Введение к работе
Актуальность темы: в настоящее время все чаше и чаще в лечении «безнадежных» онкологических больных, а также после облучения большими дозами радиации применяют или пересадку костного мозга, или вводят стволовые клетки. Этот метод в настоящее время получил термин «клеточная терапия». Однако, для получения и размножения стволовых клеток необходимы современные технологии и сложное, дорогостоящее тестирование. В связи с чем, пересадка костного мозга может обойтись значительно дешевле и быть более эффективной, так как вводятся не только стволовые клетки, но и вещества необходимые для роста этих клеток. Действие введенных клеток и веществ идет под воздействием, как местного регулирующего звена, так и всей вегетативной частью нервной и иммунной систем организма. Как известно, регуляция многих органов на месте происходит при помощи особых биоаминсодержащих структур, в состав которых входят многие компоненты, в том числе тучные и гранулярные люминесцирующие клетки (ГЛК) (Любовцева Л.А., 1993; Ермолаев В.В., 1997; Кирпичникова Е.А., 2004; Агафонкин С.А., 2006).
Исследование автономной, местной регуляции, с помощью биогенных аминов, в центральных и периферических органах иммунитета при подсадке костного мозга ранее никем не изучалось. При различных пересадках костного мозга, мы опосредованно изучали его действие на динамику иммунных процессов в периферическом иммунном и кроветворном органе - селезенке. Биогенные амины, находящиеся в селезенке, влияют на клеточное микроокружение и способствуют тому или иному направлению цитодифференцировки лимфоцитов.
В костном мозге, где происходит антигеннезависимая дифференцировка В-лимфоцитов, нейромедиаторы также являются трансмиттерами, и участвуют в дифференцировке клеток и их созревании. В связи с чем, имеется возможность определить действие трансплантата как собственного, так и чужеродного в виде костного мозга на аппарат местного саморегулирования селезенки.
Таким образом, мы попытались выяснить влияние разных пересадок костного мозга на динамику морфологических изменений белой и красной пульпы селезенки, и исследовать взаимодействие нейромедиаторов с помощью корреляционных связей между нейроаминами как в самих биоаминсодержащих структурах, так и между ними.
Цель и задачи исследования
Целью настоящего исследования является изучение на ранних сроках влияния ауто- и изогенной пересадки костного мозга на биоаминсодержащие структуры селезенки.
В связи с поставленной целью были определены задачи исследования:
1. Выявить локализацию нейромедиаторов в биоаминсодержащих структурах селезенки на ранних стадиях после ауто- и изогенной пересадки костного мозга.
2. Определить корреляционные взаимосвязи между нейромедиаторами в ГЛК периартериальной, мантийной, краевой зонах, центра размножения и красной пульпе, а также в тучных клетках у интактных и экспериментальных животных.
3. Сравнить корреляционную связь КА/КА; С/С; Г/Г между ГЛК/ГЛК и ГЛК/тучные клетки разных зон белой и красной пульпы селезенки через 30 и 60 мин после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.
4. Исследовать серотониновый индекс в ГЛК и тучных клетках селезенки в местах их нахождения у экспериментальных животных.
5. Изучить локализацию и степень сульфатации гепарина, как биоамининактивирующего вещества, на ранних сроках после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.
1. Впервые показано, что пересадка костного мозга, существенно влияет на распределение нейромедиаторов в самих биоаминсодержащих структурах селезенки, и оказывает значительное воздействие на корреляционные взаимосвязи между нейроаминами в содержащих их структурах.
2. Впервые выявлено, что разные виды пересадок костного мозга по-разному изменяют корреляционные взаимосвязи между биоаминсодержащими структурами красной и белой пульпы. Выявляются бласттрансформирующиеся (БТЛ) группы лимфоцитов, вокруг которых определяются биоаминсодержащие ГЛК.
3. Впервые исследован серотониновый индекс в биоаминсодержащих структурах отдельных зон белой и красной пульпы селезенки, который показывает включение разных нейромедиаторов адренергического звена вегетативной нервной системы через 30 и 60 мин после ауто- и изогенной трансплантации костного мозга.
4. Определено, что ауто- и изогенная трансплантация костного мозга по-разному влияет на степень сульфатации гепарина.
Научно-практическая значимость работы. Результаты исследования впервые показывают активность нейромедиаторов в биоаминсодержащих структурах селезенки при пересадке костного мозга. Разные пересадки костного мозга влияют на изменение корреляционных связей в аминосодержащих структурах красной и белой пульпы селезенки, и приводят к перераспределению в структурах гистамина, катехоламинов и серотонина, что, очевидно, изменяет регуляцию и направление цитодифференцировки лимфоцитов. Выявлено, что ведущим медиатором в биоаминсодержащих структурах селезенки является в первую очередь серотонин и только потом, гистамин. Показано, что бласттрансформация лимфоцитов происходит при активном участии биоаминсодержащих структур, нейроамины в которых образуют корреляционные связи с ГЛК и тучными клетками как белой, так и красной пульпе селезенки.
Полученные результаты используются в лекциях, читаемых на кафедре цитологии, эмбриологии, гистологии ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова».
Основные положения, выносимые на защиту
1. Между адренергическими нервными волокнами, тучными и гранулярными люминесцирующими клетками существуют тесные взаимосвязи. В селезенке крыс из биоаминсодержащих структур преобладают ГЛК.
2 Пересадка костного мозга, существенно влияет на перераспределение нейромедиаторов как в самих биоаминсодержащих структурах, так и оказывает значительное воздействие на корреляционную связь по нейроаминам между этими структурами в разных зонах селезенки.
3 Изопересадка костного мозга вызывает более глубокие изменения в перераспределении корреляционных связей, чем аутопересадка. Вызывает изменение формы мальпигиевых телец, появлению в большем числе БТЛ как в белой, так и в красной пульпе и активацию тромбоцитарного ростка.
4.Ведущим медиатором в изучаемых структурах является серотонин, после изопересадки ведущим медиатором становится НА
5. Ауто- и изопересадка костного мозга влияет на численность тучных клеток, их дегрануляцию и сульфатацию гепарина в них.
Апробация работы
Работа была доложена в 1999 г. на ХХХVII международной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс» в г. Новосибирске. В 1999г.на конференции в г. Екатеринбурге «Физика в биологии и медицине», на международной конференции по иммунологии в 2000 г. в г. Эйлат, Израиль; на международном конгрессе в 2002 г. по иммунореабилитации Cannes, France; на Всероссийском семинаре «Генетика продолжительности жизни и старения» в Сыктывкаре, 2008; на Всероссийской конференции с международным участием, посвященный 85-летию со дня рождения Д.С. Гордон в г. Чебоксары в 2008.
Объем работы. Диссертационный материал изложен на 119 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 170 источников, из них отечественных 130 и зарубежных 40. Диссертация, иллюстрирована 5 таблицами, 48 рисунками.
Публикации по теме диссертации. Основные положения диссертации отражены в 6
опубликованных статьях, 1 из которых является международной, 1 - центральной.
