Введение к работе
Актуальность темы. Анксиолитики занимают особое положение среди современных психотропных препаратов в связи с оригинальной и широкой фармакологической активностью и чрезвычайной распространенностью.
Препараты с анксиолитическим действием широко используются не только в психиатрии, но и в других областях медицины, в том числе амбулаторно здоровыми людьми при эпизодических психологических трудностях, в конфликтных и экстремальных ситуациях. Их применяют в психиатрии, неврологии, хирургии, акушерстве, клинике внутренних болезней, педиатрии, дерматологии и т.д. Анксиолитики (транквилизаторы) также применяются и при лечении алкоголизма. Однако при назначении с этой целью препаратов бензодиазепинового ряда, может возникнуть бензодиазепиновая зависимость, сменяющая алкогольную. Этот факт находит свое объяснение в вовлеченности ГАМК-А- бензодиазепинового рецепторного комплекса в механизме формирования алкогольной зависимости. Поэтому поиск новых лекарственных средств с анксиолитическим действием, не являющихся лигандами к данному рецепторному комплексу, достаточно актуален.
В НИИ Фармакологии РАМН был синтезирован новый лекарственный препарат пептидной структуры с анксиолитическим действием – ГБ-115. В ходе исследований была изучена фармакологическая активность нового препарата. Установлено, что ГБ-115 является антагонистом ССК-2 рецепторов, обладает свойствами селективного анксиолитика с принципиально новым механизмом действия – модулирующим влиянием на функциональную активность холецистокининовой системы. Препарат не обладает гипноседативным, миорелаксирующим и амнезирующим эффектами. Выявлена антиалкогольная активность ГБ-115 на стадии развившейся физической зависимости. Показано, что препарат не потенцирует действие этанола.
Для внедрения препарата в медицинскую практику, наряду с фармакологическими испытаниями, необходимо разработать методы контроля его качества и стандартизации, и на их основе – нормативную документацию на субстанцию и твердую дозированную лекарственную форму – таблетки дозировкой 1 мг.
Цель исследований. Целью настоящей работы являлось изучение физико-химических свойств, спектральных и хроматографических характеристик, разработка методик фармацевтического анализа и научно-обоснованных норм качества, а также создание нормативной документации на субстанцию и лекарственную форму ГБ-115.
Задачи исследований
изучить физические, химические и физико-химические свойства, определить фармакопейные показатели качества субстанции и лекарственной формы ГБ-115;
изучить спектральные характеристики образцов субстанции ГБ-115 методами УФ-, ИК-, ЯМР1Н-спектроскопии, оценить возможность использования этих методов для подтверждения структуры и идентификации субстанции и в лекарственной форме;
изучить хроматографическое поведение ГБ-115 и промежуточных продуктов его синтеза с помощью тонкослойной (ТСХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), разработать методики определения посторонних примесей в субстанции и лекарственной форме ГБ-115; определить содержание остаточных растворителей в субстанции с помощью газожидкостной хроматографии (ГЖХ);
разработать методики количественного определения ГБ-115 в субстанции и лекарственной форме;
изучить стабильность субстанции и лекарственной формы препарата в процессе хранения в естественных условиях и методом «ускоренного старения», а также под действием различных внешних факторов;
установить нормы качества субстанции и твердой дозированной лекарственной формы ГБ-115.
Научная новизна. Изучены физико-химические свойства нового оригинального анксиолитика ГБ-115, а также его спектральные характеристики с использованием методов УФ-, ИК-, ЯМР1Н-спектроскопии.
Исследована хроматографическая подвижность ГБ-115 и возможных примесей методом тонкослойной и высокоэффективной жидкостной хроматографии, выбраны оптимальные условия хроматографирования, позволяющие добиться разделения ГБ-115 и примесей.
Показано, что применение метода кислотно-основного титрования в неводных растворителях для количественного определения субстанции ГБ-115 затруднено. Удовлетворительных результатов удалось добиться при применении для количественного определения ГБ-115 в субстанции метода определения общего азота по Къельдалю.
Впервые изучена стабильность субстанции под действием солнечного света, 90% относительной влажности воздуха, окислителей, разбавленных растворов кислот и щелочей. Показано, что препарат устойчив к условиям повышенной влажности, а также к действию разбавленных растворов неорганических кислот, и неустойчив к действию солнечного света и разбавленных растворов щелочей.
Изучены физико-химические свойства, спектральные характеристики и хроматографическая подвижность твердой дозированной лекарственной формы ГБ-115, определены основные фармакопейные показатели ее качества.
Изучена стабильность субстанции и лекарственной формы ГБ-115 при хранении методом «ускоренного старения» и в естественных условиях, установлены их сроки годности.
Практическая значимость работы. Разработаны методики аналитического контроля субстанции и твердой дозированной лекарственной формы ГБ-115, установлены научно-обоснованные нормы качества. Разработанные методики внедрены в опытно-технологическом отделе НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН для анализа субстанции и твердой дозированной лекарственной формы ГБ-115.
Оформлены проекты ФСП на субстанцию и таблетки ГБ-115, 1 мг.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы были представлены на XVII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, апрель 2010) и на 5-ой Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, июнь 2010).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, из них 3 статьи в рецензируемых журналах, Перечня рекомендованного ВАК.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с плановой темой № гос. рег. 01.2.006.06602 «Экспериментальное изучение механизмов развития алкоголизма и наркоманий, разработка средств и методов рациональной фармакотерапии» НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН. Базой проведения исследований являлась аналитическая группа опытно-технологического отдела НИИ фармакологии РАМН.
Личный вклад автора. Экспериментальные исследования выполнены автором лично. Изучены физико-химические свойства, разработаны и валидированы методики фармацевтического анализа субстанции и лекарственной формы ГБ-115. Проведена статистическая обработка полученных результатов. Установлены научно обоснованные нормы качества изучаемого лекарственного препарата и разработаны проекты ФСП.
Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 2 и 3 паспорта специальности фармацевтическая химия, фармакогнозия.
Основные положения, выносимые на защиту:
Экспериментальное обоснование возможности использования физико-химических свойств и спектральных характеристик образцов субстанции и лекарственной формы ГБ-115 в контроле их качества;
Результаты хроматографического анализа ГБ-115 и вероятных технологических примесей в субстанции и лекарственной форме методом обращено-фазовой ВЭЖХ;
Экпериментальное обоснование выбора метода Къельдаля для количественного определения ГБ-115 в субстанции и методов УФ-СФМ и ВЭЖХ для количественного анализа таблеток ГБ-115;
Методики качественного и количественного анализа ГБ-115 в субстанции и лекарственной форме и их валидационные характеристики;
Оценка стабильности субстанции и лекарственной формы ГБ-115 под действием факторов окружающей среды, 90% относительной влажности воздуха, разбавленных растворов кислот и щелочей и результаты определения сроков годности методом «ускоренного старения» и при хранении в естественных условиях.
Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы «объекты и методы исследования», двух глав экспериментальных исследований, списка литературы и двух приложений. Работа изложена на 189 страницах машинописного текста, содержит 44 таблицы и 30 рисунков. Библиография включает 153 источника, из них 102 отечественных.
