Электронная библиотека диссертаций и авторефератов России
dslib.net
Библиотека диссертаций
Навигация
Каталог диссертаций России
Англоязычные диссертации
Диссертации бесплатно
Предстоящие защиты
Рецензии на автореферат
Отчисления авторам
Мой кабинет
Заказы: забрать, оплатить
Мой личный счет
Мой профиль
Мой авторский профиль
Подписки на рассылки



расширенный поиск

Изучение механизма действия простагландинов конкурентных групп (простагландина Е2 и простагландина F2a) на течение артериальной гипертонии и регуляцию сердечно-сосудистой системы (клинико-эксперимента Рунихин, Александр Юрьевич

Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья

Автореферат - бесплатно, доставка 10 минут, круглосуточно, без выходных и праздников

Рунихин, Александр Юрьевич. Изучение механизма действия простагландинов конкурентных групп (простагландина Е2 и простагландина F2a) на течение артериальной гипертонии и регуляцию сердечно-сосудистой системы (клинико-эксперимента : диссертация ... доктора медицинских наук : 14.03.03 / Рунихин Александр Юрьевич; [Место защиты: ГОУВПО "Российский государственный медицинский университет"].- Москва, 2011.- 338 с.: ил.

Введение к работе

Актуальность проблемы. Артериальная гипертония (АГ) является ведущим фактором, увеличивающим распространённость болезней системы кровообращения. Это связано с высокой частотой встречаемости АГ (у 39,5% жителей России) [Чазова И.Е. и соавт., 2010], а также тем, что АГ повышает риск возникновения и ускоряет прогрессирование атеросклероза, метаболического синдрома, сахарного диабета 2 типа [Гогин Е.Е., 2010, Кобалава Ж.Д. и соавт., 2008, Оганов Р.Г. и соавт., 2007]. Таким образом, государственное значение борьбы с АГ не подлежит сомнению.

Внедрение Федеральной программы «Профилактика и лечение артериальной гипертонии в РФ» повысило эффективность лечения АГ и снизило риск возникновения ишемического инсульта [Ощепкова Е.В., 2007]. Тем не менее, частота атеротромботических осложнений АГ пока остаётся высокой [Оганов Р.Г. и соавт., 2007, Ощепкова Е.В., 2009, Чазов Е.И., 2008]. В целом это свидетельствует о недостаточно эффективном лечении АГ [Оганов Р.Г., 2008].

Отдельной проблемой является резистентность некоторых пациентов с АГ к комбинированной гипотензивной терапии, состоящей из 3-4 основных антигипертензивных препаратов с различным механизмом действия. В разных странах у 11%-19% больных АГ формируется рефрактерная форма системной гипертензии [Calholm D.A., 2004, Chobanian A.V. et al., 2003, Mancia G. et al., 2007]. Проблема рефрактерности пациентов с АГ к проводимому лечению является актуальной. Об этом свидетельствует расширение арсенала препаратов, предназначенных для контроля АД. В дополнение к основным антигипертензивным препаратам в последние годы созданы прямые ингибиторы ренина, блокаторы эндотелиновых рецепторов, ингибиторы фосфодиэстеразы, разработаны новые инструментальные подходы к лечению АГ (электроимпульсная стимуляция блуждающего нерва) [Чазова И.Е. и соавт., 2008]. Разработаны методы лечения рефрактерной и злокачественной АГ (ЗАГ) с использованием простагландина Е2 (ПГЕ2) [Арабидзе Г.Г. и соавт., 1997, Джусипов А.К. и соавт., 1991, Некрасова А.А. и соавт., 1986]. ПГЕ2 обладает выраженным гипотензивным эффектом и большим спектром дополнительных качеств – антиоксидантными свойствами, антиагрегационным действием, благоприятным влиянием на эндокринную функцию почек, антипролиферативным воздействием на гладкомышечные клетки (ГМК) сосудов [Алфёров А.В. и соавт., 2004, Kern M.J., 2008].

