Введение к работе
Актуальность проблемы
При повышении продукции андрогенов или изменении их баланса в сторону активных (свободных) фракций в крови у женщин наблюдаются признаки дефеминизации и даже маскулинизации. Нередко даже стертые формы гиперандрогении приводят к бесплодию, ановуляции, невынашиванию беременности у женщин. Немаловажной социальной и психологической проблемой для многих женщин становятся угревая сыпь, себорея и гирсутизм, возникающие при повышении свободной концентрации тестостерона и других андрогенов в крови. Для устранения симптомов андрогенизации применяются препараты, получившие название антиандрогенов благодаря их способности ограничивать синтез активных андрогенов и/или их эффект в органах-мишенях.
К таким препаратам относятся и некоторые комбинированные пероральные контрацептивы, способные угнетать секрецию андрогенов яичниками, конкурировать с андрогенами за связывание с рецепторами и увеличивать синтез глобулина, связывающего половые стероиды (ГСПС), который, в свою очередь, связывая тестостерон и другие андрогены, уменьшает их свободную фракцию в плазме белков плазмы. величина антиандроггенного эффекта комбинированных контрацептивов во многом определяется гестагенным компонентом, так как у применяемых в настоящее время гестагенов могут быть как андрогенные, так и антиандрогенные свойства. В связи с этим особый интерес представляет каждый новый внедряемый в клиническую практику гестагенный компонент комбинированного контрацептива в отношении его способности регулировать уровень андрогенов и реализацию их биологической активности у женщин, нуждающихся в контрацепции. Недавно в России появился новый комбинированный гормональный контрацептив дроспиренон/этинилэстрадиол (торговое название «Ярина»), обладающий целым рядом преимуществ, благодаря спектру фармакологической активности гестагенноого компонента. По своим гестагенным, антиандрогенным и антиминералокортикоидным свойствам дроспиренон - химическое производное спиронолактона, приближается к эндогенному прогестерону [Gher, 2004]. Однако отдельные аспекты молекулярных механизмов реализации гормональной активности дроспиренона остаются не изученными. В частности не выяснена роль геномных и негономных механизмов действия дропспиренона, что может играть большое значение во временном характере развития его антиандрогенных эффектов.
За последние 5-7 лет появились серии публикаций, описывающих быстрые экстрагеномные мембранотропные эффекты стероидов [Mendoza, 2003; Michel, 2004; Rana, 2005]. К ним можно отнести влияние прогестерона и тестостерона на уровень кальция, активность тирозинкиназы, фосфолипазы С в гаметах, негеномный эффект альдостерона на трансмембранный транспорт натрия в эпителиальных клетках почечных канальцев, ранние эффекты витамина Д3 на уровень кальция и цАМФ в клетках костной ткани. Получены также сведения об участии мембранных рецепторов эстрогенов и гестагенов в регуляции активности мембраносвязанных ферментов аденилатциклазы, протеинкиназы С, 5'-нуклеотидазы в норме и при опухолевом росте. Тем не менее, при исследовании механизмов фармакологического действия андрогенов и соединений, обладающих антиандрогенной активностью, сведения о существовании негеномных эффектов половых стероидов на клетки-мишени до последнего времени не учитывались.
Цель исследования: определение фармако-биохимических особенностей антиандрогенного действия комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол при лечении угревой болезни у женщин.
Задачи исследования:
-
Разработка тест-системы для оценки антиандрогенной активности половых стероидов с использованием лимфоцитов периферической крови.
-
Исследование эффективности применения комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиола при терапии угревой болезни у женщин.
-
Исследование влияния комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиола на показатели гормонального обмена (базальная концентрация гонадотропинов ФСГ и ЛГ, уровень тестостерона, содержание глобулина, связывающего половые стероиды) в крови женщин с явлениями гиперандрогении.
-
Определение относительного сродства дроспиренона в сравнении с другими гестагенами (прогестерон, ципротерона ацетат) к рецепторам андрогенов в лимфоцитах периферической крови женщин с симптомами гиперандрогении.
-
Сравнительная оценка влияния гестагенов и соединений, обладающих доказанной гестагенной активность, на содержание вторичных мессенджеров (ионов Ca2+ и цАМФ) в лимфоцитах периферической крови женщин с явлениями андрогенизации.
Научная новизна. На лимфоцитах периферической крови женщин с гиперандрогенией впервые выявлено,
что дроспиренон наряду с классическим геномным действием, оказывает прямые эффекты на клетки-мишени, опосредованные изменением ионной проницаемости плазматической мембраны.
Впервые установлено, что в зависимости от степени выраженности сродства к внутриклеточным рецепторам андрогенов в лимфоцитах изученные соединения располагаются в ряду: ципротерона ацетат > дроспиренон > прогестерон > АБМП.
Выявленная закономерность отражает вероятность развития геномного действия стероидов. Впервые показано, что негеномное действие дроспиренона в терапевтической области концентраций определяется блокадой Са-каналов плазматических мембран лимфоцитов.
Практическая значимость работы. Установлена выраженная клиническая эффективность препарата дроспиренон/этинилэстрадиола у женщин с угревой болезнью и выявлены особенности его антиандрогенного эффекта.
Предложена тест-система для скрининга и изучения молекулярных механизмов экстрагеномного мембранотропного действия андрогенов и новых соединений, обладающих антиандрогенной активностью.
Расшифровка молекулярных и клеточных механизмов антиандрогенного действия современного комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол будет способствовать рациональному применению существующих средств, а также поиску и созданию новых высокоэффективных и безопасных гормональных препаратов.
Основные положения, выносимые на защиту.
Установлена выраженная антиандрогенная активность препарата дроспиренон/этинилэстрадиол у женщин с угревой болезнью.
При изучении биохимических механизмов реализации антиандрогенного действия данной комбинации выявлена важная роль гестагенного компонента – дроспиренона, который по конкурентному механизму ингибирует специфическое связывание андрогенов с их цитозольными рецепторами, регулирующими активность генов и определяющих андрогенный фенотип.
По своим признакам влияние дроспиренона на [Са2+]цит относится к специфическим мембранотропным эффектам стероидов. Признаками негеномного действия дроспиренона являются: быстрое развитие в пределах 10 мин; микромолярный диапазон эффективных концентраций; обратимость; отменяются антагонистами стероидов мембранного типа действия и не чувствительны к антагонистам внутриклеточных рецепторов стероидов.
Внедрение. Результаты настоящего исследования используются в учебной работе кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии РГМУ г.Москвы.
Апробация диссертации. Основные положения диссертации доложены на XII Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики, лечения и реабилитации больных», октябрь 2006 г., Пенза; на совместной научной конференции кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии РГМУ и ПНИЛ молекулярной фармакологии РГМУ.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендованных «Перечнем» ВАК Рособрнадзора РФ.
Объем и структура диссертации: диссертация изложена на ____ страницах машинописи, иллюстрирована ____ рисунками, содержит ___ таблиц, состоит из введения, 3 основных глав, выводов, практических рекомендаций. Библиографический указатель включает ___ отечественных и ____ зарубежных источника.
