Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время социально и экономически важным направлением в современной фармации является расширение ассортимента безопасных и эффективных лекарственных средств (ЛС), обладающих тонизирующим и общеукрепляющим действием. В этом отношении особую ценность представляют препараты на основе лекарственных растений (ЛР), проявляющих адаптогенную активность. Подобное фармакологическое действие в наибольшей степени среди адаптогенных растений имеет лимонник китайский [Schizandra chinensis (Turcz.) Baill.]. Данный эффект растения обеспечивает группа фенилпропаноидов - лигнаны, обусловливающие также гепатопротекторные свойства его препаратов (Liu G., 1985; Ко KM. etc., 1995).
Несмотря на многолетний опыт изучения лимонника китайского, в нашей стране не разработан государственный стандартный образец (ГСО) схизандрина, что таким образом оставляет открытым вопрос стандартизации сырья и лекарственных препаратов (ЛП) данного растения. Так, на сегодняшний день в нормативной документации (НД) на лекарственное рас тительное сырье (ЛРС) - «Лимонника плоды» (ГФ СССР X изд., ФС 294) и «Лимонника семена» (ГФ СССР XI изд. ФС 80) отсутствуют разделы «Подлинность» и «Количественное определение», а анализ лекарственного препарата «Лимонника семян настойки» (ФС 42-1822-90) проводят по содержанию эфирного масла, сумме жирного и эфирного масел, лимонной кислоте, не являющихся ведущей группой биологически активных соединений (БАС) этого растения с точки зрения трактовки тонизирующего эффекта.
При решении этой проблемы необходимо учитывать и то обстоятельство, что методики качественного и количественного анализа должны со-
4 ответствовать принципу унификации в ряду: сырье - субстанция - лекарственная форма (Арзамасцев А.П. и др., 2000, Самылина И.А. и др., 1994).
Решение вопроса стандартизации новых ЛС заключается в разработке объективных и унифицированных методов анализа ЛРС и ЛП по ведущей группе БАС (Куркин В.А., 2002; 2007).
Таким образом, представляется актуальным дальнейшее фотохимическое исследование плодов и семян лимонника китайского в рамках разработки отечественного стандартного образца и современных подходов к химическому анализу ЛРС и ЛП на его основе, а также создание новых эффективных тонизирующих средств.
Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы является фармакогностическое исследование плодов и семян лимонника китайского и разработка объективных методов стандартизации сырья и лекарственных препаратов растения.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
Исследование анатомо-морфологических признаков плодов и семян лимонника китайского.
Сравнительное изучение химического состава сырья, субстанций и ЛП лимонника китайского.
Разработка новых подходов к стандартизации сырья и ЛП лимонника китайского с учетом принципа унификации методик в ряду ЛРС - субстанция - лекарственная форма.
Разработка методик качественного анализа плодов и семян лимонника с использованием стандартного образца у-схизандрина.
Разработка методик количественного анализа сырья лимонника китайского с использованием стандартного образца у-схизандрина.
6. Разработка методик качественного и количественного анализа ЛП
«Лимонника семян настойка», «Лимонника плодов настойка», «Лимонника сироп» с использованием стандартного образца у-схизандрина.
Оптимизация состава и технологии получения ЛП: «Лимонника семян настойка» и «Лимонника сироп».
Изучение в процессе хранения числовых показателей ЛП «Лимонника семян настойка» и «Лимонника сироп».
Разработка проектов НД на плоды и семена лимонника, ГСО у-схизандрин и ЛП «Лимонника плодов настойка», «Лимонника семян настойка», «Лимонника сироп».
Научная новизна. Впервые в Российской Федерации в результате изучения химического состава субстанции «С02-зкстракт плодов лимонника китайского (ООО «Роджер-Медика», г. Новосибирск, 000 «Экспро», г. Железногорск) выделены и идентифицированы 2 индивидуальных соединения - у-схизандрин и схизандрин, которые охарактеризованы как доминирующие лигнаны в этом растении. Установление структуры и изучение физико-химических свойств выделенных веществ проводилось с использованием УФ-, 'Н-ЯМР-спектроскопии в сочетании с традиционными методами химического анализа. Показана целесообразность проведения стандартизации сырья и препаратов лимонника китайского по ведущей группе БАС - лигнанам, и в частности, по содержанию у-схизандрина.
Обоснована необходимость использования ГСО у-схизандрина в методиках качественного и количественного анализа плодов и семян лимонника китайского и препаратах на его основе.
Разработаны методические и методологические подходы к стандартизации сырья и препаратов лимонника китайского, заключающиеся в оценке суммы лигнанов и суммы двух доминирующих лигнанов - у-схизандрина и схизандрина с использованием ТСХ, спектроскопии и ВЭЖХ.
