Введение к работе
Актуальность темы. Грибковые поражения слизистой оболочки влагалища являются достаточно распространенным гинекологическим заболеванием. Несмотря на имеющийся арсенал противогрибковых препаратов число больных с этой патологией имеет тенденцию к росту. Поэтому поиск новых, более эффективных противогрибковых лекарственных средств ведется во многих странах.Одним из них является бутоконазола нитрат. Сведения, опубликованные в научной литературе, показывают, что бутоконазола нитрат превосходит по противогрибковой активности в отношении грибов рода Candida другие лекарственные средства. Однако в Российской Федерации препараты бутоконазола нитрата не производятся. На фармацевтическом рынке имеются два препарата зарубежного производства: Гинофорт и Гиназол (совместное производство США и Венгрии), один из которых (Гинофорт) зарегистрирован в России.
Для производства препарата на основе бутоконазола нитрата для гинекологической практики в нашей стране необходимо решение не только технологических вопросов, но и разработки надежных методов оценки качества. Полный набор критериев качества препарата помимо содержания основного вещества должен включать также оценку содержания вспомогательных веществ (консервантов), посторонних примесей, определение биодоступности, оценку специфической активности, а также сроков хранения (годности) препарата.
Известно, что использование сепарационных методов анализа (хроматографические, электрофоретические методы) позволяет эффективно решать вопросы стандартизации лекарственных препаратов сложного состава. Однако возможность их применения для анализа лекарственных форм бутоконазола нитрата в России не исследована. Изучение возможности применения химических и физико-химических методов анализа позволит разработать методики контроля качества нового лекарственного препарата, содержащего бутоконазола нитрат. Это в значительной степени будет способствовать его скорейшему внедрению в медицинскую практику.
Поэтому разработка методик анализа и оптимизация уже имеющихся, а также стандартизация нового лекарственного препарата бутоконазола нитрата, крема вагинального 20 мг/г, является актуальной задачей для фармации.
Цель и задачи исследования.
Целью настоящей работы является разработка аналитических методик для оценки качества лекарственного препарата на основе бутоконазола нитрата, его стандартизации, установления сроков годности, изучения фармакокинетических параметров.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Изучить возможность использования хроматографических методов для качественного и количественного анализа бутоконазола нитрата, нипагина и нипазола, входящих в состав изучаемого лекарственного препарата, а также оценки степени его чистоты.
Обосновать параметры пригодности системы для хроматографического разделения бутоконазола, нипагина и нипазола в лекарственном препарате «Бутоконазол, крем вагинальный, 20 мг/г»
Провести валидационную оценку предлагаемых методик контроля качества препарата по основным критериям: специфичность, линейность, прецизионность, точность, правильность, диапазон применения, робастность.
Определить робастность методики количественного определения бутоконазола нитрата и консервантов по изменениям показателей прецизионности и правильности в процессе рутинного анализа с использованием контрольных карт Шухарта. Установить контрольные границы среднего значения открываемости и размахов для данной методики.
Изучить возможность использования капиллярного электрофореза для качественного и количественного определения бутоконазола нитрата в биологических жидкостях. Провести сравнительную оценку фармакокинетических параметров, противогрибковой активности и мукоадгезивных свойств бутоконазола нитрата, крема вагинального, 20 мг/г и препарата–прототипа «Гинофорт».
Научная новизна.
Разработана методика качественного и количественного определения бутоконазола нитрата, нипагина и нипазола в креме при совместном присутствии. Показана зависимость коэффициентов разделения пиков бутоконазола и консервантов, а также коэффициентов их асимметрии от состава подвижной фазы. Разработана методика определения посторонних примесей в препарате методом ВЭЖХ. Проведеннная валидационная оценка методик показала приемлемость их применения для анализа готового продукта и его стандартизации.
Впервые для определения робастности предложенной методики анализа использованы контрольные карты Шухарта. Так же с их помощью выбран допустимый диапазон изменений состава элюента, внутри которого величины основных валидационных характеристик статистически не меняются.
Выбраны условия электрофоретического определения бутоконазола нитрата в биологических жидкостях с учетом его физико–химических свойств (низкая растворимость в водной среде как основания, так и его соли). С помощью метода капиллярного электрофореза (КЭФ) проведено сравнительное исследование фармакокинетических характеристик бутоконазола нитрата, при различных путях введения. Изучены мукоадгезивные свойства предлагаемого крема в сравнении с прототипом - Гинофортом.
Практическая значимость результатов исследования. Доказана возможность использования метода ВЭЖХ для параллельного количественного определения бутоконазола нитрата, нипагина и нипазола при совместном присутствии и из одной навески, а также определения посторонних примесей в препарате.
Предложена методика анализа с использованием КЭФ бутоконазола нитрата, которая может считаться альтернативной широко распространенному методу ВЭЖХ.
С помощью КЭФ исследована динамика накопления бутоконазола в плазме крови крыс при интравагинальном введении исследуемого крема на его основе в сравнении с Гинофортом, а также внутрибрюшинным введением раствора субстанции.
Проведено сравнение мукоадгезивных свойств кремов бутоконазола и Гинофорта. Установлено, что по всем изученным параметрам предлагаемый препарат сопоставим с Гинофортом.
Показана возможность использования контрольных карт Шухарта для оценки робастности методик анализа как во время их разработки, так и в процессе рутинного анализа.
Проведено изучение стабильности препарата бутоконазола. Установлено, что препарат сохраняет свою стабильность в течение трех лет при соблюдении условий хранения.
Внедрение результатов исследования в практику. Совместно с ЗАО «Валента Фармацевтика» разработан проект ФСП на Бутоконазол, крем вагинальный, 20 мг/г, передан на регистрацию в Министерство здравоохранения и социального развития РФ.
Апробация и публикация результатов исследования. Основные положения диссертационной работы доложены на региональных конференциях по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск, 2008 и 2009 гг.), а также на 65-й открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (г. Волгоград, 2007 г.). По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в т.ч. 2 - в журналах, рекомендуемых ВАК.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО Пятигорская ГФА Минздравсоцразвития России
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 158 странице печатного текста, содержит 43 таблицы и 42 рисунка, состоит из «Введения», «Обзора литературы» и 4-х глав собственных исследований, общих выводов, а также списка литературы, включающего 142 источника, в том числе 106 иностранных.
