Морфологическая характеристика органов экспериментальных животных при пероральном введении детонационных наноалмазов [Электронный ресурс] Тян Анатолий Геннадьевич

Содержание к диссертации

Введение

Глава №1 Обзор литературы 13

1.1 Общие сведения о новых материалах медико-биологического назначения 13

1.2. Краткие сведения о свойствах не алмазных наночастиц и их применении в медико-биологических целях 15

1.3. Свойства алмазной поверхности алмазоподобных пленок 18

1.4. Свойства алмазной поверхности алмазов микронных размеров 22

1.5. Свойства наноалмаза детонационного синтеза нанометровых размеров 26

Глава №2. Материалы и методы 35

Глава №3 Результаты собственных исследований 42

Глава 3.1 Динамика потребления животными гидрозолей наноалмазов с

разной концентрацией частиц в ходе длительного эксперимента 42

Глава 3.2 Морфометрическая характеристика изменения исследованных органов экспериментальных животных при применении гидрозолей модифицированных наноалмазов 58

Глава 3.3 Гистологическая характеристика печени, почек и легких лабораторных мышей при пероральном приеме гидрозолей наноалмазов различной концентрации 75

Заключение 96

Выводы 104

Практические рекомендации 106

Список литературы 107

• Краткие сведения о свойствах не алмазных наночастиц и их применении в медико-биологических целях
• Свойства алмазной поверхности алмазов микронных размеров
• Морфометрическая характеристика изменения исследованных органов экспериментальных животных при применении гидрозолей модифицированных наноалмазов
• Гистологическая характеристика печени, почек и легких лабораторных мышей при пероральном приеме гидрозолей наноалмазов различной концентрации

Краткие сведения о свойствах не алмазных наночастиц и их применении в медико-биологических целях

В тоже время, совершенно очевидно, что благодаря физико-химическим свойствам и, прежде всего, высокоактивной с химической точки зрения поверхности наночастиц, такой материал должен проявлять высокие сорбционные свойства по отношению к биологическим макромолекулам, ионам металлов, различным химическим соединениям. Исходя из этого наноалмазы можно рассматривать как потенциальный адсорбент, который имеет перспективы применения как в различных областях биологии, так и в медицине.

Известно, что данный материал успешно применяется как полифункциональный адсорбент для выделения и очистки белков из рекомбинантных штаммов-продуцентов бактериальных клеток Е. coli и природных источников (Бондарь B.C., Пузырь А.П., 2000; Бондарь B.C., Пузырь А.П., 2003; Бондарь B.C., и др., 2003; Бондарь B.C., и др., 2004). Причем применение этого материала существенно упрощает и ускоряет процесс очистки искомых белков. Использование частиц наноалмазов открыло и новые возможности в создании индикаторных систем (биочипов), сенсорным элементом которых является комплекс наночастицы - маркерный белок (Пуртов К.В., и др., 2001; Пузырь А.П., и др., 2002; Пузырь А.П., и др., 2004.). Тест-системы, основанные на этом принципе, могут найти практическое применение для аналитических целей в различных областях биологии, биофизики, биохимии, экологии, медицине и т.д.

По-видимому, выраженные сорбционные свойства наноалмазов (например, 1 мг частиц может адсорбировать 0,3 - 0,5 мг белка (Бондарь B.C., и др., 2003)) свидетельствуют также и в пользу перспективности использования этого нового материала для медицинских целей. Например, наночастицы могли бы найти применение в клинической практике как энтеросорбент или носитель лекарственных препаратов, использоваться для создания новых тест-систем, расширяющих арсенал диагностических методов аналитической биохимии и иммунологии.

Однако следует отметить, что исследования, посвященные изучению возможностей применения наноалмазов, как нового материала медицинского назначения, практически отсутствуют. Работы, известные из доступной литературы и относящиеся к этой тематике, весьма немногочисленны, носят разноплановый характер, а полученные при этом результаты во многом неоднозначны и противоречивы.

