Введение к работе
Актуальность темы. Среди вредоносных болезней томатов важное место занимает ранняя сухая пятнистость, возбудитель которой гриб ' Alteraarla. aolani (»11 et r.art) Junes et «row "or. способен К эпифитотийному развитию. В условиях эпифитотии болезнь может снижать урожай на 20-40%.
Один из способов защиты томатов от этого заболевания - получение устойчивых сортов. Генетический контроль и характер наследования признака устойчивости к альтернариозу' у томатов изучены недостаточно. Международных линий-дифференциаторов рас возбудителя альтернариоза томатов нет. В работах последнего десятилетия преобладает мнение о полигенном контроле и расонеспецифичности устойчивости томатов к альтернариозу.
Наряду с традиционной селекцией томатов на устойчивость к альтернариозу, определенные перспективы имеют методы биотехнологии. Решающую роль при отборе клеток, несущих мутации устойчивости к болезни играет селективный.фактор. В связи с тем, что специфичных к хозяину токсинов у А.чоїапі cor. до настоящего времени не обнаружено, поиск-селективного- фактора.для клеточной селекции на устойчивость.к альтернариозу представляет определенные трудности. Иавестно, что гриб продуцирует несколько фитотоксичных экзометаболитов. Работ по выяснению роли фитотокоинов в развитии' альтернариоза и возможности получения устойчивых к токсинам линий томатов с использованием методов культуры клеток не проводилось.
Цель и задачи исследований. Целью нашей работы явилось изучение способности гриба iitornarla noiani зог.продуцировать фитоток-. сичные. метаболиты в зависимости от условий культивирования и воз- можности использования этих фитотокоинов в клеточной селекции ТОг. матов на устойчивость к ранней сухой пятнистости. . В задачи исследований входило: "
'- сравнить-морфолого-культуралыше характеристики различных штаммов а.зоїапі . на различных типах питательных сред; .
. - изучить качественный состав экзометаболитов гриба А.вбіапі при росте на различных питагельных средах;- г, ' ...
определить фитотоксичнбеть'метаболитов гриба A.aolani продуцируемых в питательные среды;
разработать метода определения и определить количество некоторых фитотокоинов гриба; , .
-2-.
выявить б экстрактах или" культуральных фильтратах селективный фактор, пригодный.дня клеточной селекции томатов на устойчивость к альтернариозу*, ' -.
разработать методы получения максимального количества расте-ний-регенерантов в присутствии селективного фактора;
получить растения-регенеранты томатов и установит* возмож- ность получения у. них семенного потомстваRi ; .
предложить схему клеточной селекции томатов на устойчивость к альтернариозу.
Научная новизна работы. Из культуральных фильтратов гриба х.зоіасі выделены и идентифицированы метаболиты, фитотоксичные для проростков, ингибирующие рост каллусов и органогенез у томат тов. Разработаны методы.препаративного выделения альтерсолано-лов А и В, макросцорина, цинниола и других фитотоксинов из куль- турадьных фильтратов,- с помощью жидкостной хроматографии высокого давления изучена зависимость образования альтерсоланола' А от условий культивирования гриба. Определена активность'ферментов по- ; лифенолоксидазы и хинонредуктазы в мицелии гриба. На основе полученных 'экспериментальных данных высказано предположение о том, . что обнаруженные'в культуральных фильтратах гриба .л.воіапі . антрахиноновые пигменты с различным количеством фенольних земес-тителей в молекуле и разной степенью окисленности-восотановленнос-. ти способны восстанавливаться до фенолов и окисляться до хинонов ферментативный путем, а также иеферментативно-с участием радика- . . лов кислорода и НАДН. Обладая антиокисдительными овойствами, эти-соединения смещают конкурентные отношения свободно радикального и ферментативного окисления в пользу ферментативного, тем самым регулируя количество свободных радикалов-и рост клеток. При.зараже- нии растений томатов Патогенами функционирование регуляторной буферной системы.гриба поддерживается за счет восстановителей растительной клетки, что снижает ее'энергетический, потенциал. Впервые поликетидные фитотоксиньг гриба . jL.eoiftni использованы для кле--' точной селекции- томатов на устойчивость ,к альтернариозу.
Практическая ценность работы..Разработаны методы препаративного- -выделения фитотоксинов гриба ж.воіапі из культуральных фильтратов. Выделенные фитотоксины могут быть использованы при совершенствовании методов клеточной селекции томатов на устойчивость к альтернариозу. Разработаны селективные среды, позволяющие отбит-' : рать мутации устойчивости к.фитотокоинам гриба A.soiaui при со- хранении высокой регекерационной способности эксплантов томатов.
Публикации. ІІо материалам диссертационной работы написаны 2 статьи, которые находятся и печати.
Структура и объем диссертации. Диссертация представлена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, пяти глав, выводов, списка литературы, содержит 24 таблицы и К рисунков. Список литературы включает 155 работ, из них 50 на русском и 105 на иностранных языках.
