Введение к работе
Актуальность проблемы
В настоящее время цитогенетический анализ в гематологии играет важную роль в диагностике, прогнозировании течения заболевания и оценке эффективности применяемой терапии. Некоторые хромосомные нарушения строго ассоциируются с характерной клинической картиной и подтипом заболевания и в этом случае являются дополняющими, а в некоторых случаях и определяющими признаками онкогематологической патологии (Домрачева, Е.В., Асеева, Е.А., 2001). Данные литературы свидетельствуют, что при типичных для острых лейкозов хромосомных аберрациях смена локализации и/или повреждение структуры генов могут приводить к нарушению их экспрессии или к структурно-функциональным изменениям кодируемых ими белков. Данные изменения играют интегральную роль в патогенезе и в прогрессировании лейкозов (Белохвостов, А.С., 2003; Флейпгман, Е.В., 2008).
Группа острых лейкозов (ОЛ) чрезвычайно гетерогенна по своим морфологическим, иммунофенотипическим, цитогенетическим и молекулярно-генетическим характеристикам. Практическое значение цитогенетического исследования в данной группе патологий в настоящее время является общепризнанным, поскольку его результаты имеют решающее значение в диагностике, динамическом наблюдении и определении прогноза (Ворсанова, С.Г., 2006).
На современном этапе продолжается поиск новых неслучайных хромосомных перестроек при острых лейкозах и выявление их взаимосвязей с течением и прогнозом заболевания, эффективностью применяемой терапии.
Наименее изученными в этой области остаются проблемы комплексного исследования цитогенетических эффектов при ОЛ, включая, наряду с проведением стандартного исследования с использованием дифференциального окрашивания хромосом, оценку функциональной активности рибосомных генов (ФАРГ), уровня спонтанного мутагенеза в клетках как костного мозга, так и периферической крови, а также установление их клинической и прогностической значимости.
Изложенное выше, а также необходимость дальнейшего расширения представлений о состоянии хромосомного аппарата клеток при острых лейкозах de novo и в ходе терапии определили актуальность проведения настоящего исследования.
Цель исследования
Целью настоящего диссертационного исследования является изучение состояния хромосомного аппарата клеток костного мозга и периферической крови и установление его взаимосвязи с особенностями клинического проявления и течения острых лейкозов.
Задачи исследования
Для реализации поставленной цели были определены и последовательно решены следующие задачи:
-
Изучить с использованием методов дифференциального окрашивания кариотипы больных острым лейкозом в клетках костного мозга и периферической крови.
-
Оценить особенности клинического проявления и течения острых лейкозов у больных в популяции Курской области.
-
Изучить состояние функциональной активности рибосомных генов в клетках периферической крови больных острым лейкозом.
-
Изучить уровень спонтанного мутагенеза в клетках периферической крови больных острым лейкозом.
-
Установить взаимосвязи между особенностями клинического проявления заболевания и цитогенетическими эффектами в клетках больных острым лейкозом.
Научная новизна работы
Впервые получены данные комплексного исследования состояния хромосомного аппарата клеток костного мозга и периферической крови больных острым лейкозом, включая кариотип, функциональную активность рибосомных генов и уровень спонтанного мутагенеза, в неисследованной ранее популяции Курской области. Показано, что при различных вариантах лейкозов цитогенетические эффекты проявляют свои особенности, что важно для проведения дифференциальной диагностики. Впервые доказано, что цитогенетические эффекты взаимосвязаны с особенностями клинического проявления острых лейкозов, что открывает перспективы прогнозирования течения и исхода заболевания.
Практическая значимость
Полученные данные о цитогенетических эффектах при острых лейкозах могут применяться практическими врачами-гематологами и врачами ме-
дико-генетических консультаций для ранней оценки прогноза течения и исхода заболевания.
Практические рекомендации
-
Врачам-гематологам использовать обнаруженные в клетках костного мозга и периферической крови неслучайные хромосомные перестройки в качестве одного из ведущих прогностических факторов течения и исхода острого лейкоза в соответствии с разработанной стратификацией больных по группам благоприятного, промежуточного и неблагоприятного прогноза.
-
Использовать разработанные уравнения линейно-дискриминантной функции с целью прогнозирования течения острых лейкозов на основе комплексного цитогенетического исследования клеток костного мозга и периферической крови в практике врачей-гематологов и врачей медико-генетических консультаций.
Основные положения, выносимые на защиту
-
Острые лейкозы характеризуются широким разнообразием цитогенетических эффектов, касающихся изменений кариотипов, функциональной активности рибосомных генов и уровня спонтанного мутагенеза.
-
Варианты лейкоза (миело-/лимфобластный) характеризуются своими особенностями цитогенетических эффектов, прогнозом течения и исхода заболевания.
-
Функциональная активность рибосомных генов при острых лейкозах существенно ниже общепопуляционных показателей, при этом уровень различий касается и вариантов лейкозов (миело-/лимфобластных).
-
Больные острым лейкозом характеризуются высоким уровнем спонтанного мутагенеза по сравнению с общей популяцией. При этом проводимая химиотерапия способствует усилению спонтанного мутагенеза.
-
Полученные цитогенетические эффекты при острых лейкозах демонстрируют связи с особенностями клинических проявлений заболевания, что открывает возможности раннего прогнозирования течения и исхода заболевания.
Внедрение в практику
Результаты исследования внедрены в работу гематологического отделения Курской областной клинической больницы, Курской областной медико-генетической консультации, лаборатории кафедры биологии, медицин-
ской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета. По результатам исследования в работу гематологического отделения и медико-генетической консультации Курской областной клинической больницы внедрено предложение «Прогнозирование течения острых лейкозов на основе комплексного цитогенетического исследования клеток костного мозга и периферической крови с использованием метода дискри-минантного анализа».
Апробация и публикации
Результаты работы доложены на конференциях студентов и молодых ученых КГМУ (Курск, 2006, 2007, 2008, 2009), итоговых научных сессиях КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН, 80-ой конференции студенческого научного общества СПбГМА им. И.И. Мечникова «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2007), Международной молодежной научно-методической конференции «Проблемы молекулярной и клеточной биологии» (Томск, 2007), Международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования» (Италия, 2009), Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), V международной Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, 2010). По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ.
Структура и объем диссертации