Вероятно, впервые наноалмазы (как носитель) были применены в медико-биологических исследованиях в виде комплекса с белками, имеющими антигенную детерминанту, для пролонгированной наработки антител (Kossovsky N., et. al., 1995). Причем, авторы работы, были убеждены, что прямой контакт белковых молекул с поверхностью наночдстиц приводит к изменениям структуры белка и потере его функциональной активности. По этой причине поверхность наночастиц (агрегаты размером до 300 нм) предварительно покрывалась нейтральным сорбентом углеводной природы (целлобиоза), а уже на него адсорбировался нужный белок. Таким образом, поверхность наноалмазов в комплексе, применяемом для данных исследований, была экранирована как от взаимодействия с белковыми молекулами, так и с окружающими тканями. В ходе экспериментов было показано, что при внутримышечной инъекции кроликам полученных комплексов наноалмаз - целлобиоза - белок достигается пролонгированная наработка антител. Результаты проведенных исследований, подтверждающих этот факт, отражены авторами в серии последующих публикаций (Kossovsky N., et al. 1995).

В тоже время в отличие от предыдущих работ в экспериментах было показано, что ферменты, адсорбированные на поверхности частиц наноалмазов, могут сохранять свою каталитическую функцию. Установленный факт послужил основанием для применения комплексов наночастиц с адсорбированными маркерными белками (например, светоизлучающими) при создании индикаторных систем (биочипов), которые могут использоваться в биолюминесцентном микроанализе (Пуртов К.В., и др., 2001; Puzyr А.Р., Bondar V.S., 2003; Пузырь А.П., и др., 2004).

Недавно появились публикации, в которых сообщается, что наноалмазы обладают терапевтическими эффектами действия и могут применяться для лечения ряда заболеваний, включая раковые (Долматов В.Ю., 2001; Долматов В.Ю., 2003). Однако то обстоятельство, что доказательная база в данных публикациях весьма невелика и не всегда убедительна, к ним следует относиться крайне сдержанно. Настораживает и то обстоятельство, что развития данные исследования, вероятно, не получили, о чем свидетельствует отсутствие новых публикаций автора, посвященных данной тематике.

В этой связи, нельзя не учитывать также и результатов исследований, выполненных in vitro с наноалмазами и клетками млекопитающих. В экспериментах было установлено, что прямой контакт наночастиц с разными типами клеток млекопитающих (форменные элементы крови человека, клетки асцитной карциномы Эрлиха) приводит к их деструкции (Пузырь А.П., и др., 2002; Пузырь А.П., и др., 2003; Puzyr А.Р., et. al., 2004; Пузырь А.П., и др., 2005; Mitura К., Bartosz G., 2005; Mitura К., et al., 2005; Plotnikov V.M., et al., 2005).

На основании того, что наноалмазы взрывного синтеза содержат на поверхности ряд функциональных групп таких как -ОН, -СН3ОН, -CO(NH2), -NH2 было высказано предположение, что наночастицы могут выступать в роли противооксидантного вещества. В экспериментах in vitro с использование суспензии липосом была показана антиоксидантная активность наночастиц, сравнимая с такими растительными антиоксидантами как кварцетин и флавонол (Shugalei I.V., et al 2005).

Свойства алмазной поверхности алмазов микронных размеров

Результаты проведенного статистического анализа полученных данных позволяют выделить следующие моменты.

В опытной группе мышей, принимавших гидрозоли наноалмазов в концентрации 0,002 вес.% в течение всего эксперимента наблюдалось низкое среднесуточное потребление жидкости по сравнению с контрольной группой мышей (при р 0,05), за исключением первого и шестого месяца эксперимента.

