Введение к работе
Актуальность темы
Заболеваемость злокачественными новообразования в последние десятилетия в России постоянно возрастает и, как показывают расчеты, прирост числа онкологических больных в XXI веке будет постоянно увеличиваться На современном этапе, несмотря на развитие медицины, по-прежнему основными методами лечения рака остается хирургический и химиотерапевтический При основных локализациях неоплазий показатель резектабельности по отношению к числу заболевших не превышает 20%, а около 50% оперированных больных умирают в первые два года от прогрессирования заболевания После радикальных и условно-радикальных операций больные умирают не столько от рецидива опухоли, сколько от отдаленных метастазов, что свидетельствует о необходимости проведения системного лечения даже при местно-распространенных формах злокачественных новообразований Современные схемы химиотерапии оказываются недостаточно эффективными, прежде всего, при так называемых иммуночувствительных формах неоплазий (меланома, рак почки) и ряде относительно химиорезистентных форм рака (немелкоклеточный рак легкого, рак желудка, метастатические поражения печени и т п) Поэтому поиск методов, направленных на стимуляцию противоопухолевого иммунитета и повышение распознаваемости опухолевых антигенов, представляется перспективным [Давыдов М И с соавт , 2000]
Опухолевое поражение печени может быть как самостоятельным заболеванием, так и метастатическим, и отмечается при многих онкологических заболеваниях Но и в том и в другом случае развитие как первичного, так и метастатического узла в печени указывает на резкое ухудшение прогноза в течении заболевания Такое ухудшение прогноза связывают с тем, что развитие онкологического процесса в печени может наблюдаться на фоне практически полного истощения иммунной системы организма и, в частности, иммунной системы этого органа
Иммунная система печени включает в себя большинство компонентов врожденной иммунной системы (натуральные киллеры (НК), натуральные киллеры-Т-клетки (НКТ-клетки), дендритные клетки, макрофаги и др) и небольшую часть эффекторов специфического иммунитета (Т-клетки) [Beaudoin L et al, 2002] Взаимосвязь между этими двумя звеньями иммунной защиты печени до конца не изучена О роли специфического иммунного ответа известно достаточно много, гораздо меньше сведений посвящено другим субклассам мононуклеарных клеток печени, особенно об их участии в инициации иммунного ответа
НКТ-клетки печени составляют основную часть Т-клеточной популяции этого органа Информация о популяции НКТ-клеток в печени человека весьма малочисленна и противоречива Практически все сведения об их внутрипеченочной активации и взаимодействии с другими звеньями иммунной системы печени были получены в эксперименте на мышах Однако участие НКТ-клеток печени в противоопухолевом иммунитете остается мало изученным [Berzins S Р et al, 2004]
Очевидным является то, что НКТ-клетки охватывают более гетерогенную популяцию Т-лимфоцитов, чем считалось изначально [Fuji N et al, 2000] Дальнейший анализ функций НКТ-клеток печени и исследование их иммунофенотипа является крайне важным в оценке роли НКТ-клеток в противоопухолевом иммунитете
Цель исследования
Изучение иммунофенотипа и функциональной активности мононуклеарных лейкоцитов, выделенных из печени онкологических больных, пораженной опухолевым процессом
Задачи исследования
1 Изучить содержание лимфоцитов в пораженных метастазами и интактных участках печени
Исследовать морфологические особенности лимфоцитов печени, пораженной опухолевым процессом
Оценить цитотоксическую активность лимфоцитов из паратуморальной области и периферической крови онкологических больных
Провести сравнительный иммунофенотипический анализ мононуклеарных лейкоцитов паратуморальной области и интактных участков печени
Исследовать особенности иммунофенотипа и киллерных свойств лимфокин-активированных киллеров, генерированных из мононуклеарных лейкоцитов паратуморальной области, интактного участка печени и периферической крови
Основные положения, выносимые на защиту
На фоне развития опухолевого процесса в печени формируются лимфоидные инфильтраты, локализующиеся главным образом в паратуморальной области Лимфоциты, инфильтрирующие печень, представлены тремя основными популяциями клеток Т-клетками (CD3+), НК (CD16+, CD56+, CD57+) и НКТ (CD3+/CD56+)
Лимфоциты, выделенные из паратуморальной области, характеризуются более высоким уровнем НК-активности и цитотоксическим потенциалом по отношению к аутологичным опухолевым клеткам, по сравнению с лимфоцитами периферической крови онкологических больных
Лимфоциты, выделенные из пораженной опухолевым процессом печени, могут рассматриваться в качестве источника для получения лимфокин активированных киллеров (ЛАК) и их последующего использования для адоптивной иммунотерапии
Научная новизна
Впервые в сравнительном аспекте исследованы морфологические иммунофенотипические и функциональные свойства лимфоцитов, выделенных из параметастатического, интактного участков печени и периферической крови
онкологических больных
Установлено, что особенностью иммунного процесса при онкологических заболеваниях печени является формирование лимфоидных инфильтратов в паратуморальной области
Впервые установлено, что лимфоциты параметастатической области печени обладают высокой спонтанной цитотоксической и НК активностью, сопоставимой с таковой для ЛАК Впервые показана возможность получения из лимфоцитов печени онкологических больных ЛАК, способных эффективно лизировать аутологичные опухолевые клетки
Впервые установлено, что в области опухолевых узлов образуются лимфоидные инфильтраты, состоящие из Т-лимфоцитов, НК и НКТ, характеризующихся высоким уровнем экспрессии молекул адгезии и маркера пролиферации Ki 67 Исследованы имунофенотипические и функциональные свойства ЛАК, генерированных из лимфоцитов, инфильтрирующих печень
Получены новые данные о соотношении субпопуляции лимфоцитов в различных участках печени на фоне опухолевой прогрессии
Научно-практическая значимость
Полученные в работе данные расширяют представления о механизмах местного противоопухолевого иммунитета В ходе исследования отработан алгоритм экстракорпоральной генерации из лимфоцитов, выделенных из пораженной опухолевым процессом печени, ЛАК с высоким уровнем киллерной активности по отношению к аутологичным клеткам ЛАК, генерированные из лимфоцитов печени, могут быть использованы для локорегиональной адоптивной иммунотерапии радикально и условно-радикально оперированных больных с целью профилактики рецидивов метастазирования в печени
Апробация работы
Материалы диссертационной работы доложены на совместном заседании кафедры микробиологии с вирусологией и иммунологией ММА им И М Сеченова и лаборатории клеточного иммунитета ГУ РОНЦ им Н Н Блохина РАМН (Москва 2007г )
Основные положения диссертации доложены на II Российской конференции по иммунотерапии и иммунореабилитации (Москва, 2005 г ) и на VII Российской конференции «Новые отечественные противоопухолевые препараты» (Москва, 2007 г )
Публикации
Основные положения диссертации отражены в 9 научных публикациях Из них две в журналах, рекомендованных ВАК
Структура и объем диссертации
![Изучение влияния [Г]-D-глутаминил-L-триптофана (Бестима) на дифференцировку и функциональную активность лимфоцитов](/i/i/4503/301534.png "Изучение влияния [Г]-D-глутаминил-L-триптофана (Бестима) на дифференцировку и функциональную активность лимфоцитов Петров Александр Владимирович")