Несмотря на накопленный позитивный опыт применения ПГЕ2 у больных гипертонической болезнью (ГБ), механизмы антигипертензивного действия и механизмы его благоприятного влияния на течение АГ во многом остаются невыясненными. В предшествующих клинических исследованиях не удалось раскрыть механизм устойчивого гипотензивного действия ПГЕ2, что связано с проведением инфузий ПГЕ2 на фоне комбинированного лечения 3-4 антигипертензивными препаратами. Сопутствующая терапия не позволила оценить механизм действия ПГЕ2 и отличить его эффект от действия других препаратов. Уточнить многие аспекты механизма действия ПГЕ2 позволяют экспериментальные исследования, так как они дают возможность применить ПГЕ2 без фоновой терапии другими препаратами.

Не до конца изучены эффекты действия естественного физиологического антагониста ПГЕ2, которым является простагландин F2 (ПГF2). Более полное понимание механизмов действия ПГF2 при АГ необходимо в связи с тем, что одним из путей влияния ПГЕ2 на систему кровообращения является нейтрализация кардиоваскулярных эффектов эндогенного ПГF2. Оценить влияние прессорного ПГF2 на течение первичной АГ можно только на спонтанно гипертензивных животных.

Для понимания механизма действия ПГЕ2 на клеточном уровне необходимо оценить влияние этого простагландина на функцию тромбоцитов и 2-адренорецептор-зависимый аденилатциклазный комплекс (2-АРЗАЦ) клеток. 2-АРЗАЦ является универсальной эффекторной системой практически всех клеток организма; на него воздействует большинство биологически активных веществ.

Разносторонняя оценка физиологических эффектов простагландинов конкурентных групп (Е и F) и изучение нарушений биосинтеза этих простагландинов при АГ позволит осветить потенциальную роль эндогенных ПГЕ2 и ПГF2 в патогенезе системной гипертензии. Это также является актуальной задачей, так как многие аспекты патогенеза АГ остаются недостаточно изученными.

Цель исследования: раскрыть механизмы действия простагландина Е2 и простагландина F2 на состояние сердечно-сосудистой системы, изучить влияние этих простагландинов на течение артериальной гипертонии у человека и лабораторных животных, оценить значение нарушений биосинтеза эндогенных простагландинов в патогенезе артериальной гипертонии.

Задачи исследования:

  1. Изучить влияние простагландина Е2 (ПГЕ2) на показатели системной и внутрисердечной гемодинамики у нормотензивных животных (уровень системного АД, сократительную способность миокарда левого желудочка и функцию диастолического расслабления сердечной мышцы). Исследовать механизмы влияния ПГЕ2 на холинергическую регуляцию сердечной деятельности.

  2. Изучить влияние курса пролонгированных внутривенных инфузий ПГЕ2 на течение артериальной гипертонии (АГ) у спонтанно гипертензивных крыс на основе динамической оценки уровня АД в течение 15 недель и морфологического состояния органов-мишеней (сердца, почек, головного мозга) через 2,5 недели после курсового применения ПГЕ2.

  3. Оценить влияние курса пролонгированных внутривенных инфузий ПГЕ2 на эндокринную функцию почек (экскрецию эндогенных ПГЕ2 и ПГF2), а также на выраженность депрессорного и прессорного компонентов барорефлекторной регуляции АД у спонтанно гипертензивных крыс.

  4. Оценить гемодинамический эффект ПГЕ2 у нормотензивных крыс и спонтанно гипертензивных крыс при внутриаортальном болюсном введении этого простагландина в возрастающих дозах.

  5. Изучить влияние курса пролонгированных внутривенных инфузий простагландина F2 (ПГF2) на течение АГ у спонтанно гипертензивных крыс на основе динамической оценки уровня АД в течение 15 недель и морфологического состояния органов-мишеней (сердца, почек, головного мозга) через 2,5 недели после курсового применения ПГF2.

  6. Оценить влияние курса пролонгированных внутривенных инфузий ПГF2 на эндокринную функцию почек (экскрецию эндогенных ПГЕ2 и ПГF2), а также на выраженность депрессорного и прессорного компонентов барорефлекторной регуляции АД у спонтанно гипертензивных крыс.

  7. Создать экспериментальную модель злокачественной формы течения спонтанной АГ при помощи проведения курса пролонгированных внутривенных инфузий ПГF2 крысам с наследственно обусловленной АГ (спонтанно гипертензивным крысам линии Окамото-Аоки).

