Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Зхинококкозы относятся к числу широко распространенных тяжелых паразитарных болезней, , наносящих значительный ущерб здоровью человека (Збарский А.И.. 1986; Геллер И.Ю., 1989; Ястреб В.Б., 1930). Альвеококкоз (многокамерный эхинококкоз) отличается эндемичным распространением в северных и северовосточных регионах Евразии, отдельных странах Ближнего ВЪстока, Северной Америки. Эпизоотология и эпидемиология этой инвазии в значительной степени определяются природными и, реже, антропогенными факторами і Лукашенко Н.П., 19?5; Орлов П.С, Лей-кина Е.С., 1983; Яроцкий Л.С, 1390; Takao r'ujikura. 1931). Возбудителем альвеококкоза человека и промекуточных хозяев является личиночная стадия (ларвоциста) Echinococcus (Alveococcus ) aulti-locularis. Она локализуется преимущественно в печени, но нередко поравает и другие органы. При запоздалой диагностике болезнь монет перейти в хроническую форму, трудно поддающуюся не только химиотерапии, но и радикальному хирургическому лечению (Лукашенко Н.П., 1975; Найт Р., 1385: Щербаков A.M., 198b, 1990: Астафьев Б.ft., 1987; *Ucha P.N., Szyfres В.. 1387; Lightoulers М.Н. et al., 1933).
При разработке эффективных мер борьбы с эхинококкозами большое внимание уделяется усовершенствованию существующих и изысканию новых методов диагностики, терапии и профилактики инвазии, а такхе комплексному речении общебиологических, медицинских, ветеринарных и социально-экономических проблем (Лейкина Е.С., 1985. 1387;. Яроцкий Л.С, 1990; Маслов С.С, Никифорова Т.В.. 1990; Bogel Konrad et al., 1992; Battel! Є.. Martini Marco, 1992; Гельдыев А.Г.. 1993).
В диагностике этих . гельминтозов значительную, а иногда и решающую роль играют серологические методы исследования. Одним из главных препятствий в создании устойчивой высокочувствительной тест-системы для определения многокамерного эхинококкоза является слохность антигенного состава паразита, . которая 'приводит к перекрестным реакциям и ложноположительным результатам. Поэтому дальнейиее совершенствованче методов очистки антигенов альве-
ококка и испытание их при конструировании тест-системы для выявления специфических антител в сыворотках крови зараженных животных является одним из этапов на пути к решению вопроса ранней диагностики этого гельминтоза.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ: изучение диагностических свойств антигенных комплексов ларвоцист альвеококка и оценка в эксперименте полученных активных препаратов в микрогранулированной полиакриламид-ной тест-системе с магнитными сорбентами для обнаружения специфических антител.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ: - определение локализации антигенных комплексов в ларвоцистах альвеококка методом РИФ;
выделение и очистка антигенов альвеококка с использованием методов ультрафильтрации на мембранных фильтрах, колоночной и аффинной хроматографии;
получение антивидовых (крысы) иммунных сывороток к антигенам альвеококка и выделение из них иммуноглобулинов;
иммунохимическая характеристика полученных препаратов;
приготовление микрогранулированных магнитных сорбентов с иммобилизованными антигенами альвеококка;
разработка тест-системы для обнаружения антител к альвео-кокку в сыворотках зараженных животных с помощью непрямого имму-нофлюоресцентного метода.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА: - определены содержание и локализация паразитарных антигенных комплексов в ларвоцистах альвеококка имму-нофлюоресцентным методом;
рекомендованы методические приемы и предложена схема получения очищенных специфических антигенов при помощи ультрафильтрации на мембранных фильтрах и аффинной хроматографии;
впервые использованы микрогранулированные магнитные сорбенты в качестве твердофазного носителя антигенных комплексов альвеококка в диагностической тест-системе;
сконструирована высокочувствительная тест-система и разработан вариант метода непрямой реакции иммунофлюоресценции с гранулированными антигенными магнитными сорбентами для обнаружения антител в сыворотке крови зараженных альвеококкозом животных.
1. По материалам диссертационной работы составлены методические рекомендации, утвержденные директором Волгоградского на-
—учно-исследовательского противочумного института," протокол"N 3 Ученого совета от 17.03.93 г.: "Получение антигенов альвеококка и их иммунохимическая характеристика" и "Оценка диагностических свойств антигенов Alveococcus multilocularis , иммобилизованных в гранулированные магнитные сорбенты".
-
Полученные в результате исследования материалы используются при проведении иммунологических изысканий в научных лабораториях и при чтении курса лекций в Волгоградской медицинской академии на кафедрах медицинской биологии и генетики по разделу "Биологические основы паразитизма", инфекционных болезней и эпидемиологии в цикле "Паразитарные болезни" (Акты об использовании материалов диссертации от 26.01.95 г.).
-
Сконструированная тест-система рекомендована в практику отделением паразитологии Областного центра государственного санитарного эпидемиологического надзора Волгоградской области как способ определения антител при эхинококкозах (Акт о внедрении от 12.07.95 г.).
