааы гяптоглобг.ном в аависвдюсти от концентрации субстратов: ара-;:?ідоноюй кислоты, рдренапина, перекиси водорода и кофактора гемина.
5. Исследовать соьместное влияние на PGH-скнтотаэу экзогенных і'йснипич, бруч'ін) и ендогенного (гаптоглобин) ингибиторов.
Научная новизна_. В работе впервые показано, что в цитозолв н-ет")ь незикулярных желез барана присутствует ингибитор ключевого 'JopMe.MT» сшиозн простагландине» PGH-синтетазы. Иигибирующая способность цитлз^ля связана и основном с гликопротеидом гаптоглобином. ;а .' chop шил) изучения кинетических характеристик установлено, .что :-::ігртикац»я: РСЧ-сиктетави гоптоглобином протекает обратимо, разви-"пртгя ю прицепи и мниси? от концентрации ингибитора в среде. ніікуо'уіо, что нііг'.ібируючіер действие гьптоглобина проявляется как в я;лноП ГО;-сиі поточной, так л лс-роксидазной реакции ферменте.
Тгорвткмесков и практическое значение работы. Работа имеет тео-pr-wwecKoe ішоченне для чсследозшшп по выяснению механизмов регу-чяц:;и синтеза простагландинов - биологических регуляторов широкого спритна д,г.1:огаия и. представляет интерес для специалистов, работавши/, р области энтюлигии, биологии клетки, физиологически активных соециненн)*. Результаты проведенных исследований дают представление п юзшжноу пути и механизм» ендогенного контроля концентрации-проетаглАндиміп посредством регуляции активности ключевого фермента биоентеза ртиу биорегуляторов - простагландин Н-синтетазы. По-іШмйнііє эдлекулярных механизмов рефляции ферментов синтеза простаг (шідіінов позволит нпЯ-ш аффективные пути регуляции действия простагландинов. Знание природы и механизма действия активаторов и ингибиторов ферментов мокет привести к открытия лекарственных препаратов, способных бороться с различными патологиями.
Апробация габоты. Результаты исследований докладывались на Всесоюзной конференции "Новые направления биотехнологии" (Москва, І9ВД), на республиканской научной конференции "Актуальные проблемы
физико-химической биологии и биотехнологии" (Алма-Ата, 1989), на конференции биохимиков Средней Лпии и Казахстана (Тшчкент, 1991), на ХУ международном биохимическом конгрессе (Израиль, І99І).
Публикации. Основные результати исследований опубликованы в О печатных работах, полный перечень которых приведен в конце автореферата.
Структура и объем работы. Диссертация изложено на ІІ4 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения, выводов. Работа содержит 21 рисунок, 3 таблицы. Список цитируемой литературы включает 162 публикации, из них зарубежных 122.