  8. Оценить гемодинамический эффект ПГЕ2 у пациентов с АГ при внутриаортальном болюсном введении этого простагландина в возрастающих дозах.

  9. Изучить механизм устойчивого (пролонгированного) антигипертензивного действия курса внутривенных инфузий ПГЕ2 на клеточном уровне путём оценки влияния этих инфузий на состояние 2-адренорецептор-зависимого аденилатциклазного комплекса лимфоцитов у пациентов с тяжёлым течением гипертонической болезни.

  10. Исследовать способность тромбоцитов к агрегации и её изменение после курса внутривенных инфузий ПГЕ2 у больных с тяжёлым течением гипертонической болезни.

  11. Оценить суточную экскрецию с мочой ПГЕ2 и ПГF2 при доброкачественной и злокачественной формах течения АГ у больных гипертонической болезнью и паренхиматозными заболеваниями почек.

Научная новизна

    1. Выявлен новый механизм регуляции кардиогемодинамики и системного АД простагландином Е2 – он осуществляется посредством активации С-афферентных волокон вагуса и стимуляции бульбарного парасимпатического центра, что приводит к изменению вагосимпатического баланса в пользу усиления холинергических влияний на сердечно-сосудистую систему.

    2. Эксперименты на спонтанно гипертензивных крысах позволили впервые установить, что при генетически обусловленной АГ курс в/в пролонгированных инфузий ПГЕ2 приводит к снижению системного АД на 10-12,5%, которое сохраняется не менее 15 недель; оно не связано с влиянием других антигипертензивных средств и сопровождается стойким улучшением кровоснабжения почек, головного мозга и миокарда.

    3. Впервые установлено, что у пациентов ГБ чувствительность артериального сосудистого русла к ПГЕ2 выше, чем у нормотензивных крыс линии Вистар-Киото и спонтанно гипертензивных крыс линии Окамото-Аоки. Этот факт подтверждают достоверно более низкая пороговая доза ПГЕ2 у больных ГБ и преобладание у них дозо-зависимого снижения АД в ответ на введение ПГЕ2 в аорту в возрастающих дозах. У нормотензивных и гипертензивных крыс преобладала тахифилаксическая реакция АД на внутриаортальное введение ПГЕ2 в возрастающих дозах.

    4. У больных со злокачественной АГ по сравнению со здоровыми людьми выявлено 8-кратное увеличение способности тромбоцитов к агрегации, индуцированной 0,1 мкМ АДФ; под влиянием курса инфузий ПГЕ2 этот показатель уменьшился в 5 раз.

    5. Впервые установлено, что курс в/в пролонгированных инфузий ПГF2 (по сравнению с инфузиями физиологического раствора) вызывает ускорение в 1,3-2 раза темпов прогрессирования генетически обусловленной гипертензии у крыс, что приводит к повышению системного АД на 11,4% через 15 недель после завершения инфузий ПГF2 и сопровождается ишемией жизненно важных органов, формированием артериолонекроза, возникновением острых нарушений мозгового кровообращения и инфарктов сердечной мышцы.

    Практическая значимость

    Проведённое клинико-экспериментальное диссертационное исследование имеет практическое значение как для осуществления экспериментальных научных работ, так и для выполнения клинико-диагностической работы с пациентами, страдающими АГ. Впервые в экспериментальной практике разработаны метод пролонгированного инфузионного введения растворов ПГЕ2 и ПГF2 в венозное русло мелких животных (крыс), а также оригинальный метод регистрации системного АД в хронических опытах с помощью светооптического способа. Эти методы могут быть использованы для экспериментальной апробации новых лекарственных средств, которые требуют длительного инфузионного введения в сосудистое русло.

    По результатам диссертации разработан новый способ моделирования злокачественной АГ (ЗАГ), защищённый патентом на изобретение № 2266572. Для создания модели ЗАГ спонтанно гипертензивным крысам линии Окамото-Аоки проводят курс в/в пролонгированных инфузий ПГF2. Созданная новая лабораторная модель ЗАГ может быть использована для экспериментальной разработки новых терапевтических подходов к лечению такой АГ.

