Введение к работе
' \
Актуальность темы. Переход растениеводства л период интенсивно--грув.озделнвания сельскохозяйственных культур стал в большинстве "страТГШра очевидным. Это повлекло за собой применение високих доз фунгицидов и удобрений, часто не сбалансированных в сеязи с требованием данной культуры в определенном регионе. А как следствие - возрастание вредоносного значения патогенов, а из числа возбудите- лей болезней - грибов рода Fusarlum . Основним возбудителем фуза-риозного увядания томатов /Lycopersicon eaoulentum Tourn. / является гриб Fuaaxlum ' охузрогша /Schlect./f. lyoopersloi /Sacc Snyd. et Hans / , о фузариозной инфекции томатов в литературе имеется много сведений /Пугачева, 1982; Власова, 1988/.
Увядание резко снижает урожай и качество продукции. Существую-щие методы борьбы с этой болезнью мало эффективны, более перспективно - выделение устойчивых сортов и гибридов. Районированные в СССР и Индии сорта и гибриды сильно поражаются фузариозом и устойчивого материала в коллекции сортов Индии также мало. Нет перспективных для селекции доноров,- поэтому исследователи все чаще обращаются к методам биотехнологии. Вачшре значение в создании новых сортов растенийзанимает метод клеточной селекции.
Цель и задачи исследований. Цель работы - иммунологическое обоснование повышения степени устойчивости перспективных сортов томатов к возбудители фузаршзного вилта - У. о:хуврог\ш f. lycopereioi.
Для осуществления этого нами были поставлены следующие задачи:
определение и выделение агрессивных, вирулентных клонов гриба;
использование и сравнение разных методических подходов для ранней оценки устойчивости у сортообразцов томата;
отбор питательных сред и сортов томатов^ для селекции in vitro ;
оптимизация сред для разных генотипов /сортов томатов/;
создание селективного фона для отбора устойчивых каллусов и определения влияния культуральных фильтратов и фузариевой кислоты возбудителей вилта в качестве селективного агента; в том числе, влияние ингибитора трипсина на развитие каллусов; ]
разработка ускоренного метода определения степени устойчивости каллусов, отобранных на селективном фоне, и оценка каллусов по устойчивости к F.oxysporum f. lycopersioi.
Научная норизна. Показана приемлемость методологических подходов БИЗР для изучения гетерогенности лопуляции возбудителя фузари-
озного вилга томатов и выделена наиболее агрессивные и вирулентные клоны. Установлена достоверность ускоренных методов диагностики для ранжировки сортов по устойчивости. Показана возможность повышения фузариозоустойчивости томатов методом клеточной селекции, где. доказана важная роль культурального фильтрата F.oxyaporum f. lyoo-регзісі в качестве селективного агента и изучены ингибиторы ферментов /трипсина/ в культуральной жидаооти гриба и их .роль в процессе селекции томатов in vitro . Составлена формула для определения интенсивности каллусогенеза в разработан метод для ускоренной диагностики устойчивости в стадиях каллусов и регенерантов на основании биохимического анализа устойчивости.
Практическая ценность. Показана целесообразность применения биохимических методов для определения и отбора агрессивных и вирулентных клонов, в поиске и создании селективного фона для селекции томатов in vitro . Получена сыворотка к белкам культуральной жид--кости и мицелию гриба. Установлено сходство между_шхзммами и клонами гриба и хозяином /томат/ на уровне"белок к белку". '
Ускоренные методы диагностики, в, частности, активизация синтеза фенольних соединений, как отеєг да заражение патогена у сортов томатов, способствует экспресс-диагностике устойчивости.
Разработана схема селекции томатов is'vitro на устойчивость ' к фузариозному вилту. Оптимизированные питательные среды для каллусогенеза и прямой регенерации у 5 сортов томата, которые могут ис-. пользоваться для микроклональногоразмножения. Возможно использовать формулу для определения продуктивности каллусов и ускоренный , метод диагностики ступени устойчивости каллусов.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы до
ложены на заседаниях кафедры фитопатологии ЛГАУ'/Ленинград, 1989,
1990, 1991/; на Всесоюзной конференции молодых ученых /Ленинград,
1990/; Всесоюзной конференции молодых ученых /Одесса,-1990/; IX.
Всесоюзном совещании /Шнек, 1991/; Международном симпозиуме и
школе /unesco/ "Биотехнологии и генной инженерии"/Киев, 1990/;
24-ои Международном конгрессе - "Овощеводств.о и цветоводство" /Ита-
'лия, 1990/; Международной конференции по "Технологии семян и семе
новодство" /Индия, 1990/; Международном конгрессе по биотехнологии
/Швейцария, 1991/ и В-м Международном конгрессе по протопластам.
/Швеция, 1991/.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано
6 работ и 3 работы находятся в печати. .. . '
Объем и структура диссертации. Работа состоит из введения,
4-х глав экспериментальной частя, вьшодов, практических рекоменда
ций. Содержит страниц машинописного текста, в том числе
таблиц и рисунков. Список использованной литературы включает
