Введение к работе
- З -
Актуальность проблемы. Важным направлением в науке о боли являются исследования роли белково-пептидных систем в механизмах боли и обезболивания, которые стали бурно развиваться с зередины 70-х годов, благодаря открытию опиоидных рецепторов и їх эндогенных лигандов - опиоидных пептидов ( Майский А.И. с зоавт, 1982; Машковский М.Д., 1978, 1994; Игнатов Ю.Д., 1984, L989; Булаев В.М., Раевский К.С., 1982; Закусов В.В. с соавт., 1982; Харкевич Д.А., 1989; Утешев B.C., Коростелев С.А., 1990; їснецов В.В., Пашков B.C., 1993 и мн. др.). Впоследствии было юказано участие и других семейств регуляторних пептидов (та-сикининов, нейротензинов, холецистокининов (ХЦК), гипоталами-іеских либеринов и статинов, меланокортинов, бомбезинов, анти-)тензинов и др.) в регуляции болевой чувствительности (Калюж-!ЫЙ Л.В., 1984, 1990; Лимаяский Ю.П., 1986, 1989; Братин Е.О., 1991; Vaught, 1988; Poole е.а., 1992 и мн. др.).
Наиболее детально в указанном аспекте исследована эндо-еяная опиоидная система, активные метаболиты которой образуйся из трех белков предшественников: проопиомеланокортина, гроэнкефалина А и проэнкефалина В, содержащих 260-265 амино-жслотных остатков и имеющих молекулярную массу около 30 кД [Ашмарин И.П., Каменская М. А., 1988; Ollate.a., 1989). Боль-инство исследованных эндогенных опиоидных субстанций обладают іналгетической активностью, вместе с тем вещества с гилералге-ической активностью обнаружены среди различных групп регулярных пептидов. К ним прежде всего относятся пептиды, облада-іщие антиопиоидными свойствами: фрагмент бета-эндорфина (1-27) Suh Н.Н. е.a., 1988b), С-концевой трипептид последовательнос-и 7-9 окситоцина - Pro-Leu-Gly-NH2 (MIF-1) и Tyr-MIF-1 Kavaliers М., 1987), ХЦК-8 (Wlesenfeld-Hallln е. а., 1987) и р. Имеются также данные о наличии гипералгетической активнос-и у субстанции Р (Matsumara Н. е.а., 1985), миелопептидов Яновский О.Г. с соавт., 1989, 1990), ряда цитокинов (Захарова :.А., Петров Р.В., 1990; Ferrelra S.H. е.а., 1988; Cunha е.а., 991) и др. Вместе с тем показано, что в условиях болевого оздействия в сыворотке крови происходит изменение содержания яда неизвестных веществ белково-пептидной природы (Drysdale .С. е.а., 1986). Также имеются данные об облегчающем влиянии
~ 4 -
неизвестных гуморальных факторов на устойчивые разряды лолимо-дальных нощщепторрв (Ни Zhl-Cheng е.а., 1990).
Следовательно, наряду с хорошо изученными белково-пептид-ными системами с аналгетической и гиперадгетической активностью в крови млекопитающих присутствуют и другие вещества белково-пептидной природы, участвующие в регуляции боли. Таким образом, детальное изучение в указанном аспекте новых белко-во-пептидных фракций, выделенных из сыворотки крови млекопитающих, и их активных метаболитов позволит существенно расширить современные представления о белково-пептидных механизмах регуляции боли, что может явиться фундаментом нового подхода к эффективному лекарственному обезболиванию.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось изучение характера и механизмов влияния белково-пептидных фракций сыворотки крови человека и млекопитающих на болевую чувствительность.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
-
Выявить наиболее активные в отношении влияния на болевую чувствительность белково-пептидные фракции сыворотки крови различных видов животных и человека.
-
Исследовать влияние на болевую чувствительность отдельных компонентов наиболее активной фракции.
-
Оценить характер взаимодействия суммарных фракций и их наиболее активных компонентов с эндогенными и экзогенными опиатами и опиоидами.
-
Исследовать механизмы гипер- и аналгетического действия белково-пептидных фракций,
Научная новизна исследования состоит в том, что впервые получены данные о наличии гипералгетических свойств у белково-пептидных фракций сыворотки крови человека и животных, и выявлена наиболее активная - белково-пептидная фракция сыворотки крови гренладского тюленя (ФБ-Т). При этом обнаружено, что в ее составе присутствуют вещества как с гипер-, так и аналгетической активностью. Эффекты последних, как и суммарной фракции, зависят от активности ферментных систем, интибирова-ше которых полностью устраняет или существенно ослабляет вли-
яние этих веществ на болевую чувствительность. Выявлено, что $В-Т обладает способностью предупреждать и устранять болеутоляющие действие морфина (производное фенантрена) и знкефалинов и, напротив, усиливает обезболивающий эффект промедола и фен-танила (производные пипередина). ФВ-Т и ее субфракции обладают выраженным центральным действием, что проявляется в изменениях амплитуды компонентов ноцицептивных вызванных потенциалов в структурах ноци- и антиноцицептивной систем и связывания меченых лигандов со специфическими рецепторами головного мозга. В основе аналитической активностью субфракции ЗЖ-Т лежит ее способность взаимодействовать с мю-опиоиднми и бенводиа8епино-выми рецепторами.
Практическая ценность работ. Настоящая работа относится к числу фундаментальных исследований. Результаты этого исследования могут лечь в основу новых фармакологических подходов к регуляции боли. Основное прикладное значение состоит в том, что исследованные белково-пептидные фракции в отличие от известных пептидов могут быть выделены из сыворотки крови различных млекопитающих в-промшленннхмаштабах.
Апробация работы. Результаты работы и основные положения диссертации доложены и обсуждены на I конференции Российской Ассоциации по изучению боли "Патофизиология и фармакология боли (экспериментальные и клинические аспекты)" (Москва, 1993 г.), Всеросийской конференции "Актуальные вопросы экспериментальной и клинической фармакологии" (Смоленск, 1994 г.), на совместном заседании лаборатории 0-054 ИМЕН и отдела фармакологии НПЦ "Гидробиос" (1994 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ.
Структура и объем работы. Диссертация написана на русском языке, состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, трех глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста и документирована 22 таблицами, 1 рисунком. Список литературы содержит 47 названий работ отечественных и 184 зарубежных авторов.