В опытной группе мышей, принимавших гидрозоли наноалмазов в концентрации 0,01 вес.% отмечаются наименьшие отличия в количестве выпитой жидкости от количества выпитой воды в контрольной группе. В первый месяц эксперимента отмечалось некоторое повышение количества потребления гидрозоля по отношению к потреблению воды контрольными животными. В дальнейшем отмечались незначительные колебания относительно контроля, но достоверное уменьшение употребления жидкости отмечалось только на четвертый месяц эксперимента, что также наблюдалось и во всех опытных группах (при р 0,05). В последующем значимых различий в среднесуточном потреблении жидкости между этой опытной группой и контрольной группой мышей не регистрировалось.

В опытной группе, принимавшей гидрозоль наноалмазов концентрации 0,05 вес.% отмечается, что в первый месяц мыши среднесуточно пили жидкости больше, чем в контрольной группе, пившей дистиллированную воду (при р 0,05). Затем отмечается тенденция к уменьшению среднесуточного потребления жидкости по отношению к контролю (при р 0,05).

При сравнении среднесуточного потребления гидрозолей наноалмазов между опытными группами также отмечаются некоторые различия в объеме выпитой жидкости.

Так, в группе употреблявшей гидрозоль наноалмазов в концентрации 0,002 вес.%) отмечается, что мыши пили жидкости меньше, чем в группе принимавшей гидрозоль наноалмазов 0,01 вес.% только в первые два месяца эксперимента (при р 0,05), а затем различий не наблюдалось. При сравнении с группой, принимавшей гидрозоль наноалмазов в концентрации 0,05 вес.% также отмечается низкое потребление жидкости (при р 0,05), за исключением второго и третьего месяцев эксперимента.

Между группами, принимавшими гидрозоли наноалмазов в концентрациях 0,01 вес.% и 0,05 вес.% также отмечаются различия (при р 0,05) за исключением первого и пятого месяца эксперимента.

В целом, статистический анализ позволяет проинтерпретировать полученные данные следующим образом.

В контрольной группе животных наблюдается тенденция к увеличению количества потребляемой жидкости в течение первых 4-х месяцев. В течение последующего периода этот показатель заметно снижается (особенно, в течение 5-го месяца). Вполне вероятно, что наблюдаемый эффект может быть связан с физиологическими изменениями в организме животных, зависящими от сезонного фактора, и, как следствие, сопровождающимися снижением потребления ими жидкости в зимний (декабрь-январь) период. В пользу такого предположения могут свидетельствовать аналогичные изменения, наблюдаемые также и во всех опытных группах животных.

Динамики среднесуточного потребления гидрозолей с низкой (0.002 вес.%) и высокой (0.05 вес.%) концентрациями частиц качественно имеют разнонаправленный характер. В первый месяц опытные мыши в среднем за сутки потребляют больше высококонцентрированного гидрозоля, по сравнению с потреблением воды животными контрольной группы. В течение последующего периода наблюдений (начиная со 2-го месяца и заканчивая 6-м) отмечается динамика снижения этого показателя. Гидрозоль с низкой концентрацией наноалмазов потребляется опытными мышами хуже, чем вода контрольными животными на протяжении всего периода исследований и только к 6-му месяцу эти показатели выравниваются. Потребление гидрозоля со средней концентрацией частиц (0.01 вес.%) за исключением 1-го месяца наблюдений практически не меняется во все исследованные сроки и этот показатель близок показателю потребления воды контрольными животными.

Тенденцию к увеличению количества потребляемой жидкости контрольной группой животных (табл. 3) в течение первых 4-х месяцев вполне можно было бы объяснить влиянием возрастного фактора. Такая версия представляется вполне правомочной, поскольку в нашем случае в эксперимент были взяты молодые животные (возраст не более 2-3 месяцев), которые, естественно, в ходе длительного эксперимента растут, развиваются, увеличивают массу тела. Возможно также, что наблюдаемые изменения объясняются влиянием сезонного фактора (о чем уже говорилось выше). Отметим, что первые месяцы эксперимента приходились на летний (июль-август) и осенний (сентябрь-октябрь) периоды.

