Введение к работе
Актуальность темы. В 1974 году был создан синтетический аналог природного аргинин вазопрессина – десмопрессин (1-деаино-8-D-агинин вазопрессин), специфический агонист рецепторов V2. Десмопрессин получен в результате изменений в строении молекулы вазопрессина-дезаминирование 1-цистеина и замещение 8-L-аргинина на 8-D-аргинин.
Важный шаг вперед был сделан, когда наблюдения за клиническим применением десмопрессина (синтетического аналога вазопрессина) доказали, что он увеличивает уровень фактора VIII и фактора Виллебранда у людей с нормальным содержанием их в плазме крови. В отличие от естественного антидиуретического гормона, применение десмопрессина приводило к незначительному сужению сосудов, слабому увеличению артериального давления; не приводило к спазмам матки или желудочно-кишечного тракта, поэтому препарат был допущен для клинического применения. Был сделан большой шаг вперед, когда десмопрессин стали использовать для предотвращения и купирования кровотечений, при удалении зубов, а затем и при остальных хирургических процедурах у людей.
В 1977 году десмопрессин был впервые применен для лечения больных гемофилией и болезнью Виллебранда, наиболее распространенных нарушений свертываемости крови (Kim R.J. et al., 2004). После клинических испытаний, выполненных в Италии, десмопрессин стал использоваться во многих других странах, и Всемирная организация здравоохранения включила этот препарат в список основных лекарственных средств для лечения данных заболеваний. Препарат, который мог повышать уровень фактора VIII и фактора Виллебранда (болезнь Виллебранда), не являясь препаратом крови, был особенно востребован в начале 1980-х, во время, когда вирус иммунодефицита человека стал передаваться через инфицированные факторы свертывания больными с врожденными нарушениями свертываемости.
Клинические показания быстро расширили применение десмопрессина среди пациентов, не имеющих гемофилии и болезни Виллебранда. Состав показал себя эффективным даже при кровотечениях по причине дисфункции фактора VIII или болезни Виллебранда, включая врожденные и приобретенные дефекты функций тромбоцитов и таких частых аномалий гемостаза, которые были связаны с хроническими заболеваниями почек и заболеваниями печени. Десмопрессин также использовался для профилактики кровотечений у больных, подвергающихся хирургическим воздействиям, обусловленными большой потерей крови и необходимым ее пополнением (Goudemand J., 2007).
В рамках проблемы эффективности и безопасности воспроизведенных лекарственных средств (ЛС) важное место отводится изучению их биодоступности и биоэквивалентности по сравнению с зарегистрированными в первую очередь оригинальными лекарственными препаратами (Кукес В.Г. с соавт., 2004, 2008).
В России был разработан отечественный генерический препарат десмопрессина Натива (Т) - препарат, который имеет фармацевтическую эквивалентность препарату Минирин (R). Разработка данного препарата соответствует провозглашенной Правительством РФ лекарственной политике, направленной на импортзамещение, что подтверждается фактом включения десмопрессина в список стратегически важных ЛС, производство которых должно быть налажено на территории РФ (Постановление Правительства РФ №1141-р от 6 июля 2010, подписано Председателем Правительства Российской Федерации В.Путиным). В соответствии с нормами Федерального закона №61-ФЗ от 12 апреля 2010 года «Об обращении лекарственных средств» , перед внедрением воспроизведенного препарата десмопрессина Натива должны быть проведены сравнительные биофармацевтические и фаркмакокинетические исследования, для чего необходимо провести изучение сравнительной кинетики растворения для изучаемых препаратов и разработать методику определения концентрации десмопрессина в биологических жидкостях.
Все выше изложенное определило цель и задачи настоящего исследования.
Целью настоящего исследования является разработка метода экстракции и количественного определения десмопрессина в плазме крови и сравнительное фармакокинетическое изучение препаратов, содержащих десмопрессин.
Задачи исследования:
-
Разработать методики хроматографического анализа (ТСХ и ВЭЖХ) десмопрессина в растворах.
-
Разработать методику количественного определения десмопрессина в плазме крови добровольцев.
-
Подобрать условия экстракции десмопрессина из плазмы крови.
-
Провести изучение высвобождения десмопрессина из лекарственных форм в условиях in vitro (по тесту кинетики растворения).
-
Провести сравнительное изучение фармакокинетики препаратов Минирин (Швеция) и Натива (Россия).
Научная новизна. Разработана методика количественного определения десмопрессина в лекарственной форме и в биологических жидкостях; впервые изучена клиническая фармакокинетика нового отечественного воспроизведенного препарата Натива; изучена кинетика высвобождения десмопрессина из твердых лекарственных форм.
Практическая значимость работы. Разработана методика, позволяющая с высокой точностью определять концентрации десмопрессина в плазме крови, обеспечивающая повышение контроля качества воспроизведенных лекарственных средств, содержащих десмопрессин.
В ходе исследований фармакокинетики добровольцев (пациенты) сопоставлены основные фармакокинетические параметры после однократного приема препаратов Натива и Минирин. Это позволило сделать заключение о фармакокинетической эквивалентности отечественного генерического препарата Натива оригинальному препарату Минирин и выпустить на отечественный фармацевтический рынок новый российский препарат, соответствующий мировым стандартам лечения.
Внедрение в практику. Результаты исследования используются в аналитической и клинической практике в Центре клинической фармакологии и в Филиале «Клиническая фармакология» НЦ БМТ РАМН, в педагогическом процессе на кафедре клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней ГБОУ ВПО «Первый МГМУ имени И.М. Сеченова» Минздравсоцразвития России.
Связь задач исследования с проблемным планом. Диссертационная работа выполнялась в соответствии с тематикой и в соответствии с научным направлением «Совершенствование образовательных технологий додипломного и последипломного медицинского и фармацевтического образования» (номер регистрации 01.2011.68237).
Апробация работы. Основные результаты работы доложены на научной конференции совместного заседания кафедры клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней лечебного факультета и кафедры фармацевтической и токсикологической химии фармацевтического факультета ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (Москва, 2011).
