Содержание к диссертации
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1 НАРУШЕНИЯ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА ПРИ 10
САХАРНОМ ДИАБЕТЕ И ИХ КОРРЕКЦИЯ
Нарушения углеводного обмена при сахарном диабете и их 10 коррекция средствами растительной природы
Флавоноиды кверцетин и его производные в 24 фармакотерапии
Кверцетин 24
Рутин 25
Дигидрокверцетин (капилар) 27 Заключение по главе 29
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 30
Характеристика объектов исследования. 30
Лабораторные животные и постановка экспериментов. 30
Постановка эксперимента на здоровых животных 30
Постановка эксперимента при аллоксановом сахарном диабете 31
Обоснование выбора доз исследуемых субстанций 36
2.3 Биохимические методы оценки метаболических изменений 37
Определение содержания глюкозы в сыворотке крови 37
Определение содержания гликогена в печени 37
Определение молочной кислоты в сыворотке крови 38
Определение содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке 38 крови
Определение содержания диеновых коньюгатов в гомогенате 38 печени и сыворотки крови
Определение общей антиоксидантной активности сыворотки 39 крови
Определение активности каталазы сыворотки крови 39
Определение содержания нуклеиновых кислот в печени 39
Определение содержания общего белка в печени 40
Определение активности лизоцима в сыворотке крови 40
Определение активности (3-лизинов в сыворотке крови 40
Определение бактерицидной активности сыворотки крови 40
Определение фагоцитарной активности нейтрофилов крови 41
Определение циркулирующих иммунных комплексов в 41 сыворотке крови
Определение активности аланинаминотрансферазы (АлАт) в 41 сыворотке крови
Определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) в 42 сыворотке крови
Определение содержания триглицеридов (ТРГ) в сыворотке 42 крови и печени
?
2.3.18 Определение содержания общего билирубина в сыворотке крови 42
2.4 Статистическая обработка результатов эксперимента 43
ГЛАВА 3 ИЗМЕНЕНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У 44 ИНТАКТНЬГХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ВВЕДЕНИИ КВЕРЦЕТИНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ
Заключение по главе 50
ГЛАВА 4 СРАВНИТЕЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ КВЕРЦЕТИНА И ЕГО 51 ПРОИЗВОДНЫХ НА ПОКАЗАТЕЛИ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА ПРИ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ
Изменения показателей углеводного обмена в крови и тканях 51 при аллоксановом диабете
Изменения показателей углеводного обмена при введении 54 кверцетина при аллоксановом диабете.
Изменения показателей углеводного обмена при введении 56 рутина при аллоксановом диабете
Изменения показателей углеводного обмена при введении 59 дигидрокверцетина при аллоксановом диабете
Заключение по главе 62
ГЛАВА 5 К МЕХАНИЗМУ ДЕЙСТВИЯ КВЕРЦЕТИНА И ЕГО 64 ПРОИЗВОДНЫХ У КРЫС С АЛЛОКСАНОВЫМ ДИАБЕТОМ
Влияние рутина на всасывание глюкозы в желудочно- 64 кишечном тракте и абсорбцию глюкозы мышечной тканью крыс
Анаболические процессы в тканях крыс с аллоксановым 66 диабетом под влиянием кверцетина и его производных
Изменение процессов пероксидации под влиянием 68 кверцетина и его производных у животных с аллоксановым диабетом
Заключение по главе 73
ГЛАВА 6 ВЛИЯНИЕ КВЕРЦЕТИНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ НА 74
ФАКТОРЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ (ЕСТЕСТВЕННОЙ)
РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ЗДОРОВЫХ ЖИВОТНЬГХ И ПРИ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ
Влияния рутина на факторы неспецифической 74 резистентности у здоровых животных
Изменения факторов неспецифической резистентности при 75 аллоксановом диабете
Изменения факторов неспецифической резистентности при 76 введении кверцетина при аллоксановом диабете
. 6.4 Изменения факторов неспецифической резистентности при 77 введении рутина при аллоксановом диабете
6.5 Изменения факторов неспецифической резистентности при 79
введении дигидрокверцетина при аллоксановом диабете
Заключение по главе 81
ГЛАВА 7 ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСА КВЕРЦЕТИНА С 83
ФОСФАТИДИЛХОЛИНОМ НА БИОХИМИЧЕСКИЕ
ПОКАЗАТЕЛИ И ФАКТОРЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ
РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ЗДОРОВЫХ ЖИВОТНЫХ И ЖИВОТНЫХ С АЛЛОКСАНОВЫМ ДИАБЕТОМ
Сравнительное влияние комплекса кверцетина с 83 фосфатидилхолином и кверцетина на показатели здоровых животных
Сравнительное влияние кверцетина и комплекса кверцетина 87 с фосфатидилхолином на показатели животных с аллоксановым диабетом
Изменения показателей углеводного обмена 87
Изменение биохимических показателей функционального 90 состояния печени
Изменения факторов неспецифической резистентности 93
Заключение по главе 96
ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ 97
ВЫВОДЫ 101
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 103
Введение к работе
В настоящее время ВОЗ определяет ситуацию с сахарным диабетом как эпидемию неинфекционного заболевания. В Российской федерации по данным ряда исследователей сахарным диабетом страдают около 6-8 млн. человек (4-5% населения). Сахарный диабет входит в число 10 главных причин смертности, при этом в 80% случаев смертность обусловлена осложнениями, тогда как от самого сахарного диабета (диабетической комы) погибают не более 1% пациентов (Балаболкин М.И. и соавт. 2007).