В тоже время различия, наблюдаемые в потреблении гидрозолей с разной концентрацией наночастиц, объяснить с аналогичных позиций весьма затруднительно, поскольку в течение всего периода исследований сколько-нибудь существенных различий в динамиках массы контрольных и опытных животных не было выявлено (см. ниже). Исходя из этого, относительно наблюдаемых различий мы вынуждены ограничиться пока следующим предположением. Нельзя исключить, что от концентрации наноалмазов могут, вероятно, зависеть органолептические свойства гидрозоля и, как следствие, количество его потребления животными.

Морфометрическая характеристика изменения исследованных органов экспериментальных животных при применении гидрозолей модифицированных наноалмазов

В данном разделе работы основными методами исследования являлись методы макроскопической анатомии. При этом в ходе длительного эксперимента производилось: наблюдение и осмотр тела животных, оценка динамики их общей массы, вскрытие (от греч. anatome - рассечение, расчленение) животных, визуальный контроль и изучение отдельных органов, оценка динамики их массы, а также определение отношения массы органов к общей массе животного.

В основе такого подхода лежит классическое определение анатомии, как науки о происхождении и развитии, формах и строении целого организма, его частей и отдельных органов, одними из основных задач которой являются исследование особенностей строения тела и отдельных органов в различные возрастные периоды формирования организма в условиях внешней среды. Причем макроскопическая анатомия (от греч. makros - большой) изучает строение тела, отдельных органов и их частей на уровнях, доступных невооруженному глазу (то есть при визуальном наблюдении), или при помощи приборов, дающих небольшое увеличение (например, при использовании увеличительного стекла- лупы).

В ходе исследований учитывалось также, что организм млекопитающих (например, лабораторных мышей) не является простой суммой отдельных частей и органов, а представляет собой единую сложноорганизованную биологическую систему, в которой объединяющую роль выполняет нервная и сосудистая системы. Исходя из этого, была высказана версия о возможности проникновения (всасывания) крайне малых (до 30-50 нм) по размеру агрегатов частиц наноалмаза (Puzyr А.P. et al., 2005), вводимых перорально, через стенки желудочно-кишечного тракта животного в кровеносное русло и, как следствие, последующего их перераспределения между отдельными органами и тканями. По этой причине для исследований были выбраны паренхиматозные органы, выполняющие в организме крайне важные функции: печень - основная барьерная функция, легкие - основная функция газообмена, почки - основная выделительная функция.

Высказанная идея основывалась на следующих фактах. Известно, что размер белковых молекул соизмерим, или превышает размеры частиц наноалмаза (а также малых агрегатов наночастиц, размер которых составляет несколько десятков нанометров) (Бондарь B.C. и др., 2003). Исходя из этого, можно предположить, например, что транспорт частиц через стенки желудочно-кишечного тракта может быть опосредован их взаимодействием с белками, осуществляющими транспортную функцию. Известно, в частности, что инкапсулированные частицы размером 5 нм могут транспортироваться в костную ткань (Гайдаш А.А., 1997). Было показано также, что при пероральном введении наноалмазов в организм лабораторных мышей у них в крови наблюдается повышение лейкоцитарного фона (Пузырь А.П. и др., 2004; Пузырь А.П. и др., 2005). В приведенных работах было высказано мнение о том, что наблюдаемый эффект является следствием неспецифического иммунного ответа, который опосредован взаимодействием наночастиц с макрофагами. Если допустить правильность высказанного предположения, тогда следует принять во внимание то обстоятельство, что для взаимодействия с макрофагальными клетками наночастицам необходимо, как минимум, проникнуть через стенку кишечника.

