Введение к работе
Актуальность темы
Хронические воспалительные и дегенеративные заболевания опорно-двигательного аппарата (ОДА), принося страдание людям и огромные экономические потери обществу во многих странах мира, являются одной из важнейших медико-социальных проблем. В России за последние 10 лет заболеваемость по этой группе патологий возросла более чем на 40 %. Ревматические заболевания даже без учета остеопоретических переломов -вторая (после респираторных болезней) причина временной нетрудоспособности и самая частая причина инвалидизации у лиц старше 65 лет. Широкая распространенность указанных расстройств обусловливает необходимость разработки новых эффективных средств их профилактики и лечения.
Все группы противовоспалительных средств, применяемых для лечения заболеваний ОДА считаются в той или иной степени эффективными средствами устранения симптомов воспалительной реакции и улучшения состояния больного. Однако их применение зачастую связано с развитием побочных эффектов, требующих либо снижения терапевтической дозы, либо полной отмены препарата и в ряде случаев приема дополнительных лекарственных средств.
В отличие от синтетических, препараты растительного происхождения обладают малой токсичностью и лучшей переносимостью, что позволяет гораздо шире использовать фитопрепараты для симптоматического, профилактического и продолжительного лечения, а также противорецидивной терапии хронических воспалительных заболеваний. Ассортимент растительных противовоспалительных лекарственных средств и биологически активных добавок к пище в настоящее время весьма ограничен.
В связи с этим поиск новых видов лекарственных растений с целью создания на их основе фитопрепаратов, предназначенных для профилактики и лечения заболеваний ОДА, является актуальной задачей. Перспективными в этом отношении представляется сабельник болотный Comarum palustre L. Применение в народной медицине сабельника болотного при ревматических заболеваниях, а также наличие достаточной сырьевой базы для промысловых заготовок сырья этого растения представляет особый интерес для фитохимического и фармакологического исследования.
Цель и задачи исследования
Целью настоящей работы является фитохимическое изучение подземной части сабельника болотного, разработка технологии получения сухого экстракта и их стандартизация.
Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие основные задачи:
- исследовать химический состав подземных органов сабельника болотного, провести наработку фракций отдельных групп биологически
активных веществ и индивидуальных соединений для биотестирования и фармакологического скрининга;
- разработать методики качественного и количественного определения
суммы полифенольных соединений и других критериев качества подземных
органов сабельника болотного; оформить технические условия (ТУ) на новый
вид лекарственного растительного сырья (ЛРС);
установить закономерности экстракции фенольных соединений и других экстрактивных веществ из указанного ЛРС; разработать технологическую схему получения сухого экстракта, позволяющую проводить максимальное извлечение БАВ, оформить лабораторный регламент;
с учетом масштабирования осуществить наработку сухого экстракта в условиях завода для фармакологического и токсикологического изучения; составить опытно-промышленный регламент;
исследовать химический состав, технологические свойства и разработать показатели качества для сабельника болотного сухого экстракта, разработать проект фармакопейной статьи предприятия (ФСП).
Научная новизна работы
Информационно-аналитическими исследованиями показана
необходимость разработки лекарственного средства, применяемого для лечения заболеваний ОДА.
На основании макро- и микроскопического анализа установлены значимые диагностические признаки сырья сабельника болотного.
Адаптированным методом ВЭЖХ с использованием достоверных образцов охарактеризован качественный состав полифенольного комплекса сабельника болотного.
Проведена идентификация моносахаридов после гидролиза полисахаридного комплекса с помощью хроматографии в тонком слое сорбента.
Дана количественная оценка содержания аминокислот и микроэлементов, установлен качественный состав жирных кислот в исходном сырье и сухом экстракте.
Избирательной экстракцией с последующей перекристаллизацией выделен (+)-катехин, который охарактеризован по данным УФ-, ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии, по температуре плавления и пробе смешения с аутентичным образцом.
Установлены закономерности извлечения экстрактивных веществ и полифенольных соединений из растительного сырья в зависимости от степени измельчения сырья, типа экстрагента, соотношения сырье-экстрагент, гидродинамических условий, позволяющих разработать способ получения сабельника болотного экстракта сухого. Проведено масштабирование процесса производства сухого экстракта в условиях реального производства.
Подобраны условия анализа полифенольных соединений в растительном сырье и сухом экстракте, которые позволили разработать сквозную методику стандартизации от сырья к лекарственному средству.
Приоритет научных исследований подтвержден оформлением заявки №2006127837 от 02.08.2006г на «Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и диуретической активностью».
Практическая значимость работы
На основании проведенных исследований разработаны и внедрены:
Технические условия ТУ 9377-158-04868244-2005 «Корневища с корнями сабельника болотного»;
Проект ФСП «Сабельника болотного экстракт сухой» (Акт внедрения методики количественного определения суммы полифенольных соединений в сабельника болотного экстракте сухом в ГУЗ «ЦСиККЛ ДЗ»);
Лабораторный регламент ЛР 04828244-50-05 и опытно-промышленный регламент ОПР 58171769-46-06 на производство сабельника болотного экстракта сухого (Акт внедрения на ЗАО «Фармцентр ВИЛАР);
- Заявка на патент № 2006127837 от 02.08.2006г «Способ получения
средства, обладающего противовоспалительной и диуретической активностью».
Основные положения, выносимые на защиту
результаты исследований по качественной и количественной оценки БАВ сабельника болотного и получаемого из него сухого экстракта;
результаты исследований по разработке технологии получения сухого экстракта, включая установление закономерности выхода БАВ в зависимости от степени измельчения сырья, вида экстрагента, соотношения сырье-экстрагент, гидродинамических условий;
- результаты исследований по установлению критериев подлинности и
норм содержания БАВ в сырье и сабельника болотного экстракте сухом,
обеспечивающих сквозную стандартизацию от источника к лекарственному
средству.
Апробация работы
Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на III Российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов» (Москва, 2005), Научно-практической конференции, посвященной 75-летию со дня рождения д.м.н БазаронаЭ.Г. (Улан-Удэ, 2006), XIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006), Международной конференции, посвященной 75-летию образования ВИЛАР (Москва, 2006), Всероссийской конференции с международным участием «Биоразнообразие экосистем внутренней Азии» (Улан-Удэ, 2006), региональной конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической промышленности» (Пятигорск, 2006)
Связь задач исследований с проблемным планом НИР
Работа выполнена по «Программе фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса РФ» на 2001-2005 и 2006-2010 гг.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, подана заявка на патент.
Объем и структура диссертации