В последние годы возрос и имеет дальнейшую тенденцию к распространению удельный вес больных сахарным диабетом 1 типа, так как он может развиться в любом возрасте, однако главным образом поражает детей, подростков или людей моложе 40 лет.
Ключевым моментом в развитии сахарного диабета 1 типа является недостаток инсулина, гормона секретируемого Р-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы. Происходит это главным образом из-за разрушения более 90% (З-клеток под действием различных патогенных факторов (Смирнова О.М. и соавт. 2003), в том числе - окислительного стресса, сопровождающегося усилением свободнорадикального окисления в |3-клетках поджелудочной железы (Девов И.И и соавт. 1998; Прохоров А.В. и соавт. 2003).
Основным методом лечения больных диабетом I типа является инсулинотерапия и диета. Наряду с этим для терапии сахарного диабета и осложнений, возникающих из-за метаболических нарушений, используется довольно разнообразный арсенал препаратов, разнонаправлено действующий на клетки поджелудочной железы: производные сульфонилмочевины, бигуаниды, антиоксиданты и др. (Северина А.С, Шестакова М.В., 2004).
В значительной степени течение диабета, а также его профилактику можно
облегчить при использовании лекарственных средств нормализующих метаболизм
углеводов и общий метаболизм, связанный с функцией поджелудочной железы. Эти
вещества по своей природе не являются инсулиноподобными и не заменяют их в
процессах инсулинозависимого метаболизма. В то же время оказывают влияние на
функции клеток поджелудочной железы, содержание сахара и снижают
метаболические нарушения, связанные с недостатком сахара в клетках. Вместе с тем
остается актуальной задача поиска новых эффективных препаратов,
нормализующих строение, метаболизм, функции клеток поджелудочной железы и задерживающих развитие метаболического синдрома. К таким веществам следует отнести при родные соединения из группы флавоноидов. По литературным данным известно, что некоторые флавоноиды проявляют гипогликемическую активность, стимулируют выделение инсулина, тем самым способствуют проникновению глюкозы в клетки организма (Тюкавкина Н.А. и соавт. 1997; Яковлева Л.В. и соавт. 2001).
Однако до настоящего времени систематического и сравнительного изучения влияния флавоноидов на течение диабета не проводилось. Поэтому исследование влияния кверцетина и его производных является актуальной задачей фармацевтической науки.
Цель и задачи исследования
Цель работы: изучение при аллоксановом диабете гипогликемической активности и влияния на неспецифическую резистентность кверцетина и его производных (рутина, дигидрокверцетина и комплекса кверцетина с фосфатидилхолином).