По указанным выше причинам, весьма важными с анатомической точки зрения параметрами, подлежащими изучению, представлялись: динамика общей массы тела мышей, а также состояние и динамика масс выбранных для исследования паренхиматозных органов под влиянием длительного перорального введения в организм животных частиц наноалмазов. Выбранные показатели являются важными интегральными характеристиками, отражающими в целом состояние организма животного в

59 процессе его роста и развития, воздействия многопараметровых факторов внешней среды, рациона питания, а также действия применяемого вещества (препарата, соединения и т.д.) при проведении длительных экспериментов.

За весь исследуемый период каких-либо отклонений в поведении и состоянии внешних покровов у животных всех изучаемых групп выявлено не было. Результаты динамики изменения общего веса контрольных и опытных животных, полученные в ходе длительного исследования, суммированы на рис. 14.

Как видно из представленных данных, изменение общей массы тела животных во всех испытуемых группах происходит синхронно. При этом не наблюдается сколько-нибудь существенных различий этого показателя во всех опытных группах мышей по отношению к контрольным животным. Из приведенного графика следует также, что в ходе эксперимента наблюдается временное снижение общей массы тела животных. Вероятной причиной этого могут являться изменения физиологии животных под воздействием сезонного фактора. Понижение общей массы тела мышей отмечается в период с середины октября до середины декабря и может быть связано с перестройкой их метаболизма, когда катаболические процессы (расщепление энергетически емких соединений, прежде всего, запасов жира), направленные на поддержание постоянной температуры тела и жизненно важных функций организма, превалируют. С позиций общей физиологии и биохимии такое объяснение вполне правомочно, поскольку общеизвестно, что в условиях понижения температуры внешней среды, процессы катаболизма в организме млекопитающих ускоряются.

. Важно заметить, что снижение общей массы тела животных отмечается в указанный выше временной интервал как в контрольной, так и в опытных группах (рис. 14). Полученные данные свидетельствуют в пользу того, что наблюдаемое временное уменьшение общей массы животных не связано с введением в их желудочно-кишечный тракт частиц наноалмаза. Исходя из этого, можно говорить также, что пероральное поступление в организм животных частиц модифицированных наноалмазов с гидрозолями в течение полугода (в среднем суммарно от 0,0162 до 0,454 грамм вещества на одно животное) не сказывается на их росте.

В ходе исследований проводилось трехэтапное (через 30, 90 и 180 дней) выведение из эксперимента части животных каждой исследуемой группы с целью обнаружения возможных анатомо-морфологических изменений изучаемых паренхиматозных органов и изъятия их для последующих гистологических исследований. Динамика изменения количества мышей в изучаемых группах отражена на рис. 15.

Необходимо отметить, что в процессе проведения длительного эксперимента несколько животных погибло по невыясненным причинам (рис. 15). Причем случаи единичной смертности отмечались как в опытных, так и в контрольной группе животных и не носили какого-либо системного характера. Из этих данных следует, что естественная незапланированная смертность экспериментальных животных не зависела от вида перорально принимаемой жидкости (воды или гидрозолей наноалмазов). Следует заметить, что после вскрытия погибших животных и исследования их внутренних органов не было выявлено каких-либо отклонений в их анатомическом расположении и сколько-нибудь выраженных изменений их общей морфологии (цвет, размеры, консистенция) (рис. 16). Вероятно, совместимые с жизнью незначительные отклонения в этих показателях, можно отнести к индивидуальным особенностям строения организма животных. Таким образом, исследования анатомо-морфологического характера не позволили выявить причину преждевременной гибели отдельных мышей. К факторам, которые вызвали незапланированную гибель нескольких животных, очевидно, можно отнести как индивидуальные особенности функционирования их организма, так и длительное содержание животных одного пола (самцы), переходные периоды года (лето-осень и осень-зима).

Гистологическая характеристика печени, почек и легких лабораторных мышей при пероральном приеме гидрозолей наноалмазов различной концентрации

Предметом данной диссертационной работы являлось изучение анатомических и гистологических показателей и характеристик экспериментальных животных при длительном пероральном введении в их организм частиц детонационных наноалмазов. Целесообразность и оправданность темы данной работы, поставленных целей и экспериментальных задач была продиктована необходимостью изучения возможных морфологических изменений на уровне, как целого организма, так и его отдельных органов при длительном введении в желудочно-кишечный тракт животных частиц наноалмазов.

