Введение к работе
Актуальность.
Биологически активные соединения бактериальных клеток, а именно белки, пептиды, незаменимые аминокислоты, органические кислоты, и др. могут быть получены гидролитическими методами и часто использоваться как для парентерального питания, так и в медицинских целях.
Эубиотические препараты, для получения которых используют молочнокислые бактерии, находят широкое применение в медицине. Замечено, что использование этих бактерий в нативном состоянии часто малоэффективно из-за их инактивации под действием ферментов желудочного сока. Очевидно, и это показывает практика, что более целесообразно использование гидролизатов молочнокислых бактерий, поскольку они легче усваиваются и легче вовлекаются в биохимические процессы.
Иммуностимулирующие действие молочнокислых бактерий обусловлено продуктами расщепления их клеточной мембраны, содержащей пептидогликаны и тейхоевые кислоты. Именно это обстоятельство является обоснованием для их применения в медицинской практике.
Ряд лекарственных препаратов, используемых в качестве иммуномодуляторов, представляют собой лизаты различных микроорганизмов (ИРС-19, Имудон, Бронхо-мунал), производимые за рубежом. К сожалению, в нашей стране подобные препараты не производятся.
В настоящее время имеются публикации, посвященные разработке способов получения, методик анализа основных биологически активных веществ гидролизатов молочнокислых бактерий, а также стандартизация и первичная фармакологическая оценка лекарственного препарата на основе гидролизата бактерий Lactobacillus acidophilus.
Известно, что для закваски при производстве сыров и молочнокислых продуктов, чаще всего используются не индивидуальные штаммы, а их смеси. Например, при производстве мягких и рассольных сыров с низкой температурой второго нагревания используется поливидовая закваска БК-Углич-№4, представляющая собой концентрат включающий Lactococcus Lactis subsp. lactis, Lactococcus Lactis subsp. cremoris, Lactococcus Lactis subsp. diacetilactis, Leuconostoc lactis. Необходимо отметить, что указанная закваска выпускается отечественной микробиологической промышленностью и широко доступна.
В связи с этим актуальным является проведение исследований по разработке способов получения биологически активной субстанции на основе гидролизатов лактобактерий, а также изучение их качественного и количественного состава, а также стабильности.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является получение биологически активного гидролизата на основе поливидовой закваски БК-Углич №4 и исследование его химического состава, а также антиоксидантных и иммунологических свойств.
Для реализации поставленной цели предполагается решение следующих задач:
экспериментально изучить оптимальные условия гидролиза закваски БК-Углич-№4 ферментативным способом;
исследовать качественный и количественный состав компонентов гидролизата;
осуществить исследования с целью выявления влияния гидролизата на различные показатели иммунитета.
Научная новизна. Впервые для получения биологически активного гидролизата предлагается использовать мезофильную закваску БК-Углич-№4, представляющая собой сумму тест культур.
Выбраны оптимальные условия получения биологически активной субстанции путем ферментативного гидролиза поливидовой закваски БК-Углич-№4, позволяющего получить целевой продукт.
Методами химического и физико-химического анализа в гидролизате молочнокислых бактерий, входящих в состав закваски БК-Углич-№4, доказано наличие таких биологически активных веществ, как пептиды, аминокислоты, моносахариды, высшие жирные кислоты, макро- и микроэлементы.
Изучены качественное и количественное содержание свободных аминокислот, моносахаридов, а также макро- и микроэлементов, а также высших жирных кислот в гидролизате.
Установлена антиоксидантная активность гидролизата, что обусловлено в первую очередь наличием таких аминокислот, как глутаминовая кислота (0,94%), метионин (0,39%) и тирозин (0,29%).
Выявлено положительное влияние компонентов гидролизата поливидовой закваски БК-Углич-№4 на различные показатели иммунитета и установлено, что имеет место повышение фагоцитарной активности.
Практическая значимость работы. В результате химического и биохимического исследования доказана возможность и перспективность использования гидролизата мезофильной закваски БК-Углич-№4 в качестве биологически активного компонента для кисломолочных продуктов.
Разработан способ получения гидролизата ферментативным способом, заключающимся в том, что субстрат предварительно кипятят 30 минут, после чего охлаждают, добавляют фермент, инкубируют 6 часов, центрифугируют и получают целевой продукт. Определена его антиоксидантная и иммунотропная активность.
Внедрение в практику. По материалам диссертации составлено информационное письмо «Исследование по созданию биологически активных гидролизатов на основе культур молочнокислых бактерий», которое передано в ЗАО Тбилисский МСЗ для дальнейших совместных исследований.
Положения, выдвигаемые на защиту:
экспериментальные данные по разработке условий получения биологически активного гидролизата на основе поливидовой закваски БК-Углич-№4;
качественный и количественный состав биологически активных компонентов гидролизата;
результаты исследования антиоксидантной активности
материалы по предварительному изучению влияния гидролизата на иммунную систему.
Апробация и публикации результатов исследований.
Основные положения диссертационной работы изложены на
-
Ежегодных научных конференциях ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (Пятигорск 2009-2010 гг.).
-
1-ой межрегиональной конференции ГОУ ВПО Северо-Осетинская Мед Академия Росздрава «Актуальные проблемы фармации» (Владикавказ 2010г.)
По теме диссертации опубликовано 7 работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы (НИР) ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агентством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (номер государственной регистрации 01200805781).
Объем и структура диссертации.
Диссертационная работа изложена на 119 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 4 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 150 источников, в том числе 36 иностранных; содержит 40 таблиц, 10 рисунков и приложения.
![Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.].](/i/i/4243/375120.png "Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.]. Рыжов Виталий Михайлович")