Задачи исследования:
- установить степень восстановления толерантности к глюкозе у животных с аллоксановым диабетом под влиянием кверцетина и его производных;
установить степень восстановления уровня глюкозы в крови и гликогена в тканях печени и мышц у животных с аллоксановым диабетом под влиянием кверцетина и его производных;
установить степень нормализации гликолиза (по содержанию молочной кислоты и активности ЛДГ) у животных с экспериментальным диабетом под влиянием кверцетина и его производных;
- установить возможные механизмы корригирующего действия кверцетина и
его производных у животных с аллоксановым диабетом;
установить характер изменений гуморальных факторов естественной резистентности при развитии аллоксанового диабета и возможность их восстановления под влиянием кверцетина и его производных во взаимосвязи с изменением процессов метаболизма;
установить характер изменений клеточных факторов естественной резистентности при развитии аллоксанового диабета и возможность их восстановления под влиянием кверцетина и его производных во взаимосвязи с изменением процессов метаболизма
Научная новизна работы: Проведено сравнительное изучение кверцетина и его гликозида рутина, а также комплекса кверцетина с фосфатидилхолином, дигидрокверцетина и показано, что все лекарственные вещества оказывают влияние на углеводный обмен, уменьшают процессы перекисного окисления липидов и стимулируют клеточные факторы неспецифической резистентности. Установлено, что главная роль в фармакологической активности принадлежит агликону -кверцетину. Добавление фосфатидилхолина и углеводной части к кверцетину влияет на степень эффективности препарата.
При курсовом применении всех исследуемых нами веществ изменения метаболизма сочеталось с изменением неспецифической резистентности. Усиление, прежде всего анаболизма под влиянием исследуемых флавоноидов повлекло или способствовало восстановлению резистентности. Отмечалась нормализация клеточного звена факторов неспецифической резистентности, при отсутствии четких изменений со стороны гуморальных факторов. Отмечалось повышение резистентности и снижение аутоиммунных реакций организма наряду с нормализацией метаболизма.
У животных с экспериментальным диабетом было отмечено отчетливое
торможение показателей пероксидации и активация антиоксидантных реакций, что,
учитывая патогенез диабета, повышает перспективность использования
флавоноидных препаратов при диабете.
Результаты проведенных экспериментальных исследований дают основание рекомендовать использовать кверцетин, рутин, дигидрокверцетин и комплекс кверцетина с фосфатидилхолином в качестве дополнительных лечебных средств при сахарном диабете с пониженной продукцией инсулина, при этом более высокий эффект можно ожидать при использовании дигидрокверцетин, а использование комплекса кверцетина с фосфатидилхолином (лецитином) может оказать дополнительное гепатопротекторное действие.
Практическая значимость работы; Выявлено защитное действие кверцетина, рутина, дигидрокверцетина и комплекса кверцетина с фосфатидилхолином при токсическом поражении поджелудочной железы, дают основание использовать флавоноидные препараты, особенно в сочетании с фосфатидилхолином, в качестве дополнительных. средств в комплексной терапии сахарного диабета.
Внедрение результатов исследования. По результатам исследований, разработано информационное письмо «Изучение гипогликемической активности и факторов неспецифической резистентности у животных с аллоксановым диабетом при введении кверцетина и его производных», материалы которого будут использованы в НИР кафедры фармакологии Пятигорской ГФА и в ООО «Малое инновационное предприятие «Уником».
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук Диссертационная работа выполнена согласно плану научно-исследовательских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01.960.009193).
Положения, выдвигаемые на защиту;
Результаты исследований гипогликемической активности и влияния на факторы неспецифической резистентности кверцетина и его производных у здоровых животных и при аллоксановом диабете.
Некоторые стороны механизма действия кверцетина и его производных при аллоксановом диабете.
3. Результаты изучения сравнительного влияния кверцетина и комплекса кверцетина с фосфатидилхолином у здоровых животных и при аллоксановом диабете.
Апробация работы Основные фрагменты диссертационной работы изложены на 61-й, 62-й, 63-й научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2006, 2007, 2008 гг.).
Публикации. По материалам работы опубликовано 11 работ, в том числе в журналах рекомендуемых ВАК - 3.
Объем и структура диссертации: Диссертационная работа изложена на 123 страницах текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы (глава 1), главы материалы и методы, результатов и их обсуждения (3-7 главы), общего заключения, выводов, списка литературы, включающего 223 источников, в том числе 43 иностранных. Работа иллюстрирована 32 таблицами и 10 рисунками.
Похожие диссертации на Изучение гипогликемической активности и факторов неспецифической резистентности у животных с аллоксановым диабетом при введении кверцетина и его производных
![Изучение нейротропной активности производных пиразоло[C]пиридина и родственных соединений](/i/i/4375/171088.png "Изучение нейротропной активности производных пиразоло[C]пиридина и родственных соединений Мелетова Ольга Константиновна")
