Введение к работе
Актуальность проблемы. Широкая распространенность заболевания почек, и в частности хронического гломерулонефрита, закономерным исходом которого является развитие хронической почечной недостаточности, ведет к поиску методик диагностики заболеваний почек (Mason, 1994; Wardle E.N., 1996; Hotta О., 1998; Nangaku М., 2005; Salama A.D., 2005; Caudy A.A., 2007). Несмотря на понимание многих аспектов патогенеза гломерулонефрита, многие клинические и патогенетические моменты остаются нерешенными. Первые работы по изучению роли иммунокомпетентных клеток в развитии патологии почек стали появляться в конце восьмидесятых годов, и носили экспериментальных характер (Lin Ching-Yuang et al, 1989).
Доказано что, иммунокомпетентные клетки обеспечивают как регуляцию гуморального иммунитета, так и являются эффекторами клеточного ответа, следовательно, от их функционального состояния зависит продукция цитокинов, антител, функциональная активность эффекторного (цитотоксического) звена клеточного иммунитета (Cockwell Р., 1999; Xiao Н., 2002; Wu J., 2002). Современные положения предполагают участие не только активированных цитотоксиче-ских субпопуляций лимфоцитов, но и других субпопуляций лимфоцитов в развитии хронических поражений почек иммунной природы (Bohle А., 1996; Huang X.R., 1997; Nikolic-Paterson D.J., 1997; Li S., 1998; Tipping P.G., 2006). Рассматривая гломерулонефриты как имму-новоспалительное заболевание, представляет интерес изучить не только количественные показатели клеточного иммунитета, а, прежде всего экспрессию активационных и эффекторных маркеров, маркеров ранней и поздней активации, маркеров регуляторных клеток (Sakat-sumi М., 2001; Wang Y., 2001; Reynolds J., 2002; Wolf D., 2005; Yates J., 2008; Glassock R.J., 2009). Важным является сопоставление клинических данных, оценки морфологических изменений и характеристики основных популяций и субпопуляций лимфоцитов периферической крови с оценкой их активности.
Цель исследования: выявить характер изменения экспрессии ведущих активационных и эффекторных маркеров лимфоцитов периферической крови больных мезангиопролиферативным гломерулонефритом с анализом их соответствия клинической и морфологической картинам заболевания.
Задачи исследования:
-
Выявить выраженность изменения содержания ведущих лимфоцитарных субпопуляций у больных с различными по тяжести формами гломерулонефрита.
-
Оценить в исследуемых группах больных характер изменения уровня Т лимфоцитов с регуляторной активностью как фактора, подавляющего развитие аутоиммунных заболеваний.
-
Проанализировать наличие взаимосвязи между уровнем активации CD4+ клеток эффекторов, а также степенью активации Т-лимфоцитарных субпопуляций и тяжестью изучаемой патологии.
-
Оценить возможность участия обнаруженных фенотипиче-ских субпопуляционных лимфоцитарных сдвигов в патогенезе хронических форм мезангиопролиферативного гломерулонефрита
Научная новизна.
-
Впервые на одних группах больных с морфологической характеристикой степени тяжести поражения почек проведен анализ результатов исследования расширенной панели фенотипической характеристики популяционного-субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови больных с различными формами мезангипро-лиферативного гломерулонефрита.
-
Впервые Т-лимфоцитопения, определяющая выраженность лимфопении, у больных мезангиопролиферативным гломерулонефритом, была охарактеризована по соотношению CD3+4+ и CD3+8+ субпопуляций Т-лимфоцитов с последующей оценкой степени выраженности их активации по CD69+ и HLADR+ маркерам.
-
Впервые проанализировано состояние субпопуляции основных Т-клеток регуляторов аутоиммунных процессов (CD4+25 '+) у больных с различными формами мезангиопролиферативного гломерулонефрита.
-
Нами впервые доказано изменение дифференцировки наивных CD4+ Т-лимфоцитов с изменением соотношения Th регуля-торные /Th эффекторные субпопуляции CD4+ Т-лимфоцитов.
Личный вклад автора заключается в выполнении всех этапов диссертационной работы: постановке цели и задач исследований, разработке программы и методики их выполнения, изучении и анализе литературы, сборе и обработке фактического материала, формулировании научных положений и выводов.
Практическая значимость.
1. Оценка популяционно-субпопуляционного лимфоцитарно-
го фенотипа у больных мезангиопролиферативным гломерулонефритом позволит судить о возможной тяжести течения нефрита.
2. Снижение субпопуляции Т-регуляторных клеток у больных с мезангиопролиферативным нефритом может свидетельствовать о неблагоприятном течении процесса с развитием нефротического синдрома.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Т-лимфоцитопения является основой прогрессирующей лимфопении у больных мезангиопролиферативным гломерулонефритом (с преимущественным снижением уровня CD4+ Т-лимфоцитар-ной субпопуляции) по мере нарастания тяжести заболевания.
-
На фоне Т-лимфоцитопении по мере увеличения тяжести заболевания возрастала фракция активированных Т клеток.
-
Характер изменения уровня Т-лимфоцитов с регуляторной активностью (CD4+25+hl) в исследуемой группе больных отображает тяжесть поражения почек.
-
Нарушение дифференцировки CD4+ наивных клеток с увеличением процента образования Т-лимфоцитов с эффекторной активностью было типичным для исследуемой патологии и усиливалось с нарастанием тяжести заболевания.
-
Выраженность популяционно-субпопуляцинных изменений лимфоцитарного фенотипа у больных мезангиопролиферативным гломерулонефритом сочеталась как с тяжестью поражения, так и со степенью лимфоцитарной инфильтрации почек.
Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на: научно-практической конференции «Лабораторная Медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года» (Москва, 2010); научно-практической конференции молодых ученых Приволжского федерального округа с международным участием (Казань, 2010); на VIII Российской конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010); совместном заседании кафедры клинической лабораторной диагностики, кафедры урологии и нефрологии ГБОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации и кафедры патологической физиологии ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (Казань, 2011).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 научных
работ, в том числе 5 научных статей, опубликованных в ведущих научных журналах, определенных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 154 страницах машинописного текста, содержит 25 таблиц, рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, Зх глав собственных результатов, обсуждения полученных данных и заключения, выводов, практических рекомендаций. Список использованной литературы включает 20 публикаций отечественных авторов, и 150 публикаций зарубежных авторов.