    У пациентов с АГ 3 степени выявлены лабораторные критерии, свидетельствующие о высоком риске трансформации доброкачественной АГ в ЗАГ. У таких пациентов повышается суточная экскреция с мочой ПГF2, а соотношение ПГF2 и ПГЕ2 (коэффициент F/E) в моче увеличивается более 2,3.

    Нами установлен факт неоднородности больных ГБ, протекающей с рефрактерной АГ. У 73% этих пациентов имеется снижение чувствительности 2-АРЗАЦ лимфоцитов к действию катехоламинов, а курс инфузий ПГЕ2 восстанавливает нормальную чувствительность 2-АРЗАЦ клеток, что приводит к преодолению рефрактерности больных к лечению (коррегируемая рефрактерная АГ). У 27% больных исходное состояние 2-АРЗАЦ лимфоцитов было нормальным, а курс инфузий ПГЕ2 не оказывал устойчивого влияния на уровень АД и состояние 2-АРЗАЦ клеток (некоррегируемая рефрактерная АГ). Способ диагностики некоррегируемой рефрактерной АГ защищён авторским свидетельством на изобретение № 1678368. Идентификация больных с некоррегируемой рефрактерной АГ необходима для проведения этим пациентам инструментальных методов лечения гипертензии (гемосорбция, плазмаферез, имплантация прибора для стимуляции блуждающего нерва и др.) [Арабидзе Г.Г. и соавт., 1997].

    Выполненные нами экспериментальные и клинические исследования позволяют расширить показания к применению курса в/в инфузий ПГЕ2 при АГ. Применение ПГЕ2 ранее было разрешено Фармакологическим комитетом СССР для лечения ГБ, рефрактерной к другим видам терапии (постановление от 12.06.87 г., протокол №12). Нами получены данные о способности курса инфузий ПГЕ2 снижать риск формирования ЗАГ и нормализовать функциональную активность тромбоцитов. Исходя из этого, можно рекомендовать применение курса в/в инфузий ПГЕ2 не только при рефрактерной АГ, но также для лечения пациентов с высоким риском трансформации доброкачественной АГ в ЗАГ и применять инфузии ПГЕ2 не только для снижения АД, но и для подавления агрегации тромбоцитов. Использование ПГЕ2 в качестве антитромботического средства может оказаться особенно востребованным у пациентов с неудовлетворительным эффектом антигипертензивных препаратов, так как в этом случае назначение аспирина (эталонного антиагреганта) противопоказано. Целесообразность применения курса в/в инфузий ПГЕ2 для лечения пациентов с различными вариантами течения АГ закреплена патентом на изобретение «Способ лечения артериальной гипертонии» (патент на изобретение РФ №2418592 от 20.05.2011).

    Основные положения, выносимые на защиту

    1. ПГЕ2 усиливает холинергический ответ на стимулы, активирующие парасимпатические реакции сердечно-сосудистой системы у кошек: внутрисердечно вводимый ПГЕ2 потенцирует эффекты, наблюдаемые при электрической стимуляции блуждающего нерва, и повышает функциональную активность немиелинизированных волокон этого нерва.

    2. По данным гистологического исследования курс в/в пролонгированных инфузий ПГЕ2 вызывает у спонтанно гипертензивных крыс стойкую дилатацию почечных, церебральных и коронарных резистивных артерий, которая выявлена через 2,5 недели после завершения инфузий ПГЕ2 и приводит к формированию устойчивого гипотензивного эффекта.

    3. Одним из механизмов пролонгированного сосудорасширяющего и гипотензивного действия курса в/в инфузий ПГЕ2 является 10-кратное увеличение чувствительности клеточных 2-адренорецепторов к действию катехоламинов и повышение в 2,9 раза способности внутриклеточной аденилатциклазы к активации под влиянием катехоламинов и других стимуляторов.

    4. По данным гистологического исследования курс в/в пролонгированных инфузий ПГF2 вызывает у спонтанно гипертензивных крыс стойкое спастическое сокращение почечных, церебральных и коронарных резистивных артерий, которое выявлено через 2,5 недели после завершения инфузий ПГF2 и приводит к быстрому прогрессированию АГ.