Актуальность проведения такого рода исследований объясняется появлением значительного количества работ, направленных на разработку и создание новых нанотехнологий для различных областей медицины, а также поиском путей и возможностей применения новых материалов для таких целей. Например, известны сообщения, в которых исследуется возможность применения в медицинских целях наночастиц различной физической природы и химических свойств (золота, кремния, цинка, алюминия, ферромагнитных и диамагнитных материалов).

В связи с этим несомненный интерес для исследователей, работающих в данной тематике, могут представлять синтетические наноалмазы, получаемые при детонации сильных взрывчатых веществ (Ставер A.M. и др., 1984). Например, в медицинских целях такой материал, вероятно, мог бы использоваться в качестве адсорбента для выведения из организма нежелательных и токсичных соединений, а также в качестве носителя препаратов, применяемых в лечебных целях. На основе частиц наноалмаза могут создаваться также новые классы индикаторных тест-систем, пригодных для использования в медицинской диагностике. Эти предположения подкрепляются еще и данными литературы о том, что алмазные формы углерода (алмазоподобные пленки и алмазы микронных размеров) обладают хорошей биосовместимостью и превосходят по этому показателю иные материалы (например, Deamaley G., 1993; Lappalainen R., et al., 1998; Guglielmotti M.B., et al., 1999; Santavirta S., et al., 1999).

Тем не менее, очевидно, что для более обоснованной и объективной оценки возможности применения наноалмазов в медицинских целях требуются предварительные и всесторонние исследования их воздействия на организм экспериментальных животных. С этой целью нами был запланирован длительный шестимесячный эксперимент на лабораторных мышах линии ICR, в ходе которого на контрольных и опытных группах животных предполагалось исследовать динамику потребления ими воды и гидрозолей наноалмазов с разной концентрацией частиц (0,002 вес%, 0,01 вес.% и 0,05вес.% соответственно) и проводить при этом оценку общего морфологического и физиологического состояния макроорганизма, контролируемого по внешнему виду и состоянию животных и динамике их соматометрических показателей. В ходе эксперимента были определены также сроки (1, 3 и 6 месяцев), в которые проводилось изучение анатомического и гистологического состояния внутренних паренхиматозных органов (печень, легкие и почки) мышей контрольной и опытных групп. Для этого, в данные сроки часть животных из контрольной и опытных групп забивалась с соблюдением принципов эвтаназии, проводилось их вскрытие, при котором осуществлялась визуальная оценка состояния изучаемых внутренних органов и определение их анатомических характеристик (расположение, цвет, размер, консистенция, масса). Используя данные массы извлекаемых органов, проводился расчет индексов их массы по отношению к общей массе тела животного. После этого из полученных органов по стандартным методикам готовили гистологические препараты и проводили их сравнительное гистологическое исследование для оценки микроморфометрических показателей.

Следует отметить, что такого рода длительных медико-биологических исследований с применением детонационных наноалмазов до недавнего времени практически не проводилось. Можно привести только два сообщения на эту тему. В 1995 году наночастицы алмазов применили для пролонгированной наработки антител (Kossovsky N., et al., 1995). Существенным недостатком этого научного исследования являлось то, что авторам не удалось оценить истинных перспектив и возможностей данного материала. Вероятно, это произошло из-за принципиально неверного и необоснованного вывода, сделанного в работе, о том, что биологические макромолекулы (в данном случае, белки), взаимодействуя с поверхностью наноалмаза, должны претерпевать необратимые изменения и утрачивать свою функциональную активность. По этой причине наночастицы были использованы в данной работе как обычный твердый носитель, поверхность которого была предварительно экранирована как от взаимодействия с антигенным белком, так и от взаимодействия с тканями организма животного. Второе сообщение, об оригинальных лечебных свойствах наноалмазов, которые могут применяться в медицинской практике для лечения самых разных заболеваний, появилось в 2001 году (Долматов В.Ю., 2001). Очевидно, к этому сообщению следует отнестись весьма сдержанно и осторожно, поскольку оно носит, скорее, декларативный и необоснованный характер, так как не содержит серьезной доказательной экспериментальной базы.