Научно обоснована целесообразность оптимизации состава и технологии получения ЛС - «Лимонника семян настойки», обладающей более высокой тонизирующей активностью, чем промышленный образец, и «Лимонника сироп».
Впервые в Российской Федераций обнаружена антиоксидантная активность для у-схизандрина, в сравнительном плане - для субстанции «С02-экстракт лимонника» и настойки лимонника.
Практическая значимость. Выделены и охарактеризованы доминирующие лигнаны плодов и семян лимонника китайского: схизандрин и у-схизандрин (приоритетная справка № 2009103383 от 2.02.2009 г. на изобретение «Способ получения у-схизандрина»). Разработаны методики качественного и количественного анализа плодов и семян и ЛП лимонника китайского. Их подлинность основывается на определении у-схизандрина методами тонкослойной хроматографии (ТСХ), спектрофотометр и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методики количественного анализа ЛРС и ЛП лимонника базируются на определении содержания суммы лигнанов методом спектрофотометрии и суммы двух доминирующих лигнанов - схизандрина и у-схизандрина методом ВЭЖХ в пересчете на у-схизандрин. Унифицированы методики качественного и количественного анализа сырья и ЛС лимонника с использованием ТСХ-анализа, спектрофотометрии и ВЭЖХ. Разработаны показатели качества ЛП «Лимонника семян настойка», «Лимонника сироп», в том числе «Со-
7 держание суммы лигнанов», «Содержание суммы схизандрина и у
схизандрина», «Сухой остаток», «Концентрация спирта», также установлены сроки их годности. Оформлены проекты фармакопейных статей (ФС) «Лимонника плоды», «Лимонника семена», «у-схизандрин - стандартный образец», фармакопейной статьи предприятия (ФСП) ЛП «Лимонника семян настойка» (на его способ получения получено положительное решение от 7.04.2009 г.), «Лимонника сироп» для представления на экспертизу в Федеральную службу по надзору в сфере здравоохранения и социального развития Министерства здравоохранения и социального развития РФ. Результаты исследований используются в научных исследованиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии и кафедре химии фармацевтического факультета СамГМУ (акты внедрения от 25.12.2008 г.). Результаты микроскопических исследований включены в электронное учебно-методическое пособие «Атлас по ботанике», разработанное на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии СамГМУ.
Положения, выдвигаемые на защиту:
Результаты исследований по разработке подходов к стандартизации ЛРС и ЛП лимонника китайского.
Методики качественного и количественного анализа ЛРС «Лимонника плоды», «Лимонника семена» и ЛП «Лимонника семян настойка» и «Лимонника сироп» с использованием ГСО усхизандрина, ТСХ, спекгро-фотометрии и ВЭЖХ.
Результаты исследований по обоснованию показателей качества плодов и семян лимонника китайского, а также лекарственных средств «Лимонника настойка», «Лимонника сироп».
Способ получения у-схизандрина из субстанции «С02-экстракт лимонника».
Способ получения лекарственного средства «Лимонника настойка» (положительное решение на изобретение от 7.04.2009 г.).
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Самарского государственного медицинского университета (№ Государственной регистрации 01200105332) и Республиканских программ «Совершенствование лекарственного обеспечения населения и лечебно-профилактических учреждений в рыночных условиях» по теме: «Создание лекарственных средств природного происхождения антимикробного, адаптогенного и гепатопротекторного действия» (№ Государственной регистрации 01990005277) и «Разработка методик качественного и количественного анализа сырья и препаратов лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды и флавоноиды» (№ Государственной регистрации 01990007536).
Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Л.Н. Березнеговской «Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения» (Томск, 2006 г.); на X, XI и XII Всероссийских конгрессах "Экология и здоровье человека" (Самара, 2005-2007 гг.); на 62-й Межрегиональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2007 г.); на XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2007 г.); на III Всероссийской конференции
9 «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2007 г.).
Основное содержание диссертации опубликовано в 24 научных работах, из них 7 статей в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.
Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 176 страницах машинописного текста, содержит 32 таблицы, 49 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, 4-х глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований и их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 126 источников, из которых 53 - на иностранных языках.
![Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.].](/i/i/4243/375120.png "Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой [Silybum marianum (L.) Gaertn.]. Рыжов Виталий Михайлович")
![Фитохимическое изучение зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.) флоры Башкортостана и перспективы создания на его основе новых лекарственных средств [Электронный ресурс]](/i/i/4374/196937.png "Фитохимическое изучение зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.) флоры Башкортостана и перспективы создания на его основе новых лекарственных средств [Электронный ресурс] Файзуллина Рената Ринатовна")