Введение к работе
Актуальность проблемы. Проблема глаукомы в настоящее время остается одной из наиболее актуальных в современной офтальмологии. Число больных глаукомой наземном шаре составляет 105 млн., из них слепых на оба глаза - 9,1 млн. (Quigley Н., 2006). По расчетным данным J .Goldberg (2000) к 2030 году число больных глаукомой может увеличиться в два раза. 80% этих больных живут в развивающихся странах. С возрастом число больных увеличивается от 0,1-1,5% в 40-45 лет до 10-14% в 75 лет и выше (Куроедов А.В., 2004).
Такое положение обусловлено многообразием клинических проявлений, сложностью патогенеза, трудностью ранней диагностики и лечения, а также серьезностью прогноза и медико-социальной значимостью заболевания (Кириленко Ю.А., Березников А.И., 2003).
Несмотря на серьезный прорыв в понимании проблем глаукомы до настоящего времени не предложено достаточно эффективных методов предупреждения заболевания и его раннего выявления.
На сегодняшшй день, практически половина людей, приходящих с серьезными жалобами к офтальмологу, страдают глаукомой либо имеют подозрения на это заболевание. При этом в 90% случаев, глаукома обнаруживается на поздних стадиях (Егоров Е.А., 2007). Учитывая тот факт, что в ранней фазе глаукома протекает почти бессимптомно, выявление данного заболевания в большинстве случаев происходит на стадиях, сопровождающихся уже необратимыми изменениями зрительного нерва. Сложившаяся ситуация ставит вопрос о необходимости поиска и разработки новых эффективных молекулярно-генети-ческих методов ранней диагностики глаукомы и внедрения их в повсеместную практику.
В настоящий момент есть все основания относить первичную открытоу-гольную глаукому (ПОУГ) к группе мультифакторных заболеваний, развивающихся на фоне апоптоза, связанного с активацией проапоптических генов и белковой перестройкой содержимого клеток. Следовательно, именно первичные генетические эффекты определяют интенсивность патологических изменений в ганглиозных клетках сетчатки, местную реакцию глаз на возрастные сдвиги и анатомические особенности дренажной системы и диска зрительного нерва (Кириленко Ю.А., Березников А.И., 2003).
За последние годы проводилось энергичное исследование картографии ПОУГ-генов. В результате проводимых комбинированных исследований было обнаружено более 20 генов, непосредственно влияющих на развитие первичной открытоугольной глаукомы. Также было идентифицировано множество генов, потенциально связанных с ПОУГ (Bao J.F., 2005). Таким образом, исследования в этом направлении в дальнейшем смогут обеспечить хорошие
ресурсы для анализа мутации в ассоциированных исследованиях, углубить представления о патогенезе и разработать новые эффективные методы прогнозирования и ранней диагностики данного заболевания (Dimasi D.P., 2006).
Цель я задачи исследования. Основной целью исследования явилось изучение роли проапоптотических полиморфизмов генов p53(C72G), р21(СЗ 1 А) и TNFa(G308A) в патогенезе первичной открытоугольной глаукомы и оценка их прогностического значения для развития заболевания у резидентов Забайкальского края в этническом аспекте.
Решались следующие задачи:
-
Выявить и оценить частоту встречаемости, экспрессивность и пенетрант-ность проапоптотических аллельных вариантов генов TNFa, р53, р21 у больных первичной открытоугольной глаукомой и здоровых резидентов в русской и бурятской этнических группах.
-
Оценить прогностическое значение проапоптотических аллелей p53(C72G), р21(С31А) и TNFa (G308A) для развития ПОУҐ у представителей этнических групп Забайкальского края.
-
Сравнить степень риска возникновения первичной открытоугольной глаукомы у лиц-носителей различных аллельных вариантов генов TNFa, р53, р21.
-
Изучить влияние проапоптотических вариантов p53(C72G), р21(С31А) и TNFa (G308A) на особенности течения первичной открытоугольной глаукомы в русской и бурятской этнических группах.
-
Сравнить содержание провоспалительных цитокинов IL-1 и.TNFa в слезной жидкости больных-носителей различных аллельных вариантов генов TNFa, р53, р21 и здоровых резидентов в русской и бурятской этнических группах.