Ограниченное число исследований медико-биологического характера с использованием детонационных наноалмазов, крайне удивительно по ряду причин. Во-первых, данный материал широко известен уже более 20 лет. Правда, до недавнего времени наиболее систематически он исследовался и применялся специалистами, работающими в области физики, химии, материаловедения, электроники, техники. Во-вторых, из уникального набора физико-химических свойств данного материала (высокоразвитая и химически активная поверхность частиц, их высокая химическая устойчивость) (Чиганова Г.А., 1994; Чиганова ГЛ., Чиганов С.А., 1999; Долматов В.Ю., 2001), казалось бы, следовал естественный вывод о том, что он является потенциальным универсальным адсорбентом, который может найти применение и в биологии, и в медицине. В подтверждение этого можно привести результаты исследований, проведенных в последние годы учеными Института биофизики СО РАН (Красноярск), в которых убедительно показаны возможности использования детонационных наноалмазов в различных областях биологии. В частности, нет сомнения в перспективности широкого применения наночастиц в качестве полифункционального адсорбента для решения задач прикладной биохимии, связанных с выделением и очисткой белков (Бондарь B.C., Пузырь А.П. 2000; Бондарь B.C. и др., 2003; Бондарь B.C. и др., 2004). Использование этих материалов открывает и новые возможности в создании индикаторных систем (биочипов), сенсорным элементом которых является комплекс наночастицы - маркерный белок (Пуртов К.В. и др., 2001; Пузырь А.П. и др., 2002; Puzyr А.Р., Bondar V.S., 2003; Пузырь А.П. и др., 2004). Тест-системы, основанные на этом принципе, также могут найти широкое применение для аналитических и диагностических целей как в различных областях биологии (биофизика, биохимия, экология, иммунология), так и в практической медицине.

Похожие диссертации на Морфологическая характеристика органов экспериментальных животных при пероральном введении детонационных наноалмазов [Электронный ресурс]

Морфо-функциональное состояние костной ткани, коры надпочечников и иммунокомпетентных органов при введении препаратов гидроксиапатитаСундукова Наталья Владимировна

Исследование периферических органов иммунной системы при введении в организм иммуномодуляторов нового поколения (экспериментально-морфологическое исследование)Чава Светлана Валерьевна

Характеристика протекторного действия гепарина при введении этанола и пчелиного яда экспериментальным животнымСмердова, Анна Вячеславовна

Температурные характеристики органа зрения в норме и при некоторых патологических процессахАнтончик Светлана Леонидовна

Морфофункциональная характеристика лимфоидных органов и стенки тонкой кишки при потреблении вод различного состава (экспериментальное исследование)Голубева Ирина Александровна

Морфофункциональная характеристика иммунокомпетентных структур внутренних органов при использовании биомодуляторов "Спорофтивин" и "ЛитАр" в условиях инфекционно-аллергического процессаСелякин Сергей Петрович

Характеристика системы крови женщин с воспалительными заболеваниями органов малого таза при включении в комплекс лечебных мероприятий продуктов пчеловодстваРусакова Наталия Леонидовна

Характеристика анатомических компонентов соматотипа лиц юношеского и первого периода зрелого возраста в норме и при некоторых заболеваниях органов пищеварительной системыПолисмак Олег Валерьевич

Молекулярно-цитологическая характеристика тимуса крыс при введении бактериального липополисахаридаТитова Ирина Васильевна

Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки пищевода при введении цитостатиковИсеева Елена Анатольевна