    5. Одной из причин формирования злокачественной АГ у человека является дисбаланс биосинтеза эндогенных простагландинов, который проявляется в виде уменьшения продукции ПГЕ2, увеличения образования ПГF2 и резкого повышения величины соотношения ПГF2 и ПГЕ2 в суточной моче – коэффициент F/E увеличивается выше 2,3.

    6. Механизм влияния курса в/в инфузий ПГЕ2 на течение первичной АГ обусловлен как стойким гипотензивным действием, так и некоторыми плейотропными эффектами ПГЕ2. Благоприятное влияние курса в/в инфузий ПГЕ2 на течение АГ реализуется с участием следующих механизмов его действия: стойкой вазодилатации; изменения баланса эндогенных почечных простагландинов в пользу преобладания ПГЕ2 над ПГF2; оптимизации барорефлекторной регуляции АД; усиления холинергических влияний на сердечно-сосудистую систему; ресенситизации 2-АРЗАЦ клеток; нормализации способности тромбоцитов к агрегации; улучшения кровоснабжения жизненно важных органов (почек, головного мозга, сердечной мышцы).

    Внедрение результатов работы

    Сконструированные и созданные в процессе выполнения диссертации прибор для определения уровня системного АД у мелких лабораторных животных (крыс, мышей) в хронических опытах и оригинальное устройство для селективной и тотальной термоблокады А- и С-афферентных волокон блуждающего нерва применяются для проведения экспериментальных исследований в отделе экспериментальной хирургии НИИ фундаментальных и прикладных биомедицинских исследований, а также на кафедрах нормальной физиологии и фундаментальной и прикладной физиологии МБФ ГОУ ВПО РГМУ Минздравсоцразвития РФ.

    Разработанная новая экспериментальная модель злокачественной АГ (патент РФ №2266572 от 20.12.2005) используется в экспериментальных исследованиях, проводимых в отделе экспериментальной хирургии НИИ фундаментальных и прикладных биомедицинских исследований ГОУ ВПО РГМУ Минздравсоцразвития РФ.

    Готовится к внедрению в клиническую практику недавно разработанный новый способ лечения АГ с использованием ПГЕ2 (патент РФ № 2418592 от 20.05.2011).

    Основные положения диссертационной работы используются в педагогической практике и научно-исследовательской работе кафедры фундаментальной и прикладной физиологии МБФ, кафедры нормальной физиологии и кафедры патологической физиологии лечебного факультета ГОУ ВПО РГМУ Минздравсоцразвития РФ.

    Апробация диссертации

    Основные положения и результаты исследований изложены в центральной печати и в материалах 16 Международных и национальных Российских форумов, конференций и симпозиумов: на конгрессе международного общества патофизиологов (Москва, 1991), XIII научной конференции международного общества по артериальной гипертонии (Монреаль, 1990), XI Международном конгрессе кардиологов (Манила, 1990), V конгрессе по артериальной гипертонии (Женева, 1991), I конгрессе ассоциации кардиологов стран СНГ (Москва, 1997), Дальневосточном конгрессе «Человек и лекарство» (Владивосток, 2006), а также на научно-практических конференциях и симпозиумах, проводившихся в Иркутске, Уфе, Оренбурге, Новосибирске, Воронеже, Самаре, Томске (1994-2008 г.г.) и на совместных научных конференциях отдела артериальной гипертонии НИИ кардиологии им. А.Л. Мясникова, отдела физиологии МФЛК, кафедры патологической физиологии ГОУ ВПО РГМУ Минздравсоцразвития РФ в период с 2005 по 2011 г.г.

    Публикации

    По теме диссертации опубликована 41 научная работа, из них 23 в журналах, рецензируемых ВАК Минобрнауки РФ, получены 2 патента Российской Федерации и 1 авторское свидетельство на изобретение Российской Федерации.

    Структура и объём диссертации

    Диссертация изложена на 379 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы, содержащей изложение материалов и методов, 5 глав результатов собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 256 источников (56 отечественных и 200 зарубежных). Работа иллюстрирована 26 таблицами и 56 рисунками.

    Похожие диссертации на Изучение механизма действия простагландинов конкурентных групп (простагландина Е2 и простагландина F2a) на течение артериальной гипертонии и регуляцию сердечно-сосудистой системы (клинико-эксперимента