Научная новизна. Впервые обнаружено, что проапоптотические аллель-ные варианты p53(C72G), р21 (СЗ1 А) и TNFa(G308A) предрасполагают к развитию первичной открытоугольной глаукомы, влияют на скорость прогресси-рования и тяжесть течения заболевания в русской и бурятской этнических группах.
Обнаружено, что экспрессивность изучаемых полиморфизмов выявляется в максимальной степени в сочетании с проапоптотическим вариантом гена р53.
Впервые установлено, что проапоптотические полиморфизмы p53(C72G), р21(С31А) и TNFa(G308A) повышают риск развития первичной открытоугольной глаукомы среди русских в более значительной степени, по сравнению с представителями бурятской этнической группы.
Впервые предложен механизм формирования толерантного внутриглаз-
ного давления у лиц-носителей различных вариантов гена р53.
Теоретическая и практическая значимость работы. В результате исследования получены новые данные о патогенезе первичной открытоугольной глаукомы, демонстрирующие роль проапоптотических полиморфизмов p53(C72G), р21 (СЗ 1 А) и TNFa (G308А) в механизме развития заболеваїтя. Носительство проаноитотических аллелей оказывает влияние на тяжесть течения ПОУГ среди представителей русской и бурятской этнических групп Забайкальского края.
Выявленные факты позволяют оценить риск заболевания ПОУГ в этническом аспекте и разработать новые методы прогнозирования и ранней диагностики глаукомы среди резидентов русской и бурятской популяции. Получеїшьіе сведения о наличии p53(C72G), р21(СЗ I А) и TNFa (G308A) могут быть включены в генетический паспорт индивидуумов и совместно с другими полиморфизмами использоваться для оценки риска развития глаукомы.
Внедрение результатов работы. Теоретические положения, раскрываемые в диссертации, внедрены в учебный процесс на кафедрах нормальной и патологической физиологии ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия, а также в перечень диагностических мероприятий по выявлению наследственной предрасположенности к глаукоме в офтальмологическом отделении Диагностической поликлиники при ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия и Краевой детской клинической больницы Забайкальского края.
Публикации. По теме диссертации опубликовано пять печатных работ, в том числе одна - в издании, определенном ВАК Министерства образования и науки РФ.
Апробация диссертации. Результаты исследований доложены на Всероссийской конференции, посвященной 55-летию Читинской медицинской академии (Чита, 2008), на Межрегиональной конференции, посвященной 100-летию офтальмологической службы Забайкальского края (Чита, 2009), конференции, посвященной 80-летию Дорожной клинической больницы на ст. Чита-II (Чита, 2007), на заседании Читинского отделения Физиологического общества им. И.П. Павлова.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 279 работ, из них - 48 отечественных и 131 зарубежных авторов, иллюстрирована 21 таблицей, 14 рисунками.
Основные положения, выносимые на защиту: I. Распределения полиморфизмов генов p53(C72G), р21(СЗ 1 А) и TNFa(G308A)
у резидентов Забайкальского края имеет этнические особенности. Частота встречаемости проапоптотических аллельных вариантов генов р53, р21 и TNFa относительно выше среди лиц бурятской национальности, как среди больных ПОУГ, так и среди здоровых резидентов.
-
Экспрессивность и пенетрантность проапоптотических полиморфизмов р53 и TNFa выше среди представителей русской этнической группы. Наиболее высокая экспрессивность проапоптотических аллельных вариантов выявляется у носителей сочетанных полиморфизмов гена р53.
-
Полиморфизм проапоптотических генов p53(C72G), р21(С31А) и TNFa (G308A) влияет на риск развития первичной открытоуголыюй глаукомы и определяет тяжесть течения заболевания у представителей русской и бурятской этнических групп. Носительство проапоптотических аллельных вариантов p53(C72G), р21(С31А) и TNFa(G308A) влияет на скорость про-грессирования глаукоматозного процесса и предрасполагает к развитию двустороннего поражения глаз.
-
Полиморфизм гена р53 детерминирует резистентность ганглиозных клеток сетчатки к воздействию повышенного офтальмотонуса и определяет уровень толерантного внутриглазного давления. Здоровые резиденты русской и бурятской национальности с цроапоптотическим полиморфизмом р53 имеют более низкий уровень толерантного внутриглазного давления, чем лица с антиапоптотическпми аллельными вариантами.
